BTLA融合蛋白激动剂及其用途制造技术

本发明专利技术基于BTLA激动剂融合蛋白调节免疫响应的开创性发现。具体而言，本发明专利技术提供结合BTLA增强BTLA信号传导的融合蛋白。本发明专利技术进一步提供了用本文所描述的BTLA激动剂融合蛋白治疗癌症以及免疫和炎性疾病和病症的方法。

BTLA fusion protein agonist and its use

The invention is based on the pioneering discovery of BTLA agonist fusion protein to regulate immune response. Specifically, the present invention provides a fusion protein combining BTLA to enhance BTLA signal transduction. The invention further provides a method for treating cancer and immune and inflammatory diseases and diseases using the BTLA agonist fusion protein described herein.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】BTLA融合蛋白激动剂及其用途对相关申请的交叉引用本申请根据35U.SC§119(e)要求于2015年6月30日提交的美国申请序列号62/187,105的权益。在先申请的公开内容被认为是本申请的一部分并且通过引用整体并入本申请的公开内容。政府支持本专利技术部分是在国立卫生研究院授予的基金号为R01CA164679的政府支持下完成的。美国政府对本专利技术享有一定的权利。序列表的并入所附的序列表中的材料在此通过引用并入本申请中。所附的序列表文本文件，名称为BURN1680_1WO_Sequence_Listing，于2016年6月29日创建，且为19kb。该文件可在使用Windows操作系统的计算机上使用MicrosoftWord访问。专利
本专利技术一般涉及融合蛋白，更具体地涉及BTLA激动剂融合蛋白的开发和用途及其调节免疫响应和治疗疾病和病症的用途。专利技术背景肿瘤坏死因子(TNF)受体疱疹病毒进入介体(HVEM；TNFRSF14)是用于通过病毒病原体的操作以及癌症和自身免疫中的突变的焦点。在人中，HVEM与TNF超家族细胞因子、LIGHT和淋巴毒素α以及含有受体B和T淋巴细胞弱化物(BTLA)和CD160的免疫球蛋白(Ig)家族相互作用。膜相关的LIGHT、BTLA和CD160，均在受体接合后激活HVEM的下游NF-κB信号传导，而HVEM激活受体BTLA和CD160，导致相邻细胞之间的双向信号传导。细胞共表达的HVEM和BTLA或CD160还可形成这些蛋白质的细胞-内在复合物，其由于空间位阻而阻止这些受体接近细胞外配体。已经显示BTLA介导的抑制调节许多不同的细胞途径，包括T和B细胞中的抗原受体信号传导。在T细胞中，首次显示BTLA涉及抑制性信号传导途径，包括含有SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP)-1和2的激活。最近已显示BTLA调节树突细胞中的toll样受体信号传导以及γδT细胞中的IL-7信号传导。然而，在人自然杀伤(NK)细胞中，HVEM还可通过CD160促进细胞溶解和促炎途径，作为对人巨细胞病毒(HCMV)的宿主对抗措施。另外，描述在小鼠中CD160缺陷的最近工作证实了其在NK细胞中的促炎功能。对于经设计以抑制患有免疫介导的病理(如移植物抗宿主病或自身免疫性疾病)的患者中的淋巴细胞活性的新型疗法存在很大的未满足的需要。在这些疾病的许多类型中，存在有限量的经批准的治疗方法，或者对可用治疗不响应一些个体。作为新型疗法的有吸引力的目标是由致病性淋巴细胞表达的抑制性受体的对抗性激活，所述致病性淋巴细胞是自身免疫性疾病的原因。尽管在动物模型中取得了有希望的结果，开发经设计以激活人抑制性受体的基于抗体的疗法的尝试已经在很大程度上遇到失败。专利技术概述本专利技术基于BTLA激动剂融合蛋白调节免疫响应的开创性发现。具体而言，本专利技术提供结合BTLA增强BTLA信号传导的融合蛋白。本专利技术进一步提供了用本文所描述的BTLA激动剂融合蛋白治疗癌症以及免疫和炎性疾病和病症的方法。在一个实施方案中，本专利技术提供包括非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白的融合蛋白，其中所述融合蛋白包括所述HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。在一个方面，所述融合蛋白是BTLA激动剂。在另一个方面，所述融合蛋白包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变。在又一个方面，所述突变是S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在一个方面，所述融合蛋白进一步包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变，例如S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在另一个方面，所述融合蛋白包括HVEM蛋白质中的至少两个、三个、四个或更多个突变，例如S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在某些方面，所述融合蛋白包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变，如S58R；S58K；S58Q；L70D；L70E；L70N；L90A；S58R和L90A；S58R和G68T；S58R和L70W；S58R、L70D和L90A；S58R、G68T和L90A；S58R、L70W和L90A；S58R、G68T、L70D和L90A；或S58R、G68T、L70W和L90A。在一个方面，所述Fc蛋白是IgA、IgG、IgD、IgE或IgM。在另一个方面，所述Fc蛋白是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。