一种运用激流式生物反应器生产猪细小病毒灭活疫苗的方法技术

本发明专利技术涉及一种运用激流式生物反应器生产猪细小病毒灭活疫苗的方法，该方法是将猪细小病毒接种IBRS-2细胞，培养得到生产种毒；另外将IBRS-2细胞接种到激流式生物反应器中，然后将制备的猪细小病毒种毒接种到激流式生物反应器中培养的IBRS-2细胞，进行病毒的繁殖和培养；最后收获繁殖的病毒液，灭活，配苗即得猪细小病毒灭活疫苗。该方法使用激流式生物反应器和纸片载体避免了微载体生物反应器培养细胞产生的剪切力，进一步提高了细胞密度和活力，使细胞增殖病毒的能力增强。反应器能实时监控并自动调节细胞生长的最适条件，使每批收获的病毒液批间差异小，提高了疫苗质量稳定性、提高了生产效率、降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及属于兽用生物制品培育
，具体涉及。
技术介绍
猪细小病毒病(porcine parvovirus, PPV)是引起母猪繁殖障碍的只要疾病之一。主要表现为受感染的母猪，特别是经产母猪及血清学阴性经产发生流产，产死胎、畸形胎、木乃伊胎、弱胎及屡配不孕等，PPV感染后对胎儿也有危害，对其他年龄的猪感染后一般不表现明显的临床症状。该病在世界范围内广泛分布，大多数感染猪场呈地方性流行，猪群感染后很难净化，从而造成持续的经济损失，严重阻碍了全球养猪业的健康发展。PPV血清型单一，很少发生变异，但目前仍没有能有效地治疗的药物，因此，该病的免疫预防就显得更为重要。近年来，使用疫苗是预防猪细小病毒感染、提高母猪繁殖率的唯一方法。传统转瓶生产工艺是目前成熟的IBRS-2及其他疫苗基质细胞培养方法。但由于该方法操作繁琐，传代环节多，产品易被污染，产品质量难控制等缺陷，为其大规模应用带来障碍。近年来，也有学者运用微载体生物反应器进行细胞的和病毒的培养，进而生产疫苗。以微载体Cytodex系列应用最广，但微载体使用前后均有较复杂的处理步骤，并且细胞的增殖也受到剪切力，代谢产物的积累等因素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种运用激流式生物反应器生产猪细小病毒灭活疫苗的方法，其特征在于生产方法及步骤如下：（1）猪细小病毒种毒的制备：将从液氮中复苏的IBRS?2细胞转瓶传代，待细胞长成单层时，弃去培养液，将猪细小病毒接种到IBRS?2细胞，接种剂量为0.01MOI，接种后换2%血清的维持液培养，待IBRS?2细胞病变达80%以上时收获病毒液，将收获的病毒液进行病毒滴度测定和无菌检验，病毒液的TCID50≥?106.5TCID50/ml，无菌检测合格作为猪细小病毒种毒；（2）IBRS?2细胞接种激流式生物反应器：先将转管培养的IBRS?2细胞用胰蛋白酶进行消化，当消化下来的细胞液总体积为4升，细胞个数达到约2×10...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐明明，陈申秒，董新荣，
申请(专利权)人：山东滨州沃华生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：