涉及类视黄醇受体选择性通路的方法和组合物技术

本发明专利技术提供了涉及类视黄醇受体选择性通路的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】涉及类视黄醇受体选择性通路的方法和组合物相关申请依据美国法典第35编第119(e)节，本申请要求于20010年5月6日提交的美国临时专利申请序列号61/332,124的优先权，其整体通过引用并入本文。关于联邦政府资助研发的声明本专利技术在NIH授予的CA109345和美国陆军医学研究和材料司令部授予的W81XWH-08-1-0478的政府支持下完成。政府享有本专利技术的一些权利。
本专利技术的领域是涉及类视黄醇受体选择性通路的方法和组合物。
技术介绍
非甾体抗炎药(nonsteroidalanti-inflammatorydrugs，NSAID)的抗癌作用是公认的(Tegeder，I.等，FASEBJ15(12)，2057-2072(2001)；Kashfi，K.&Rigas，B.，BiochemPharmacol70(7)，969-986(2005))。NSAID通过抑制环氧合酶(COX-1和COX-2)阻断类花生酸产生。自从发现定期使用阿司匹林降低结肠癌发生率以后，NSAID作为理想的癌症化学预防剂就受到了重点关注。遗憾的是，伴随出现的副作用(包括已知与COX-2抑制有关的威胁生命的心血管并发症)使得NSAID的理想抗癌作用黯然失色。尽管COX-2与致癌作用之间有联系，但是NSAID诱导既不包含COX-1也不包含COX-2的癌细胞的凋亡，这表明存在另外的细胞内靶点(Tegeder，I.等，FASEBJ15(12)，2057-2072(2001)；Kashfi，K.&Rigas，B.，BiochemPharmacol70(7)，969-986(2005))。
技术实现思路
实施方案涉及有关类视黄醇受体选择性通路的方法和组合物。在一些实施方案中，该通路靶向操纵肿瘤微环境。在一个实施方案中，提供了在癌细胞中诱导凋亡的方法。例如，可以提供用于预防或治疗癌症的组合物，例如本文所述的式(II)的化合物。在一些实施方案中，本文所述的包含化合物K-80003或K-80003类似物的组合物被用于治疗癌症。如本文所示，舒林酸硫化物(Sulindacsulfide)(下文中为“舒林酸”或“舒林酸硫化物”)与化合物RXRα以临床相关浓度结合并且以RXRα依赖性方式诱导凋亡，从而证明RXRα是舒林酸作用的细胞内靶点。还如本文所示，舒林酸强烈抑制癌细胞中的关键存活激酶AKT(蛋白激酶B)的活化。此外，N-端截短的RXRα(tRXRα)表现出调节癌细胞中的存活信号。如本文所述，当与TNFα组合时，舒林酸抑制TNFα诱导的tRXRα/p85α相互作用，引起死亡受体介导的凋亡通路活化。此外，如本文所述设计并合成的舒林酸类似物K-80003表现出增加的与RXRα的亲和力并且无COX抑制活性，而且在抑制动物的tRXRα依赖性AKT活化和tRXRα肿瘤生长方面显示出增强的功效。本文描述了用于癌症治疗的靶向凋亡通路的舒林酸衍生的RXRα配体。在一个实施方案中，提供了在癌细胞中诱导凋亡的方法，其包括：上调癌细胞中的肿瘤坏死因子-α(TNFα)活性，从而使癌细胞对AKT抑制敏感；以及使敏化的癌细胞与化合物相接触，其中已知所述化合物与类视黄醇X受体-α(RXRα)相互作用，并且其中已知所述化合物以环氧合酶-2(COX-2)通路非依赖性方式抑制蛋白激酶B(AKT)的活性。在本实施方案的一个方面中，上调TNFα活性包括将外源性TNFα引入癌细胞。在本实施方案的另一方面中，上调TNFα活性包括上调癌细胞中的内源性TNFα。在本实施方案的又一方面中，癌细胞是选自以下的癌细胞：肺癌细胞、乳癌细胞、前列腺癌细胞、肝癌细胞和结肠癌细胞。在本实施方案的又一方面中，癌细胞是选自以下的癌细胞：A549细胞、H460细胞、ZR-75-1细胞、MCF-7细胞、LNCaP细胞、PC3细胞、HepG2细胞、Caco2细胞和SW480细胞。