在一个特定的方面，所述IgGFc蛋白是人的。在又一个实施方案中，本专利技术提供一种包括融合蛋白如非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白以及药学上可接受的载体的药物组合物。在一个方面，所述融合蛋白是BTLA激动剂。在另一个方面，所述融合蛋白包括HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。在另一个方面，所述融合蛋白包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变。在又一个方面，所述突变是S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在又一个方面，所述融合蛋白进一步包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变，例如S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在另一个方面，所述融合蛋白包括HVEM蛋白质中的至少两个、三个、四个或更多个突变，例如S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合。在某些方面，所述融合蛋白包括在所述HVEM蛋白中的至少一个突变，如S58R；S58K；S58Q；L70D；L70E；L70N；L90A；S58R和L90A；S58R和G68T；S58R和L70W；S58R、L70D和L90A；S58R、G68T和L90A；S58R、L70W和L90A；S58R、G68T、L70D和L90A；或S58R、G68T、L70W和L90A。在一个方面，所述Fc蛋白是IgA、IgG、IgD、IgE或IgM。在另一个方面，所述Fc蛋白是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。在具体的方面，所述IgGFc蛋白是人的。在一个实施方案中，本专利技术提供一种治疗BTLA相关病症的方法，包括将融合蛋白如非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白向需要其的受试者施用，由此治疗所述BTLA相关病症。在一个方面，所述BTLA相关病症是癌症或自身免疫性疾病或病症。在又一个方面，所述自身免疫性疾病或病症是阿狄森氏病(Addison'sdisease)、肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophiclateralsclerosis)、克罗恩氏病(Crohn'sdisease)、库兴氏综合征(Cushing'sSyndrome)、1型糖尿病、移植物抗宿主病、格雷夫斯氏病(Graves'disease)、归-伯二氏综合征(Guillain-Barrésyndrome)、红斑狼疮、多发性硬化症、牛皮癣、牛皮癣关节炎、类风湿性关节炎、肉样瘤病、硬皮病、系统性红斑狼疮、移植排斥或血管炎。在另一个方面，所述癌症是前列腺癌、结肠癌、腹部癌、骨癌、乳腺癌、消化系统癌、肝癌、胰腺癌、腹膜癌、内分泌腺癌(肾上腺癌、甲状旁腺癌、垂体瘤、睾丸癌、卵巢癌、胸腺癌、甲状腺癌)、眼癌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.30 US 62/187,1051.一种包含非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。2.权利要求1的所述融合蛋白，其中所述融合蛋白是BTLA激动剂。3.权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中的至少一个突变。4.权利要求3所述的融合蛋白，其中所述突变选自S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A及其组合。5.权利要求4所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白进一步包含所述HVEM蛋白中的至少一个突变，所述突变选自S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A及其组合。6.权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中选自下组的至少一个突变：a)S58R；b)S58K；c)S58Q；d)L70D；e)L70E；f)L70N；g)L90A；h)S58R和L90A；i)S58R和G86T；j)S58R和L70W；k)S58R、L70D和L90A；l)S58R、G68T和L90A；m)S58R、L70W和L90A；n)S58R、G68T、L70D和L90A；以及o)S58R、G68T、L70W和L90A。7.权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Fc蛋白选自下组：IgA、IgG、IgD、IgE和IgM。8.权利要求7所述的融合蛋白，其中所述Fc蛋白选自下组：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。9.权利要求7所述的融合蛋白，其中所述IgGFc蛋白是人的。10.一种包含融合蛋白以及药学上可接受的载体的药物组合物，所述融合蛋白包含非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白。11.权利要求10所述的药物组合物，其中所述融合蛋白是BTLA激动剂。12.权利要求10所述的药物组合物，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。13.权利要求10所述的药物组合物，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中的至少一个突变。14.权利要求13所述的药物组合物，其中所述突变是S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A及其组合。15.