脂肪酶突变体制造技术

本发明专利技术涉及微生物工程技术领域，具体涉及一种脂肪酶突变体。本发明专利技术通过氨基酸残基的取代，对黑曲霉的脂肪酶进行改造，得到脂肪酶突变体。黑曲霉的脂肪酶不能耐受胰蛋白酶，但改造后的突变体蛋白对胰蛋白酶的耐受性得到显著增强。此外，本发明专利技术还构建了表达上述突变体的里氏木霉工程菌。本发明专利技术的脂肪酶突变体可以广泛应用于饲料领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程
，具体涉及一种脂肪酶突变体。
技术介绍
脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶，它催化天然底物油脂水解，生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构(Schmid等，1998)。脂肪酶具有广泛的应用价值，已成为市场上的第三大工业用酶。脂肪酶可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应，广泛应用于饲料添力口剂、油脂加工、食品、医药、日化等工业。酶学特性和酶的稳定性是影响其应用的关键因素之一；同时，很多酶学性质较好的蛋白在实际应用条件下，实际使用效果也不好。黑曲霉含有两个脂肪酶的同源基因，其中脂肪酶A研究较多(舒正玉等，2007，生物工程学报；杨江科等，2009，生物工程学报)。黑曲霉脂肪酶A的具有较好的胃酸和胃蛋白的耐受性；但是对胰蛋白酶耐受性较差(见专利申请201210497039. X)。由于动物肠道是消化和吸收脂肪的主要器官，肠道中pH接近中性同时含有大量的胰蛋白酶；因此，肠道的消化特点限制了黑曲脂肪酶A作为饲用酶制剂作用效果。寻找和克隆合适饲用脂肪酶的途径有2个一是筛选产新型酶的微生物；二是对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂肪酶突变体，所述的脂肪酶突变体是氨基酸序列为SEQ?ID?NO:1的脂肪酶的142位氨基酸由Lys变为His。

【技术特征摘要】
1.一种脂肪酶突变体，所述的脂肪酶突变体是氨基酸序列为SEQ ID NO: I的脂肪酶的142位氨基酸由Lys变为His。2.如权利要求I所述的脂肪酶突变体，其氨基酸序列为SEQID N0:2。3.如权利要求I所述的脂肪酶突变体，其编码基因的核酸序列为SEQID N0:3。4.一种脂肪酶突变体，所述的脂肪酶突变体是氨基酸序列为SEQ ID N0:2的脂肪酶的76位氨基酸由Lys变为Gin。5.如权利要求4所述的脂肪酶突变体，其氨基酸序列为SEQID N0:4。6.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄亦钧，吴秀秀，张青，徐娟，许丽红，王华明，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：