一种螺旋藻藻蓝蛋白及其提取方法技术

本发明专利技术涉及螺旋藻藻蓝蛋白的提取方法，将螺旋藻粉悬浊液采用反复冻融法结合机械破碎法处理得到螺旋藻细胞破碎液；采用30%和50%硫酸铵溶液分级盐析沉淀螺旋藻细胞破碎液得到藻蓝蛋白粗提液1；加入PEG20000和NaCl进一步沉淀出较高纯度的藻蓝蛋白粗提物；用磷酸盐缓冲液溶解藻蓝蛋白粗提物，制得藻蓝蛋白粗提液2；藻蓝蛋白粗提液2进而用PEG20000/Na2SO4双水相体系萃取，萃取后的下相经过透析除盐可得藻蓝蛋白精提液，冷冻干燥制备藻蓝蛋白成品。本发明专利技术提取工艺简单、成本低，适于间歇性和规模化生产加工高纯度、高收率的螺旋藻藻蓝蛋白成品。本发明专利技术制得的藻蓝蛋白粗提物可长时间贮存，进一步纯化制备的藻蓝蛋白成品具有良好的抗氧化自由基清除效果和荧光强度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然产物深加工
，具体涉及。
技术介绍
螺旋藻中包含多种生物活性物质，其中藻胆蛋白在螺旋藻干粉中含量丰富(占15-25，w/w%)，并具有重要的医药、保健、生物工程等方面应用价值。对于我国螺旋藻产业中普遍养殖的钝顶螺旋藻品系而言，其藻胆蛋白成分主要包含藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，二者在藻胆蛋白中的含量比例约为3 :1，其中藻蓝蛋白由于含量上的绝对优势(约占螺旋藻干粉的10-20，w/w%)致使其研究应用更为普遍。藻蓝蛋白不但在保健食品及医药领域具有抗辐射、抗癌、免疫调节、促进造血和延缓衰老等功能，据其纯度的不同更广泛地被应用于荧光探针和天然色素等生物工程、食品科学和精细化工等领域。然而由于螺旋藻藻胆蛋白中 的藻蓝蛋白分子和别藻蓝蛋白分子的亚基之间氨基酸序列同源性很高，造成藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白难以分离的技术瓶颈。目前螺旋藻藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的分离纯化通常采用羟基磷灰石介质进行层析分离，但存在吸附性弱、洗脱时间长、上样量少等问题，并且还需结合其它多步层析操作如体积排阻层析和离子交换层析等进一步提高藻蓝蛋白纯度。也有报道可通过反复盐析操作或双水相萃取技术，提高藻胆蛋白的纯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种螺旋藻藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）制备螺旋藻粉悬浊液：取螺旋藻粉溶解于磷酸盐缓冲液中，制得螺旋藻粉悬浊液；（2）制备螺旋藻细胞破碎液：将螺旋藻粉悬浊液采用反复冻融法结合机械破碎法处理，离心取上清，得到螺旋藻细胞破碎液；（3）制备藻蓝蛋白粗提液1：采用30%和50%硫酸铵溶液分级盐析沉淀螺旋藻细胞破碎液，透析除盐，得到藻蓝蛋白粗提液1；（4）制备藻蓝蛋白粗提物：将PEG20000和NaCl溶解至藻蓝蛋白粗提液1，配制成PEG20000?NaCl沉淀体系，静置、离心取沉淀，得到藻蓝蛋白粗提物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘杨，虞永蕾，钟名其，肖湘，赵永杰，
申请(专利权)人：汕头大学，
类型：发明
国别省市：