用于泌尿道感染的分子标记物制造技术

本发明专利技术涉及用于测定作为诊断标记物的血浆和尿中的降钙素原水平以鉴定患有泌尿道感染的患者的体外方法、用于执行所述测定的体外方法、用于诊断患有泌尿道感染的患者的试剂盒、以及降钙素原在诊断泌尿道感染中的有用性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于测定作为诊断标记物的血浆和尿中的降钙素原水平以鉴定患有泌尿道感染的患者的体外方法、用于执行所述测定的体外方法、用于诊断患有泌尿道感染的患者的试剂盒、以及降钙素原在诊断泌尿道感染中的有用性。
技术介绍
泌尿道感染(UTI)是一个非常常见的问题，往往与尿导管的使用相关(Hooton TM 等.Clin Infect Dis. 2010Mar 1，50 (5) : 625-63)，并且通常是由肠和外生殖器中的腐生菌引起的，而在不太常见的情况下是由真菌和病毒引起的。这些有机体在某些条件下可以经由尿道定植到泌尿道中，直至到达膀胱。在临床上，泌尿系感染表现有发热、排尿困难、痛性尿淋浙、尿频、尿急、和中度下背痛。所述临床症状未必足以提供诊断，尤其是在重症监护病房中，在重症监护病房中， 患者往往无法交流他们的症状,并且各种合并症往往会掩盖感染的准确起源。因此，对于分离所涉及的病原体以及评估任何并发症并鉴定出特异性疗法两者来说，都需要实验室检测。用于诊断泌尿道感染的可选技术的代表为尿培养。该检测使得能够分离引起感染的细菌，并通过抗菌谱评估对抗生素的敏感性或抗性。获得尿培养结果所需要的时间取决于所涉及的微生物种类，在24至48小时之间不等。在等待结果期间，往往执行仅根据临床观察结果的经验性治疗，这会导致抗生素疗法的不恰当使用，以及进行了完全没有必要的(阴性的)尿培养的患者。因此，非常重要的是需要鉴定出用于UTI早期诊断的新工具，所述新工具能够预测可能的并发症并改善结果，尤其是在某些“棘手”的情况下，例如在危重新生儿或患者中。
技术实现思路
本专利技术涉及用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法和试剂盒。本文所述专利技术是基于这一发现，即患者尿样品中的降钙素原浓度具有用于诊断泌尿道感染的预测性数值。此外，本专利技术人还观察到，在患有泌尿道感染的患者中，尿中的降钙素原浓度大于血浆的降钙素原浓度，而在未受泌尿道感染影响的患者中，尿中的降钙素原浓度低于血浆的降钙素原浓度。测定尿中的降钙素原浓度可用于诊断泌尿道感染的存在，所述诊断是通过将患者尿中的浓度值与标准值进行比较和/或根据血浆降钙素原浓度与尿中的降钙素原浓度之间的比例关系。因此，本专利技术的主题是用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法，所述方法包括这样的阶段，即其中测定患者的尿样品中的降钙素原浓度。本专利技术的主题还是上述方法，所述方法还包括这样的阶段，即其中还测定了所述患者的血浆降钙素原的浓度。本专利技术的主题也是用于泌尿道感染的体外诊断和/或监测和/或严重性评估的试剂盒，所述试剂盒包含用于测定尿样品和任选的血浆样品中的降钙素原浓度所必需的试剂的等分试样。本专利技术的主题也是降钙素原用于诊断和/或监测泌尿道感染的应用。本专利技术具有的优点是，能够使用非常简单的非侵入性方法以及比在被称为尿培养的技术中使用的那些方法更快的方法来诊断和/或监测患有泌尿道感染的患者。根据以下对某些实施方式的详细描述，本专利技术的优点、特点和使用方法是显而易见的，所述实施方式是作为实施例，而不是限制性的。附图说明图I.尿培养阳性的人群。该图显示了 10名患有泌尿道感染的患者的PCTur (尿的降钙素原)和PCTpl (血浆的降钙素原)的值。图2.尿培养阴性的人群。该图显示了 10名无泌尿道感染的患者的PCTur (尿的降钙素原)和PCTpl (血浆的降钙素原)的值。图I和2显示，在尿培养阳性的人群中，10例中有9例的PCTur值大于PCTpl值， 而在属于尿培养阴性人群的患者中，没有I例患者的PCTur值大于PCTpl值。