微波消解-ICP-MS法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法技术

本发明专利技术涉及海产品中硒形态分析的检测方法，尤其涉及一种使用微波消解-电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法。微波消解-ICP-MS法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法，该方法包括以下的步骤,一、样品的制备:将样品去壳，装入样品袋；（一）有机硒的分离纯化:采用持续透析法；（二）硒蛋白的分离纯化；（三)硒多糖的分离纯化。二、硒含量的测定：（一）微波消解；（二）空白试验，按照二中（一）方法处理没有与待测样品接触的试剂；（三）电感耦合等离子体质谱测定。本发明专利技术的优点在于：可以高效、简便、快速的测定海产品中有机硒、蛋白硒和多糖硒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海产品中硒形态分析的检测方法，尤其涉及一种使用微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法。
技术介绍
微量元素硒是生物体必需的营养元素，但过量的硒却又能引起中毒，因此，硒是具有有益和有毒双重性质的元素，摄入过多或摄入不足都会造成肌体损伤，引起各种疾病。由于硒的有益性和致毒性之间的浓度界限很窄，硒的日推荐摄入量被限制在50-20(^g/d。此外，硒的二重性与它存在的形态及其含量有关。硒的存在形态主要分为无机硒和有机硒，硒的功能性取决于其所存在的化学形态。在自然环境中硒主要以无机形态存在，常见的有亚硒酸钠和硒酸钠，较低水平就有很高的毒性，而且吸收率低，只有极少部分被机体吸收，大部分都随尿液排出，生物利用率低。在生物体内硒主要以有机形态存在，主要包括蛋白硒、多糖硒等生物大分子。相对于无机硒的毒性和致突变作用，有机硒毒性低、副作用小、消化率和生物学利用率高，其生物医学功能大于无机硒，如蛋白硒具有保护细胞免受脂质过氧化、清除自由基、调控激素等重要生理功能，多糖硒具有提高免疫、抗氧化、抗金属中毒、抗癌细胞和病毒的作用。可见不同本文档来自技高网...

【技术保护点】
微波消解？ICP？MS法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：样品的制备将样品去壳，所有可食部分用打浆机充分搅碎和混匀，装入样品袋，在？18℃贮存备用；（一）有机硒的分离纯化采用持续透析法，准确称取20.0g试料装入透析袋中，在超纯水中透析96h，每隔12h换一次水；透析完成后的试料经真空冷冻干燥，在？18℃贮存备用；（二）硒蛋白的分离纯化1）准确称取20.0g试料至烧杯中，加入120mL丙酮，放在磁力搅拌器上搅拌脱脂4h，8500r/min离心15min，弃上清液；2）挥干丙酮后，加入600mL？0.25mol/L？NaOH溶液，50℃水浴搅拌提取...

【技术特征摘要】
1.微波消解-ICP-MS法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤 样品的制备 将样品去壳，所有可食部分用打浆机充分搅碎和混匀，装入样品袋，在_18°C贮存备用； (一)有机硒的分离纯化 采用持续透析法，准确称取20. Og试料装入透析袋中，在超纯水中透析96h，每隔12h换一次水；透析完成后的试料经真空冷冻干燥，在_18°C贮存备用； (二)硒蛋白的分离纯化 O准确称取20. Og试料至烧杯中，加入120mL丙酮，放在磁力搅拌器上搅拌脱脂4h，8500r/min离心15min,弃上清液； 2)挥干丙酮后，加入600mLO. 25mol/L NaOH溶液，50°C水浴搅拌提取4h，过滤，得到上清液； 3)滤渣加入200mLO. 25mol/L NaOH溶液反复提取2次，合并滤液，加入硫酸铵至饱和度为95%，4°C静置12h ； 4)8000r/min离心25min，沉淀以50mL50mmol/L三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲液，PH8. 0，溶解； 5)4°C下依次用50mmol/L三羟甲基氨基甲烷-HCl缓冲液、超纯水透析至BaCl2溶液检测透析液中无S042_析出； 6)透析完成后的试料经真空冷冻干燥，在_18°C贮存，用于硒含量分析； (三)硒多糖的分离纯化 1)粗多糖提取准确称取20.Og试料至烧杯中，脱脂后，加入500mL去离子水，70°C水浴浸提5h，8500r/min离心15min，收集上清液；加入3倍体积95%乙醇，4°C静置过夜，离心收集沉淀；沉淀用去离子水复溶，冷冻干燥得到粗多糖； 2)脱蛋白采用胰蛋白酶+Sevag法脱蛋白，调节pH至6....

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁丹，张虹，徐庆兵，俞琰垒，郭利攀，
申请(专利权)人：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：