IL-17A拮抗剂制造技术

本发明专利技术公开了白介素-17A(IL-17A)抗体拮抗剂、编码IL-17A抗体拮抗剂或其片段的多核苷酸以及制造和使用它们的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL-17A拮抗剂
本专利技术涉及白介素-17A(IL-17A)抗体拮抗剂、编码IL-17A抗体拮抗剂或其片段的多核苷酸、以及制造和使用它们的方法。
技术介绍
白介素-17A(IL-17A、CTLA-8、IL-17)是由活化的Th17细胞、CD8+T细胞、γδT细胞和NK细胞响应细胞因子如IL-23和TGF-β而分泌的细胞因子，并且调节介质如抗微生物肽(防卫素)、促炎细胞因子和趋化因子从多个细胞类型中的产生，所述多个细胞类型例如参与中性粒细胞生物学、炎症、器官破坏和宿主防御的成纤维细胞和滑膜细胞(综述于Weaver等人，Annu.Rev.Immunol.25：821-52，2007；Aggarwal等人，J.Biol.Chem.278：1910-4，2003；Mangan等人，Nature441：231-4，2006中)。IL-17A与其它细胞因子如TNF-α和IL-1β协同以增强促炎环境。II-17A细胞因子家族由名为IL-17A、B、C、D、E和F的六种同源物组成，每种具有趋异和不同的生物学作用(Kawaguchi等人，J.AllergyClin.Immunol.114：1265-73，2004；Kolls和Linden，Immunity21：467-76，2004；Moseley等人，CytokineGrowthFactorRev.14：155-74，2003)。这些家族成员中，IL-17F与IL-17A同源性最高并且共享多种相似的功能特性，如在肺中诱导中性粒细胞和诱导促炎细胞因子；然而，在人中，IL-17F的效能是IL-17A的约1/10(Moseley等人，CytokineGrowthFactorRev.14：155-74，2003；Kolls等人，Immunity，21：467-76，2004；McAllister等人，J.Immunol.175：404-12，2005)。IL-17A和IL-17F也可以形成异源二聚体，其在体外具有中等生物活性(Wright等人，J.Biol.Chem.282：13447-55，2007)。IL-17A通过与白介素-17受体A(IL-17RA)和受体C(IL-17RC)相互作用而介导其作用(Moseley等人，CytokineGrowthFactorRev.14：155-74，2003；Toy等人，J.Immunol.177：36-9，2006)。IL-17F借助相同的受体进行信号传导，但是IL-17F对该受体的亲和力显著较低(Kuestner等人，J.Immunol.179：5462-73，2007)。人IL-17F和人IL-17F/IL-17RA复合物的晶体结构鉴定了IL-17F同型二聚体中的推定的受体结合腔(Hymowitz等人，EMBOJ.20：5332-41，2001；Ely等人，Nat.Immunology10：1245-51，2009)。在与中和性Fab复合的人IL-17A的晶体结构中鉴定到相似的腔，但是该腔是被部分占据的(Gerhardt等人，J.Mol.Biol.394：905-21，2009)。IL-17A的不适宜或过量产生与多种疾病和病症的病理学相关，所述疾病和病症包括类风湿性关节炎(Lubberts，Cytokine41：84-91，2008)、气道超敏感性(包括过敏性气道疾病如哮喘)(综述于Linden，Curr.Opin.Investig.Drugs.4：1304-12，2003；Ivanov，TrendsPharmacol.Sci.30：95-103，2009)、银屑病(Johansen等人，Br.J.Dermatol.160：319-24，2009)、皮肤超敏感性(包括特应性皮炎)(Toda等人，J.AllergyClin.Immunol.111：875-81，2003)、全身性硬化症(Fujimoto等人，J.Dermatolog.Sci.50：240-42，2008)、炎性肠疾病(包括溃疡性结肠炎和克隆氏病)(Holtta等人，Inflamm.BowelDis.14：1175-84，2008；Zhang等人，Inflamm.BowelDis.12：382-88，2006)和肺部疾病(包括慢性阻塞性肺病)(Curtis等人，Proc.Am.Thorac.Soc.4：512-21，2007)。已经提出针对IL-17A的抗体以用于治疗IL-17A介导的疾病和病症(PCT公开号：WO08/021156、WO07/070750、WO07/149032、WO06/054059、WO06/013107、WO08/001063、WO10/034443；美国专利申请号US2008/095775、US2009/0175881)。