高纯度可溶性血栓调节蛋白及其制造方法技术

本发明专利技术涉及高纯度可溶性血栓调节蛋白，其为由转化细胞所产生的可溶性血栓调节蛋白，该转化细胞是将包含编码可溶性血栓调节蛋白的碱基序列的DNA转染至宿主细胞而得到的，其中，宿主细胞来源的蛋白质含量比率为相对于10,000U可溶性血栓调节蛋白小于10ng。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】高纯度可溶性血栓调节蛋白及其制造方法
本专利技术涉及高纯度可溶性血栓调节蛋白及其制造方法。
技术介绍
血栓调节蛋白作为具有通过与凝血酶特异性结合来阻断凝血酶的血液凝固活性并同时显著促进凝血酶的蛋白质C活化能力的作用的物质而为人所知，并已知其具有强力的血液凝固阻断作用。已知其延长基于凝血酶作用的凝固时间、抑制基于凝血酶的血小板聚集。蛋白质C为在血液凝固纤溶系统中起到重要作用的维生素K依赖性蛋白质，在凝血酶的作用下被活化，成为活化蛋白C。已知该活化蛋白C在生物体内使血液凝固系统因子的活性型第V因子以及活性型第VIII因子失活，并且还与具有血栓溶解作用的纤溶酶原激活剂的产生相关(非专利文献1)。因此认为，血栓调节蛋白利用该凝血酶来促进蛋白质C的活化，作为抗血液凝固剂或血栓溶解剂是有用的，另外还有动物实验报告指出血栓调节蛋白在伴随凝固亢进的疾病的治疗、预防中是有效(非专利文献2)。以往，血栓调节蛋白是作为在以人为首的各种动物种的血管内皮细胞上表达的糖蛋白质而被发现获得的，其后成功进行克隆化。即，利用基因工程方法，从人肺cDNA文库中对含有信号肽的人血栓调节蛋白前体的基因进行克隆，并且对血栓调本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.04.30 JP 2010-1054211.一种高纯度可溶性血栓调节蛋白，其为由转化细胞所产生的可溶性血栓调节蛋白，该转化细胞是将编码可溶性血栓调节蛋白的碱基序列的DNA转染至宿主细胞而得到的，其中，宿主细胞来源的蛋白质含量比率为相对于10,000U可溶性血栓调节蛋白小于10ng且为0.001ng以上，该宿主细胞为中国仓鼠卵巢细胞。2.如权利要求1所述的高纯度可溶性血栓调节蛋白，其中，可溶性血栓调节蛋白为通过对该转化细胞进行无血清培养而产生的可溶性血栓调节蛋白。3.如权利要求1或2所述的高纯度可溶性血栓调节蛋白，其中，该可溶性血栓调节蛋白为具有下述(1)～(5)的性质的可溶性血栓调节蛋白：(1)与凝血酶选择性结合的作用；(2)促进基于凝血酶的蛋白质C的活化的作用；(3)延长基于凝血酶的凝固时间的作用；(4)抑制基于凝血酶的血小板聚集的作用；以及(5)抗炎作用。4.如权利要求1或2所述的高纯度可溶性血栓调节蛋白，其中，该可溶性血栓调节蛋白的分子量为50,000至80,000的范围。5.如权利要求1或2所述的高纯度可溶性血栓调节蛋白，其中，该高纯度可溶性血栓调节蛋白是通过包括以下工序的方法制造的：(a)将编码可溶性血栓调节蛋白的碱基序列的DNA转染至宿主细胞，获得转化细胞的工序；(b)培养该转化细胞，获得含有可溶性血栓调节蛋白的溶液的工序；以及(c)使该含有可溶性血栓调节蛋白的溶液与尼龙和/或聚醚砜接触，得到高纯度可溶性血栓调节蛋白的工序，该高纯度可溶性血栓调节蛋白中，宿主细胞来源的蛋白质含量比率为相对于10,000U可溶性血栓调节蛋白小于10ng。6.如权利要求1或2所述的高纯度可溶性血栓调节蛋白，其中，该可溶性血栓调节蛋白为下述可溶性血栓调节蛋白：其为序列编号9或序列编号11的任一项所记载的氨基酸序列中的第19～516位氨基酸序列的肽。7.如权利要求1或2所述的高纯度可溶性血栓调节蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：上野雄二，重松弘树，
申请(专利权)人：旭化成制药株式会社，
类型：
国别省市：