酶法催化合成α-熊果苷的方法技术

本发明专利技术公开一种酶法催化合成α-熊果苷的方法，包括如下步骤：（1）斜面种子培养：是取野油菜黄单胞菌（Xanthomonascampestris）CGMCCNO.1243菌种，接种于斜面培养基培养；（2）液体菌种培养：挑取一环菌种，接种于基本发酵培养基中，置摇床上振荡培养，得到种子培养液；（3）将种子培养液，加入基本发酵培养基中，振荡培养24-48小时后，冷冻，离心收集菌体；用PBS缓冲液洗涤菌体2~3次，低温超声破碎，离心，取上清液，即为胞内粗酶液；（4）向胞内粗酶液加入蔗糖和对苯二酚反应，将反应产物分离纯化，即得α-熊果苷。本发明专利技术具有生产效率高，对苯二酚转化率高、成本低、工艺流程短等优点。

【技术实现步骤摘要】
OH;而0_熊果苷，即4-羟基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷，其结
本专利技术属于α -熊果苷的制备领域，特别涉及到一种酶法催化合成α _熊果苷的方法。
技术介绍
熊果苷(arbutin)，又名熊果甙、熊果素、熊果叶甙、熊果酚甙或杨梅式，是一种源于杜鹃花科熊果属的多年生常绿小灌木植物-熊果叶子细胞里的成份，具有良好的皮肤美白效果，广泛应用于化妆品行业。熊果苷依结构不同可分为α型和β型，β型，即4-羟苯基-β -2-D-吡喃葡萄糖苷，其结构式为

【技术保护点】
一种酶法催化合成α?熊果苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：????（1）斜面种子培养：是取野油菜黄单胞菌（Xanthomonas?campestris）CGMCC?NO.1243菌种，接种于斜面培养基，置于30℃~35℃下培养24~36小时；所述斜面培养基的组成质量浓度百分比如下：4%~6%蔗糖，0.5%蛋白胨，0.5%酵母膏，0.5%氯化钠，0.1%~0.15%磷酸氢二钾和2%琼脂，其pH值为7.0?7.8；（2）液体菌种培养：用接种环挑取一环菌种，接种于装有50mL基本发酵培养基的250mL三角瓶中，置30℃~35℃摇床上，以150r/min~200r/min振荡培养24~36小时，得到种子培养液；（3）将种子培养液，按接种量5%?10%，加入装有200mL基本发酵培养基的500mL三角瓶中，置30℃~35℃，以150r/min~200r/min振荡培养24?48小时后，冷冻，于6000~8000r/min下离心20~25min，收集菌体；用PBS缓冲液洗涤菌体2~3次，低温超声破碎，于6000~8000r/min下离心20~25min，取上清液，即为胞内粗酶液；（4）?向胞内粗酶液加入蔗糖和对苯二酚，于160?r/min~180r/min、35~40℃下反应36~48小时后，将反应产物分离纯化，即得α?熊果苷；所述蔗糖和对苯二酚加入的摩尔比为1∶30。...

【技术特征摘要】
1.一种酶法催化合成α-熊果苷的方法，其特征在于，包括如下步骤(I)斜面种子培养是取野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris) CGMCC NO. 1243菌种，接种于斜面培养基，置于30°C 35°C下培养24 36小时；所述斜面培养基的组成质量浓度百分比如下4% 6%蔗糖，O. 5%蛋白胨，O. 5%酵母膏，O. 5%氯化钠，O. Ρ/ΓΟ. 15% 磷酸氢二钾和2%琼脂，其pH值为7. 0-7. 8 ；(2)液体菌种培养用接种环挑取一环菌种，接种于装有50mL基本发酵培养基的250mL 三角瓶中，置30°C 35°C摇床上，以150r/mirT200r/min振荡培养24 36小时，得到种子培养液；(3)将种子培养液，按接种量5%-10%，加入装有200mL基本发酵培养基的500mL三角瓶中，置 30°C 35°C，以 150r/mirT200r/min 振荡培养 24-48 小时后，冷冻，于 600(T8000r/min 下离心2(T25min，收集菌体；用PBS缓冲液洗涤菌体2 3次，低温超声破碎，于600(T...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦慧芳，罗生芳，
申请(专利权)人：韦慧芳，罗生芳，
类型：发明
国别省市：