针对GPCR:G蛋白复合物的结合结构域及来自其的用途制造技术

本发明专利技术涉及G蛋白偶联受体(GPCR)的结构生物学和信号传递的领域。本发明专利技术特别涉及针对和/或特异性结合GPCR:G蛋白复合物的结合结构域。还提供了编码这类结合结构域的核酸序列，和表达或能够表达这类结合结构域的细胞。本发明专利技术的结合结构域可用作G蛋白偶联受体的结构和功能表征的通用工具，所述G蛋白偶联受体与下游的异源三聚体G蛋白复合，并与多种天然或合成配体结合，用于研究G蛋白活化的动力学特征，以及用于利用GPCR:G蛋白复合物的筛选和药物发现工作。

The binding domain of GPCR:G protein complex and its use from it

The present invention relates to the structural biology of the G protein coupled receptor (GPCR) and the field of signal transmission. In particular, the present invention relates to a binding domain for and / or specific binding of GPCR:G protein complexes. The nucleic acid sequences that encode this kind of binding domain are also provided, and the cells that express or express such binding domains are expressed or expressed. With the general tools domain can be used as the structure and function of G protein coupled receptor characterization of the invention, the G protein coupled receptor and downstream of heterotrimeric G protein complex, and combined with a variety of natural or synthetic ligands for kinetics of activation of G, as well as for screening and drug complexes with GPCR:G protein discovery.

【技术实现步骤摘要】
针对GPCR:G蛋白复合物的结合结构域及来自其的用途本申请是申请日为2012年6月21日的、专利技术名称为“针对GPCR:G蛋白复合物的结合结构域及来自其的用途”的中国专利申请201280040585.9(PCT/EP2012/062036)的分案申请。专利
本专利技术涉及G蛋白偶联受体(GPCR)的结构生物学和信号传递的领域。本专利技术特别涉及针对和/或特异性结合GPCR:G蛋白复合物的结合结构域。还提供了编码这类结合结构域的核酸序列，和表达或能够表达这类结合结构域的细胞。本专利技术的结合结构域可用作G蛋白偶联受体的结构和功能表征的通用工具，所述G蛋白偶联受体与下游的异源三聚体G蛋白复合，并与各种天然或合成配体结合，所述工具用于研究G蛋白活化的动力学特征，以及用于利用GPCR:G蛋白复合物的筛选和药物发现工作。背景7次跨膜受体(7TMR)，也被称为G蛋白偶联受体(GPCR)是人基因组中的最大类的受体，是用于医学治疗的最常见靶向蛋白质类型。在过去60年间，从药理学至体内功能表征，对不同GPCR的理解发生了实质性进展。目前高分辨率的结构研究为GPCR活化和构成的活性的分子机制提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】
筛选特异性结合包含GPCR和G蛋白的复合物的结合结构域的方法，方法包括步骤：a)提供多个结合结构域，和b)在所述多个结合结构域中，筛选与包含GPCR和G蛋白的复合物结合的结合结构域，和c)分离与复合物结合的结合结构域。

【技术特征摘要】
2011.09.15 EP 11181357.2;2011.06.21 US 61/571,1591.筛选特异性结合包含GPCR和G蛋白的复合物的结合结构域的方法，方法包括步骤：a)提供多个结合结构域，和b)在所述多个结合结构域中，筛选与包含GPCR和G蛋白的复合物结合的结合结构域，和c)分离与复合物结合的结合结构域。2.根据权利要求1的方法，其中复合物还包含GPCR的配体，优选GPCR的激动剂。3.根据权利要求1或2的方法，还包括：从分离的结合结构域中，筛选阻止GTPγS引起的GPCR/G蛋白复合物解离的结合结构域。4.根据权利要求1至3之任一项的方法，还包括：从分离的结合结构域中，筛选特异性结合GPCR/G蛋白复合物中的G蛋白的结合结构域。5.根据权利要求4的方法，还包括：从分离的结合结构域中，筛选特异性结合位于所述G蛋白的α和β亚基之间的界面上的构象表位的结合结构域。6.根据权利要求4的方法，还包括：从分离的结合结构域中，筛选特异性结合限于所述G蛋白的α亚基的构象表位的结合结构域。7.根据权利要求1至6之任一项的方法，其中结合结构域是VHH结构域。8.产生特异性结合包含GPCR和G蛋白的复合物的结合结构域的方法，方法包括步骤：a)用GPCR/G蛋白复合物免疫动物以产生多个结合结构域；和b)根据权利要求1-7之任一项的方法，在所述多个结合结构域中，筛选与包含GPCR和G蛋白的复合物特异性结合的结合结构域。9.根据权利要求8的方法，其中用于免疫的复合物还包含GPCR的配体，优选GPCR的激动剂。10.根据权利要求8或9的方法，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·斯泰亚特，E·帕顿，T·拉尔曼斯，B·科比尔卡，S·拉斯穆森，S·格拉涅尔，R·K·苏娜哈拉，
申请(专利权)人：非营利性组织佛兰芒综合大学生物技术研究所，布鲁塞尔自由大学，利兰斯坦福青年大学托管委员会，密执安大学董事会，
类型：发明
国别省市：比利时,BE