胰岛素与血清蛋白可逆性结合的亲和力指标测定方法及应用技术

本发明专利技术属生物技术领域，涉及胰岛素与血清蛋白结合指标的测定，具体涉及一种胰岛素与血清蛋白可逆性结合的亲和力指标测定方法及应用。本发明专利技术方法包括蛋白结合胰岛素、游离胰岛素、结合/游离胰岛素比值以及蛋白捕获胰岛素能力测定。经体外生化研究、培养细胞模型、病人血清指标检测、影响胰岛素与血清蛋白可逆性结合的亲和力的药物和血清成份、正常动物和糖尿病动物胰岛素与血清蛋白结合的亲和力改变对血糖的影响等试验验证，本发明专利技术方法获得的测定指标可进一步为糖尿病的预警、早期诊断、预后判断、药物筛选、指导预防和治疗提供实验数据和理论依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物
，涉及胰岛素与血清蛋白结合指标的测定，具体涉及一种胰岛素与血清蛋白可逆性结合的亲和力指标测定方法及应用。本专利技术方法可用于糖尿病的预警、早期诊断、预后判断、药物筛选、指导预防和治疗。
技术介绍
现有技术公开了糖尿病是一种以血糖代谢紊乱为特点的常见慢性疾病，其中90%以上为2型糖尿病(Type 2diabeteS，T2DM)。胰岛素抵抗在2型糖尿病发病中起重要作用，并贯穿于2型糖尿病全过程。胰岛素抵抗的发生机制尚不完全清楚，各种实验研究结果显示，胰岛素抵抗的发生多是与炎症反应、激素因子作用、内质网应激以及过量的营养产物在胰岛素敏感组织堆积等共同作用所致。妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是指在妊娠期首次发生或发现的不同程度的糖代谢异常。GDM发病机制至今尚不清楚，它由多种因素作用所致，有研究报道，胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌降低是GDM发病机制的重要环节。已知白蛋白是最主要的血浆蛋白之一，它可以作为一大类生物活性物质和药物的体内储存体和转运体。血清中的胰岛素大多与血清蛋白相结合。有研究表明首先，在血清中存在两种本文档来自技高网...

【技术保护点】
胰岛素与血清蛋白可逆性结合的亲和力指标测定方法，其特征在于，其包括步骤：1)检测胰岛素浓度采用胰岛素检测试剂盒测定血清和2％白蛋白中所含胰岛素水平；2)高压液相色谱分析分析白蛋白？胰岛素结合HPLC检测胰岛素和白蛋白混合物中胰岛素含量，HPLC检测吐温处理的胰岛素和白蛋白混合物中胰岛素含量；3)分离制备检测游离胰岛素和结合胰岛素通过超滤离心柱分离溶液中的游离胰岛素和蛋白结合胰岛素；4)测定白蛋白捕获胰岛素能力采用一个固相系统检测胆固醇对白蛋白？胰岛素结合的影响，包括白蛋白包被ELISA法检测不同血清层及白蛋白层的胰岛素含量；超滤法测定蛋白结合胰岛素、非蛋白结合的游离胰岛素及其比值的方法。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈思锋，陆超，栾丽娟，张雪晴，侯彦强，孟丹，李晓波，向萌，王丽，赵凤娣，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：