本发明专利技术涉及在受试者体内基于ApoA、白介素15和IL15受体α链的Sushi结构域的组合使用，能够促进先天性免疫应答和获得性免疫应答的组合物，本发明专利技术还涉及将所述组合物用于刺激患者的免疫应答的用途，本发明专利技术还涉及用于治疗传染性和肿瘤性疾病的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及免疫学领域，更具体地说，涉及能够促进受试者的先天性免疫应答和获得性免疫应答的组合物的领域。所述组合物可用于治疗需要较大免疫系统活性的疾病，如肿瘤和传染性疾病。
技术介绍
白介素15 (IL15或IL15)是NK、NKT细胞和⑶8记忆T淋巴细胞活性的关键细胞因子，它通过由被称作a、0和Y的三个亚基组成的受体发挥作用。亚基P和Y为IL-2受体所共有。IL15受体的a链为IL15所独有，并且是细胞因子释放到胞外基质中、将 IL15 “呈递”给亚基 IL15R @ 和IL15RY所必须的。 由于免疫系统的刺激特性，该白介素依赖于NK细胞(Suzuki，2001，J. Leuokoc.Biol. ,69 :531-537)和 T 细胞(Hazama, 1999, Br. J. Cancer.，80 :1420-1426, Meazza, 2000,Int. J. Cancer, 87 :574-581 和 Klebanoff，2004，Proc. Natl. Acad. Sci. USA,2004，101 1969-1974)的存在而具备抗肿瘤特性。IL15还参与了抗病毒感染的保护，以及在免疫接种和树突细胞发育中参与基于T细胞应答的扩增和维持。因此，IL15可能是有用的治疗剂，可用于治疗与免疫系统相关的疾病。然而，对IL15功能的体内研究受到了阻碍，这部分归因于重组IL15缺乏可用性，以及在通过天然基因表达IL15时观察到的低分泌水平。另外，考虑到这些细胞因子在体内以局部且短暂的方式产生，大部分细胞因子具有极低的血浆半衰期。因此，IL15在体内的使用需要使用较大的剂量，并且要频繁施用，导致了各种副作用，这可能导致癌症患者不能忍受这种治疗。为了克服以上缺陷，已将IL15与其他治疗剂，如抗-⑶40、IL-7或IL-6抗体组合用于抗-肿瘤治疗。这些组合表现出协同效应，使其能够以较低剂量的IL15获得类似的效果。提高IL 15活性另一种可能性包括在施用IL 15的同时共同施用包括免疫球蛋白的恒定区和IL 15受体a链的可溶性区域的融合蛋白，这样可以将IL 15活性提高50倍(Rubinstein M. P.等，2006，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，103 :9166 - 71 和 StoklasekT. A.等，2006，J. Immunol. ; 177 :6072 - 80)。最近，业已证实了由I L15受体a链的氨基末端的1_77位氨基酸形成的多肽(所谓的 “Sushi 结构域”)是 IL15 的刺激剂。因此，施用包含所述结构域的融合蛋白和IL15表现出的抗癌作用大于施用IL15的抗癌作用，使得B16F10瘤的肺转移减少65%，并且使得植入裸鼠盲肠的HCT-116人类肿瘤的转移瘤数量减少。另一种改善IL15的效果而又不引起不希望的副作用的替代方案包括对该分子进行修饰，以延长其半衰期。因此，US2006257361描述了包括免疫球蛋白的恒定区和IL15的融合蛋白，施用之后该融合蛋白在血清中的半衰期高于未修饰过的IL15的半衰期。尽管如此，现有技术中仍然需要IL15的替代剂型，其中，所述蛋白保持其促进免疫应答的活性，而尽可能降低IL15相关的副作用。