专利技术详述本说明书提供了用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法。本专利技术的方法使得有可能诊断和/或监测泌尿道感染。本专利技术的方法使得有可能诊断泌尿道感染的存在或不存在、根据单次测定来评估(诊断)感染的严重性(即，降钙素原的浓度越高，感染就越严重， 第一次测定时的风险分级)、以及在治疗感染的过程中监测感染的进展。本说明书中的术语“泌尿道感染”是指大量微生物(细菌、真菌和/或病毒)入侵正常情况下为无菌的泌尿道，如此决定了泌尿道上皮的炎性反应。可引起泌尿道感染的微生物的实例是大肠埃希杆菌(E.Coli)、奇异变形杆菌(Proteus Mirabilis)、幾肠球菌(Ε· Faecalis)、Saprophyticus、葡萄球菌属 (Staphylococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、假单胞菌属 (Pseudomonas)、白色念珠菌(Candida albicans)等。流行病学数据表明，在三分之一的病例中，泌尿道感染与尿导管的使用相关。本专利技术可适用于带有永久性或临时性泌尿医疗装置(导管、肾造瘘、膀胱造瘘)的患者和没有这些装置的所有年龄的患者两种。本专利技术的方法包括这样的阶段，即其中测定患者的尿样品中的降钙素原浓度。降钙素原(PCT)是降钙素的前体，降钙素是由甲状腺的髓质神经内分泌C细胞产生的、负责钙稳态的激素。有利的是，本专利技术的方法还包括这样的阶段，即在此期间，还测定了所述患者的血浆样品中的降钙素原浓度。不仅测定了尿中的降钙素原，而且还测定了血浆中的降钙素原， 这可以在已对其尿和血浆进行分析的患者中更准确地诊断泌尿道感染的存在或不存在。事实上，由本专利技术人执行的临床研究已经表明，在患有泌尿道感染的所有患者中，尿中的降钙素原的值大于血浆中的降钙素原的值，而在阴性患者中，该值是较低的。该实施方式可用于，例如其尿降钙素原的值不足以给出关于泌尿道感染存在或不存在的明确指征的患者， 或者呈现出复杂的临床情况(例如，可能存在泌尿道感染和全身感染两种)的患者。一般来说，为了测定尿和/或血浆中的降钙素原的浓度，本领域专家公知的、能够用于测定生物流体中的降钙素原浓度的任何方法，均可以被认为适合于本说明书的目的。 例如，定量和半定量的商品化的免疫分析，例如LUMItest PCT化学发光、LIAISON BRAHMS PCT 、TRACE: KRYPTOR 、BRAHMS PCT、PCT -Q。可以修改分析条件，以避免由尿基质的组分造成的可能干扰。测定待检测的尿和/或血浆样品中的降钙素原的浓度是通过将样品与对降钙素原特异性的一级抗体在适当的温度下孵育适当长的时间，所述一级抗体以合适的浓度悬浮在适当的缓冲液中。本说明书中的术语抗体是指完整的抗体或抗体的片段；抗体片段包括但不限于片段？(&13’)2和？&13’或单链抗体。对于本说明书的目的而言，术语“对降钙素原特异性的一级抗体”是指能够与降钙素原的任何部分选择性结合的任何抗体。目前，特定蛋白质的选择性抗体的开发是使用实验室手册中教导的常规技术来执行的，并且许多公司还提供了开发所述抗体的服务。因此，没有必要在本说明书中提供关于抗体的产生的更多详情，所述抗体还可以订购自合适的公司。因此，为了产生对降钙素原特异性的一级抗体，任何标准技术将足以用于开发多克隆和单克隆两种抗体。此外，对降钙素原特异性的抗体还可以在市场上获得(例如商业抗体，可以使用的商业抗体是Abcam公司的代码为ab53897 (兔多克隆)、ab90489 (小鼠单克隆)、ab24454 (连接了 HRP的小鼠单克隆)、abl4817 (连接了 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗朗切斯科·琼塔，弗朗切斯科·福尔弗里，加达·瑟里，
申请(专利权)人：BRAHMS有限公司，
类型：
国别省市：