新城疫病毒rNDV-H52AH9及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus)rNDV-H52AH9，保藏号CGMCC?No：6654。本发明专利技术以新城疫病毒致弱株AI4为载体，将H5和H9亚型禽流感病毒的HA基因通过口蹄疫病毒2A基因串联在一起后插入到含有AI4基因组全长的转录载体pNDV/AI4中，获得重组NDV基因组全长克隆pNDV/AI4-H52AH9。经反向遗传操作获得了重组病毒rNDV-H52AH9，该重组病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度，且能同时稳定表达H5和H9亚型禽流感病毒的HA蛋白，为AI和ND的多联重组基因工程活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及应用反向遗传技术，拯救一株以新城疫病毒为载体共表达H5和H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组疫苗株rNDV-H52AH9，用于研制疫苗。
技术介绍
反向遗传操作技术(Reversegenetics manipulation technique)是指通过在体外构建RNA病毒的感染性分子克隆，将病毒基因组RNA逆转录成cDNA，在DNA分子水平上对其进行各种体外人工操作，由病毒基因组cDNA和各种辅助蛋白来组装新的RNA病毒的一项研究技术[Rdmer-Oberddrfer A, Mundt E, Mebatsion T, Buchholz UJ, MettenleiterTC.Generation of recombinant lentogenic Newcastle disease virus from cDNA.J GenVirol 1999.80(11):2987— 95.]，也叫“病毒拯救”。由于最终“拯救”出的RNA病毒来源于cDNA克隆，因此，可通过中间过程中人为加入的DNA环节，在DNA水平上对RNA病毒基因组进行各种体外人工改造，解决了 RNA病毒基因组难以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株新城疫病毒(Newcastle?Disease?Virus)?rNDV?H52AH9，它的保藏号CGMCC?No：6654。

【技术特征摘要】
1.一株新城疫病毒(Newcastle Disease Virus) rNDV_H52AH9,它的保藏号 CGMCC No:6654。2.权利要求1所述新城疫病毒rNDV-H52AH9用于同时等量表达H5和H9亚型禽流感病毒的HA蛋白。3.权利要求1所述新城疫病毒rNDV-H52AH9的构建方法，其特征在于:以VIId亚型新城疫致弱株AI4的基因组全长转录载体pNDV/AI4为骨架，同时表达两株流行AIV毒株H5亚型 A...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘秀梵，丁平云，宋庆庆，王晓泉，刘晓文，胡顺林，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：