权利要求14所述的药物组合物，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中的选自S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A及其组合的至少一个突变。16.权利要求10所述的药物组合物，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中选自下组的至少一个突变：a)S58R；b)S58K；c)S58Q；d)L70D；e)L70E；f)L70N；g)L90A；h)S58R和L90A；i)S58R和G86T；j)S58R和L70W；k)S58R、L70D和L90A；l)S58R、G68T和L90A；m)S58R、L70W和L90A；n)S58R、G68T、L70D和L90A；以及o)S58R、G68T、L70W和L90A。17.权利要求10所述的药物组合物，其中所述Fc蛋白选自下组：IgA、IgG、IgD、IgE和IgM。18.权利要求17所述的药物组合物，其中所述Fc蛋白选自下组：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。19.权利要求17所述的药物组合物，其中所述IgGFc蛋白是人的。20.一种治疗BTLA相关病症的方法，其包括将含非天然存在的HVEM蛋白和Fc蛋白的融合蛋白施用于对其有需要的受试者，由此治疗所述BTLA相关病症。21.权利要求20所述的方法，其中所述BTLA相关病症是癌症或自身免疫性疾病或病症。22.权利要求21所述的方法，其中所述自身免疫性疾病或病症选自下组：阿狄森氏病、肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophiclateralsclerosis)、克罗恩氏病、库兴氏综合征、1型糖尿病、移植物抗宿主病、格雷夫斯氏病(Graves'disease)、归-伯二氏综合征(Guillain-Barrésyndrome)、红斑狼疮、多发性硬化症、牛皮癣、牛皮癣关节炎、类风湿性关节炎、肉样瘤病、硬皮病、系统性红斑狼疮、移植排斥或血管炎。23.权利要求21所述的方法，其中所述癌症选自下组：前列腺癌、结肠癌、腹部癌、骨癌、乳腺癌、消化系统癌、肝癌、胰腺癌、腹膜癌、内分泌腺癌(肾上腺癌、甲状旁腺癌、垂体瘤、睾丸癌、卵巢癌、胸腺癌、甲状腺癌)、眼癌、头颈癌、神经(中枢神经和周围神经)癌、淋巴系统癌、盆腔癌、皮肤癌、软组织癌、脾癌、胸癌或泌尿生殖道癌。24.权利要求20所述的方法，其中BTLA信号传导是增加的。25.权利要求20所述的方法，其中所述融合蛋白是BTLA激动剂。26.权利要求20所述的方法，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白的胞外结构域和Fc蛋白。27.权利要求20所述的方法，其中所述融合蛋白包含SEQIDNO:2的氨基酸残基39-161和Fc蛋白。28.权利要求26或27中任一项所述的方法，其中所述Fc蛋白选自下组：IgA、IgG、IgD、IgE和IgM。29.权利要求28所述的方法，其中所述Fc蛋白选自下组：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。30.权利要求28所述的方法，其中所述IgGFc蛋白是人的。31.权利要求20所述的方法，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中的至少一个突变。32.权利要求31所述的方法，其中所述突变选自S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A及其组合。33.权利要求32所述的方法，其中所述融合蛋白进一步包含所述HVEM蛋白中选自S58R、S58K、S58Q、G68T、L70D、L70E、L70N、L70W、L90A或其组合的至少一个突变。34.权利要求20所述的方法，其中所述融合蛋白包含所述HVEM蛋白中选自下组的至少一个突变：a)S58R；b)S58K；c)S58Q；d)L70D；e)L70E；f)L70N；g)L90A；h)S58R和L90A；i)S58R和G86T；j)S58R和L70W；k)S58R、L70D和L90A；l)S58R、G68T和L90A；m)S58R、L70W和L90A；n)S58R、G68T、L70D和L90A；以及o)S58R、G68T、L70W和L90A。35.权利要求20所述的方法，进一步包括施用免疫响应调节剂或化学治疗剂。36.权利要求35所述的方法，其中所述免疫响应调节剂选自下组：类花生酸类物质、细胞因子、前列腺素、白细胞介素、趋化因子、检查点调节剂、TNF超家族成员、TNF受体超家族成员和干扰素。37.权利要求35所述的方法，其中所述免疫响应调节剂选自下组：CXCL-8、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL11、CXCL10、IL1、IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL7、IL8、IL9、IL10、IL11、IL12、IL13、IL15、IL17、IL17、IFN-α、IFN-β、IFN-ε、IFN-γ、G-CSF、TNF-α、CTLA4、CD20、PD1、PD1L1、PD1L2、ICOS、CD200、CD52、LTα、LTαβ、LIGHT、CD27L、41BBL、FasL、Ox40L、April、TL1A、CD30L、TRAIL、RANKL、BAFF、TWEAK、CD40L、EDA1、EDA2、APP、NGF、TNFR1、TNFR2、LTβR、HVEM、CD27、4-1BB、Fas、Ox40、AITR、DR3、CD30、TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRAIL-R4、RANK、B...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·F·韦尔，J·赛迪，T·艾维茜，B·米勒，N·K·克莱林，
申请(专利权)人：桑福德伯纳姆医学研究所，美国辉瑞有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US