在本实施方案的又一方面中，候选化合物是舒林酸的类似物，并且其中所述类似物表现出至少一种选自以下的特性：与RXRα结合时IC50小于舒林酸的IC50和与COX-2结合时IC50大于舒林酸的IC50。在本实施方案的又一方面中，所述类似物是选自以下的化合物：K-80001、K-80002、K-80003、K-80004和K-80005。在本实施方案的又一方面中，所述类似物是K-80003。在另一个实施方案中，提供了一种筛选能够在癌细胞中诱导凋亡的候选化合物的方法，其包括：向癌细胞提供候选化合物；和确定候选化合物是否能够具有至少一种选自以下的活性：在癌细胞中抑制AKT活性、活化胱天蛋白酶-8、活化BAX、抑制cFLIP和降解Bid。在本实施方案的一个方面中，确定候选化合物是否能够抑制AKT活性包括：通过用全反式视黄酸(全反式-retinoicacid，ATRA)或9-顺式-RA对癌细胞进行预处理；并且在施用候选化合物之后测量癌细胞中AKT水平的变化。在又一个实施方案中，提供了一种筛选能够在细胞中诱导凋亡的候选化合物的方法，其包括：向细胞提供候选化合物；以及确定候选化合物是否能够选择性地与截短的RXRα(tRXRα)蛋白结合。在本实施方案的一个方面中，候选化合物是选自以下的化合物：肽、蛋白质、核酸和小分子。在又一个实施方案中，提供了筛选能够在细胞中诱导凋亡的候选化合物的方法，其包括：向细胞提供候选化合物；以及确定候选化合物是否能够调节tRXRα蛋白。在本实施方案的一个方面中，候选化合物是选自以下的化合物：肽、蛋白质、核酸和小分子。在本实施方案的另一方面中，确定候选化合物是否能够调节tRXRα蛋白包括确定候选化合物是否能够防止tRXRα与p85α蛋白结合。在本实施方案的又一方面中，确定候选化合物是否能够调节tRXRα蛋白包括确定候选化合物是否能够防止RXRα经历蛋白质修饰。在本实施方案的又一方面中，所述蛋白质修饰包括磷酸化。在本实施方案的又一方面中，确定候选化合物是否能够调节tRXRα蛋白包括确定候选化合物是否能够防止tRXRα蛋白从细胞核迁移至细胞质。在又一个实施方案中，提供了一种筛选能够在细胞中诱导凋亡的候选化合物的方法，其包括：鉴定表达tRXRα的细胞；使细胞与候选化合物相接触；以及确定候选化合物是否诱导细胞凋亡。在本实施方案的一个方面中，所述候选化合物是选自以下的化合物：肽、蛋白质、核酸和小分子。在本实施方案的另一方面中，所述候选化合物是来自小分子文库的化合物。在本实施方案的又一方面中，所述候选化合物是来自肽文库的化合物。在本实施方案的又一方面中，所述细胞来自乳房或肝。在又一个实施方案中，提供了一种筛选能够抑制肿瘤生长的候选化合物的方法，其包括：鉴定表达tRXRα的肿瘤；使肿瘤与候选化合物相接触；以及确定候选化合物是否抑制肿瘤生长。在本实施方案的一个方面中，所述候选化合物是选自以下的化合物：肽、蛋白质、核酸和小分子。在本实施方案的另一方面中，所述候选化合物是来自小分子文库的化合物。在本实施方案的又一方面中，所述候选化合物是来自肽文库的化合物。在本实施方案的又一方面中，所述肿瘤是乳房或肝的肿瘤。在又一个实施方案中，提供了一种预防对象癌症的方法，其包括：鉴定相对于一般人群具有升高的癌症风险的对象；并且向对象提供抑制AKT活性的物质，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.05.06 US 61/332,1241.包含式(I)化合物的组合物：其中A为苯基，并且其中A被R3和0或1个R4取代；其中B为苯基，并且其中B被氟取代；其中R1为(CR5R6)nCOOH；其中R2为甲基；其中R3和R4独立地选自C2-C3烷基、-CF3、C3-C4环烷基、和C4-C5环烷基烷基；其中R5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓坤，苏迎，周虎，刘文，黄培强，
申请(专利权)人：桑福德伯纳姆医学研究所，厦门大学，
类型：
国别省市：