可在乳酸乳球菌表面展示表达异源基因的载体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种可在乳酸乳球菌表面展示表达异源基因的载体及其制备方法与应用。该载体具有序列表中SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列，含启动子Pnis、lysM基因、分泌信号肽序列ssusp45、多克隆酶切位点、复制子repA和repC元件。该载体的构建方法：应用PCR技术扩增乳酸乳球菌NZ3900菌株自溶素（AcmA）锚定区基因lysM，将lysM与载体pNZ8110经酶切后进行连接，连接产物用于转化E.coli?MC1061菌株，阳性转化菌经酶切和测序鉴定后，提取重组质粒，得到本发明专利技术提供的表达载体。该载体功能：将外源基因与该载体连接，转入乳酸乳球菌NZ3900中，经乳酸链球菌素(nisin)诱导可实现外源基因的表达和表达蛋白与宿主细胞壁的结合。该载体可用于包括疫苗抗原在内的外源蛋白的表达，具有广泛的应用范围。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种可在乳酸乳球菌中表达外源蛋白、且使表达蛋白展示于菌体表面的表达载体，同时还涉及该载体的制备方法与应用。
技术介绍
目前，对于一些消化道病原体感染，例如幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)感染，由于采用抗菌素治疗可使细菌耐药性增加、且对重复感染无预防作用，故对这类疾病更有效的防治只能寄希望于疫苗的研究成功。在疫苗研究中，口服疫苗以其免疫途径安全、合理、方便等优点而受到关注。但是，目前口服疫苗研究发展因缺乏理 想的疫苗载体而受到制约 现有研究多米用减毒伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)作为口服疫苗载体，结果显示，虽然此类候选疫苗株在动物体内可产生较好的免疫效果，但由于存在安全性问题，而不适用于婴幼儿、老年人及免疫缺陷者。探讨更安全有效的口服疫苗载体是该领域研究的发展趋势，对口服疫苗的研制起关键性作用。乳酸乳球菌(Lactococcus lactis, L. lactis)是乳酸菌类的一个菌种，在食品加工中的应用已有悠久的历史，属于食品级益生菌，安全性十分可靠，而且其生长迅速，易于培养，遗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可在乳酸乳球菌表面展示表达异源基因的载体，其特征在于：包含有SEQ？ID？NO.1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：段广才，张荣光，程文滨，范清堂，张卫东，郗园林，陈帅印，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：