专利技术概述第一方面，本专利技术涉及一种组合物，同时或分别包括，(i)选自以下组的第一组分(a)包括Apo A多肽或其与所述Apo A多肽具有至少70%同一性的功能等效变体的多肽，和 (b)编码Apo A多肽或其与所述Apo A多肽具有至少70%同一性的功能等效变体的多核苷酸，和(ii)选自以下组的第二组分(a) IL15或其与IL15具有至少70%同一性的功能等效变体，和(b)编码IL15或其与IL15具有至少70%同一性的功能等效变体的多核苷酸，和(iii)选自以下组的第三组分(a) IL15受体a链的Sushi结构域或其与所述IL15受体a链的Sushi结构域具有至少70%同一性的功能等效变体，和(b) IL15受体a链的Sushi结构域或其与所述IL15受体a链的Sushi结构域具有至少70%同一性的功能等效变体，和(c)编码所述IL15受体a链的Sushi结构域或其与所述IL15受体a链的Sushi结构域具有至少70%同一性的功能等效变体的多核苷酸。第二方面，本专利技术涉及一种融合蛋白，包括(i)由Apo A多肽或其与所述Apo A多肽具有至少70%同一'丨生的功能等效变体形成的区域A，(ii)由IL15或其与IL15具有至少70%同一性的功能等效变体形成的区域B，和(iii)由Apo A多肽或其与所述Apo A多肽具有至少70%同一'丨生的功能等效变体形成的区域A，(iv)由IL15或其与IL15具有至少70%同一性的功能等效变体形成的区域B，和(V)由IL15受体a链的Sushi结构域或其与所述IL15受体a链的Sushi结构域具有至少70%同一性的功能等效变体形成的区域C。其他方面，本专利技术涉及编码本专利技术的融合蛋白的多核苷酸、包括本专利技术的多核苷酸的载体或基因构建体、包括本专利技术的融合蛋白的宿主细胞、本专利技术的多核苷酸、本专利技术的载体或本专利技术的基因构建体。另一方面，本专利技术涉及一种药物组合物，包括本专利技术的组合物、本专利技术的融合蛋白、本专利技术的多核苷酸、本专利技术的载体或基因构建体、本专利技术的宿主细胞和药学上可接受的赋形剂。另一方面，本专利技术涉及一种促进抗原特异性T-淋巴细胞扩增的体外方法，包括使预先在体内暴露于所述抗原的淋巴细胞群体接触本专利技术的组合物、本专利技术的融合蛋白、本专利技术的多核苷酸、本专利技术的载体或基因构建体、本专利技术的宿主细胞。另外，本专利技术涉及将本专利技术的组合物、本专利技术的融合蛋白、本专利技术的多核苷酸、本专利技术的载体或基因构建体、本专利技术的宿主细胞用于药品或用于治疗需要刺激受试者的免疫应答的疾病的用途。附图说明图I. hIL15 (ng/mL)随时间(h :小时)变化的表达动力学。C57B16小鼠组接受质粒、pApo-hIL15+pSushi、pApo_hIL15、phIL15+pSushi、phIL15、pApo 或生理盐水(S)的流体力学注射。在第8、24、96、168和240小时，抽血，并且通过ELISA测定分析hIL15的血清浓度。示出了每组用2-3只动物进行的代表性实验的平均值和平均标准偏差。通过重复测量方差分析对结果进行统计学比较，随后进行Bonfeironi检验。在第8和24小时，观察到用pApo-hIL15处理的组与其他组的hIL15水平具有显著性差异(p〈0. 001)。图2.通过流体力学注射共同施用pSushi与pApo-hIL15的功能增殖试验。CTLL2 细胞在用pApo-hIL15和pApo-hIL15+pSushi处理小鼠24小时之后获得的血清的系列稀释液中培养。在第48h，用增殖指数(c. p. m.)分析氚化胸腺嘧啶整合到CTLL2细胞的情况，观察到用pApo-hIL15和pSushi同时处理过的小鼠血清诱导的增殖高于仅用pApo_hIL15处理的小鼠血清诱导的增殖(P〈0. 001)。示出了每组4-5只动物的代表性实验的平均值和平均标准偏差。通过重复测量方差分析对结果进行统计学比较。图3.随着时间推移(t Cd本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：佩德罗·贝拉翁多洛佩斯，杰西卡·菲奥拉万蒂，何塞·麦地那埃切韦尔斯，伊格纳西奥哈维尔·梅莱罗贝尔梅霍，马里亚德尔卡门·奥乔亚涅托，弗朗西斯科德阿西斯·帕拉松加里卡，西尔维亚·布尔福内波斯，欧文·汉斯·道尔特曼，
申请(专利权)人：西马生物医学计划公司，博斯特尔研究中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。