一种制备α1-抗胰蛋白酶的方法技术

本发明专利技术提供了一种制备α1-抗胰蛋白酶的方法，它包括如下步骤：a.沉淀溶解b.PEG沉淀；c、病毒灭活；d、纯化；e.超滤；f、纯化；g.超滤透析；i.除菌分装,冻干。本发明专利技术方法采用改良Kistler和Nitschmann法工艺的废弃组分沉淀FIV来制备α1-抗胰蛋白酶，既解决了长期困扰的K-N工艺或其改良工艺制备α1-抗胰蛋白酶的难题，实现了血浆资源的综合利用，又对血浆蛋白主体分离工艺无干扰影响，PEG4000用量少，操作体积小，不使用离心设备，简化工艺，节省设备投入具备了很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及运用改良K-N法组份IV沉淀制备人α1-抗胰蛋白酶的方法，属血浆蛋白领域。
技术介绍
α1-抗胰蛋白酶(Alpha-lantitrypsin AAT)。分子由394个氨基酸组成，分子量为52000的糖蛋白，以天然有活性及变性无活性两种形式存在，由肝脏产生，主要功能为抑制胰蛋白酶和中性白细胞的弹性蛋白酶的活性，还可抑制糜蛋白酶，纤维蛋白溶酶等， 为人体内功能最强大的酶抑制剂之一。AAT先天性缺乏如基因突变或后天因素如长期吸烟或细菌感染会造成AAT活性中心失活，都会导致AAT功能性不足进而造成机体蛋白酶与抗蛋白酶系统失衡，肺组织抵抗弹性蛋白酶的能力下降，引起肺泡变形及末端小支气管以及下肺空间扩张等肺组织的慢性损害，会发生泡性肺气肿，慢性阻塞性肺病(C0PD)，成人呼吸道窘迫症(ARDS)，现阶段美国FDA批准的临床适应症为α1-抗胰蛋白酶遗传性缺乏引起的肺气肿，临床上一直就存在着采用AAT制剂进行增补治疗的需求。由于α1-抗胰蛋白酶自身具备抗炎，抗感染以及抗自身免疫反应等多功能特性，故在炎症性肠病(Inflammatory bowel disease IBD),脂膜炎,脉本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备α1?抗胰蛋白酶的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a.沉淀溶解：采用低温乙醇法中的改良K?N法组份Ⅳ沉淀溶解于8?12倍体积的pH8.1?9.0的缓冲液中，常温分散搅拌1小时，30?40℃加热搅拌1小时，常温搅拌4?14小时，得溶解液；b.PEG沉淀：将a步骤溶解液冷至5℃，加入PEG3000?6000，PEG浓度为6?10%（g/ml），搅拌1小时，用酸调整pH值至5.05?5.35，加入1.0?2.0%助滤剂，搅拌过滤得到滤液，滤液用碱调到pH7.0；c.病毒灭活：用S/D法灭活；d.纯化：采用阴离子交换层析纯化；e.超滤；f.纯化：采用阳离子交换层析纯化；g.超滤透析；h.15...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡骏，李泽林，刘波，初毅波，邓红，吴强，
申请(专利权)人：成都蓉生药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：