使用连续传代的细胞系制备新城疫病毒与疫苗的方法及其制品技术

本发明专利技术使用细胞系生产新城疫病毒与疫苗，特别是使用常见易培养的细胞系如MDCK、VeroE6、BHK-21、PK-15、IBRS-2等细胞系生产新城疫病毒及疫苗。本发明专利技术的方法使用培养病毒的细胞系是成熟的商业化的细胞系，具有生产工艺简单稳定、易操作，病毒含量高，批间差异小，质量易控，可显著提高疫苗产量和质量。利用本发明专利技术生产的新城疫疫苗安全性好、免疫力高，对新城疫强毒攻击具有完全的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鸡新城疫病毒与疫苗的方法及其制品，特别是指一种用细胞系制备鸡新城疫病毒与疫苗的方法及其制品。
技术介绍
新城疫病毒(NDV)属于副粘病毒科，是一种新城疫病毒单股负链RNA病毒。新城疫是NDV引起的一种急性败血性、高度传染性疾病，死亡率极高，对我国养禽业危害性极大。防治NDV的措施主要靠疫苗接种，特别是弱毒疫苗的应用。目前主要是用鸡胚生产NDV疫苗，而用鸡胚生产疫苗就有可能使疫苗中污染一些垂直传播疾病的病原，致使这些疾病随疫苗的应用而发生传播。使用异原传代细胞制备NDV疫苗，可以避免散播其他疾病的危险。但是新城疫病毒在上述传代细胞中的繁殖不理想，不能实现新城疫病毒在传代细胞中的有 效增殖，因此，目前新城疫病毒与新城疫疫苗的制备依然需要在鸡胚中接种并繁殖，而如上所述的鸡胚生产病毒与疫苗的缺点则限制了其应用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供用细胞系生产新城疫病毒与疫苗的方法，特别是使用常见易培养的细胞系如MDCK、VeroE6、BHK-21、PK-15、IBRS-2等细胞系生产新城疫病毒及疫苗的方法。该方法使用培养病毒的细胞系是成熟的商业化的细胞系，具本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用细胞系生产新城疫病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)细胞的培养：将细胞系经消化传代，以细胞培养液进行培养，形成生长良好的细胞单层；2)病毒接种与吸附：将新城疫病毒接种于上述生长良好的细胞单层，进行病毒吸附；3)细胞的孵育：换用细胞维持液培养后，加入300mmol/L的D?氨基葡萄糖孵育；4)病毒的繁殖：将上述孵育剂洗去，重新加入细胞维持液培养细胞系以繁殖新城疫病毒；5)病毒的收获：收获含有新城疫病毒的培养液。

【技术特征摘要】
1.一种用细胞系生产新城疫病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤 1)细胞的培养将细胞系经消化传代，以细胞培养液进行培养，形成生长良好的细胞单层； 2)病毒接种与吸附将新城疫病毒接种于上述生长良好的细胞单层，进行病毒吸附； 3)细胞的孵育换用细胞维持液培养后，加入300mmol/L的D-氨基葡萄糖孵育； 4)病毒的繁殖将上述孵育剂洗去，重新加入细胞维持液培养细胞系以繁殖新城疫病毒； 5)病毒的收获收获含有新城疫病毒的培养液。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，步骤2)中接种用的新城疫病毒是使用细胞系生产的新城疫病毒。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的新城疫病毒是新城疫病毒Lasota株。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述的细胞系为MDBK细胞系、V eroE6细胞系、BHK-21细胞系、PK-15细胞系、IBRS-2细胞系的任意一种或几种。...

【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：