新城疫病毒株rLX/H9HA及其构建方法和应用技术

本发明专利技术表达H9亚型禽流感病毒（AvianInfluenzaVirus）血凝素蛋白的重组新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus)rLX/H9HA，保藏号为CGMCCNo：6652。本发明专利技术是利用已建立的NDV弱毒LX株的反向遗传操作平台，将H9N2亚型AIV流行株?A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012的HA基因插入LX株基因组全长转录载体pLX中，得到含有H9N2亚型AIVHA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pLX-H9HA。经转染获得的重组病毒rLX/H9HA在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，连续传多代仍能稳定表达HA蛋白，适合于疫苗的大规模生产，可用于制造疫苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及应用反向遗传技术，拯救一株以新城疫病毒为载体表达H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组疫苗株rLX/H9HA，用于研制疫苗。
技术介绍
反向遗传操作技术(Reversegenetics manipulation technique)是指将 RNA病毒基因组RNA逆转录成cDNA，在体外通过采用基因突变、基因插入、基因敲除、基因置换等方法人为构建新的具有感染性的病毒，以研究病毒的基因组结构及功能和病毒宿主之间的相互作用等，也叫全长感染性cDNA克隆技术，又常被称为“病毒拯救”。解决了 RNA病毒基因组难以操作这一难题，同时为新型疫苗的研发提供了新的思路。新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)是单股、不分节段的负链RNA病毒，属于副粘病毒科成员。按照标准的致病性指标可以将病毒分为速发型(强毒)、中发型(中等毒力)和缓发型(弱毒)。基因组长度大约15kb，其结构为3’ -1eader-NP-P-M-F-HN-L-trailer-5’，依次编码6种结构蛋白:核衣壳蛋白(Nucleocapsidprotein, NP)、磷蛋白(Phosphoprot本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株新城疫病毒(Newcastle?Disease?Virus)?rLX/H9HA，保藏号为CGMCC?No：6652。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘秀梵，丁平云，陈雨昕，刘晓文，胡顺林，王晓泉，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：