由于抗体治疗药的药动学、功效和安全谱将依赖于具体组成，故对于人IL-17A的改进的抗体存在需要，所述人IL-17A的改进的抗体适用于治疗IL-17A介导的疾病和病症。附图说明图1.A-H.IL-17A抗体拮抗剂家族2、6a、6b、19a和19b的CDR序列。图2.作为用于嫁接互补位残基的支架的示例性A)IGLV3和IGLJ和B)IGHV3和IGHJ。上文示出mAb6785序列。将CDR区域加下划线示出，并且在mAb6785轻链中的核心接触位点(Y31、D49、Y90、F92、F93)和重链中的核心接触位点(S52、T54、F57、Y59、Q99、L100和T101)由星号“*”表示。将B)中的构架4区加双下划线示出。除非特别指出，否则所示的序列是*01等位基因。图3.用于选择抗体A)轻链和B)重链的Kabat和Chotia编号。KabatCDR和ChothiaHV的位置以灰色突出示出。图4.在ELISA模式下，标记的A和B)mAb1926；C)mAb317；D)mAb3171；E)和F)mAb7357与IL-17A的竞争性结合分析。图5.与不同抗-IL-17AmAb复合的IL-17A的H/D交换图。保护性区段上方的编号对应于成熟IL-17A(SEQIDNO:105)序列编号。图6.A)IL-17A/Fab6468复合物的总体分子结构。IL-17A的二聚体以深灰色和浅灰色示出。两个Fab分子分别以深灰色和浅灰色示出；B)IL-17A(浅灰色)和IL-17F(深灰色)的单体的比较；C)IL-17A的二聚体(浅灰色和深灰色)；D)IL-17F的二聚体(浅灰色和深灰色)。图7.在IL-17A上针对Fab6468的两个结合位点和核心表位。原聚体1和2分别是深灰色和浅灰色。核心表位是由黑色椭圆形示出。虚线代表无序残基。图8.IL-17A和IL-17F推定的受体结合口袋的比较。A)IL-17A的P1和P2口袋的前视图和后视图。mAb6468轻链CDR3的FF基序在P2口袋中示出。B)N端FF基序在P2口袋中的IL-17F。C)IL-17A和IL-17F的序列比对结果以及P1口袋和P2口袋的保守性。图9.BLISA模式下mAb1926与不同物种的IL-17A蛋白的结合特异性。
技术实现思路
本专利技术的一个方面是一种分离的抗体或其片段，其中所述抗体与具有SEQIDNO：105中所示序列的人IL-17A在氨基酸残基56-68(SEQ本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.10.30 US 61/256,862;2010.03.05 US 61/310,9191.一种与人IL-17A特异性结合的分离的抗体或片段，其包含VH和VL，其中所述抗体包含：分别如SEQIDNO:25、43和60中所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列；和分别如SEQIDNO:3、6和18中所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或片段，其中所述抗体或片段包含SEQIDNO：86的VH和SEQIDNO：79的VL。3.根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗体或片段，其中所述抗体是完全人的。4.根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗体或片段，其中所述抗体与聚乙二醇缀合。5.根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗体或片段，其具有IgG1或IgG4同种型。6.根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗体或片段，其中所述分离的抗体或片段包含在Fc域中的S229P、P235A或L236A突变。7.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-2中任一项所述的分离的抗体或片段和药学上可接受的载体。8.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求2的抗体或片段，其中所述抗体或片段包含SEQIDNO：86的VH和SEQIDNO：79的VL。9...

【专利技术属性】
技术研发人员：M纳索，R斯维特，J罗，S吴，M埃罗索，DD杜卡塔，R劳亨伯格，M鲁茨，JC阿尔马格罗，S陶德特，B吴，G奥布莫洛娃，T玛丽亚，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：
国别省市：