用于治疗肿瘤的免疫治疗药盒制造技术

本发明专利技术涉及免疫学领域，更具体涉及癌症免疫治疗，特别是用免疫治疗组合和治疗方法阻止肿瘤细胞生长和／或消除所述细胞。本发明专利技术中所公开的方法是基于阻断在酪氨酸残基中具有蛋白激酶活性的受体（ＲＴＫ）及所述受体的配体。本发明专利技术描述了免疫治疗组合，通过联合针对所述受体的主动和／或被动免疫治疗，阻断ＲＴＫ受体和／或其配体。所公开方法可以用于不同临床阶段的患有过量表达所述受体的上皮来源肿瘤的患者。主动和被动免疫治疗组合可以同时或序贯使用，取决于该治疗方法是用于处于晚期疾病状态的患者还是作为辅助治疗。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫学，特别是癌症免疫治疗；并特别提供了诱导低生长速度和/或去除肿瘤细胞的免疫治疗组合及治疗方法。现有技术EGF受体(EGF-R)及其配体系统构成了一个分子复合体，它们的相互作用通过一种特定方式调节细胞生长，并且其在上皮细胞来源的肿瘤的失控生长中的影响已经被证实。因为高合成率和/或受体突变，生长因子过度产生，造成肿瘤发生过程中EGF-R活化的旁分泌和自分泌控制失调。EGF-R是一种有1186个氨基酸、分子量170kD的跨膜糖蛋白，它在正常组织中广泛表达。它在胚胎发生发育的多个阶段都有参与。EGF-R的特异性配体EGF或TGFα的结合诱导了受体二聚作用，以及与ErbB家族的其它成员如HER-2的异二聚作用(Cohen BD等(1996)J Biol Chem 2717620-7629)。配体与受体的结合释放一连串的胞内信号(Ullrich TO和Schlessinger J(1990)Cell 61203-212)驱使细胞生长和分化。受体的过量表达发生于某些类型的癌症中，主要是上皮来源的，这已经成为癌症免疫治疗的目标。对于乳腺、膀胱、卵巢、子宫、结肠、肺、脑、前列腺以及头颈部肿瘤就是这种情况。已证实EGF-R表达在乳腺癌中预示着不良预后(Pérez R等(1984)乳腺癌及治疗(Breast Cancer and Treatment)4189-193)。尽管EGF-R及其配体在肿瘤生长中的作用还不清楚，有人提出肿瘤细胞中的EGF-R表达诱导了一种自分泌刺激机制，导致那些细胞的失控增殖(Schlessinger J等(1983)Crit Rev Biochem 14(2)93-111)。这个系统的主要配体是表皮生长因子(EGF)和转化生长因子α型(TGFα)。还有其它配体属于EGF超家族，比如双调蛋白(AR)、crypto-1(CR-1)、肝素生长因子、β动物纤维素、表皮调节素，及其它。EGF是一种53个氨基酸的多肽，分子量6045Da，其对上皮来源的细胞可促有丝分裂。它的作用主要是通过它与EGF-R的结合而进行旁分泌。TGFα是一种50个氨基酸的多肽，能够与EGF竞争结合EGF-R。抗EGF抗体不能识别TGFα(Todaro G J等(1976)，Nature 26426-31)，说明这两种生长因子是两种免疫学不同的实体。在有该受体高度表达的肿瘤中，EGFR-配体系统已经成为应用天然形式的抗EGF-R单克隆抗体(Mab)，联合药物、毒素或放射性同位素进行被动免疫治疗(PI)的目标(Vollmar AM等(1987)J CellPhysiol 131418-425)。通过它们抑制EGF与其受体结合的能力选择这些抗体(中和抗体)。几项对Mab的临床试验正在进行，并且一些已经显示了有希望的结果，比如Mab C225在乳腺、胰腺和肾癌中的II期临床试验，以及在头颈部癌症中的III期临床试验(Mendelsohn，J等(1999)American Society of Clinical Oncology Meeting)。其它显示了良好结果的II期临床试验已经实施，在肺肿瘤中使用MabIOR-R3(Crombet T等(2000)癌症生物治疗和生物药剂(CancerBiotherapy and Biopharmaceutical)，手稿已被接受待出版)。使用特异性抗EGF-R的IOR-R3 Mab(EP586002B1)的被动免疫治疗，证实了IOR-R3与该受体的特异性结合抑制EGF/EGF-R的结合，继而抑制EGFR的自身磷酸化。而后，使用IOR-R3的被动免疫治疗抑制了裸鼠中人类肿瘤细胞的生长，并且在一些临床试验患者中减缓了肿瘤的生长速度。该系统也成为癌症特异性主动免疫治疗的目标。一个例子是使用一种由EGF-R的主要配体之一EGF偶联至载体蛋白而组成的疫苗(US 5,894,018)。该疫苗能够诱导抗自身EGF的特异性抗体反应，抑制EGF/EGF-R结合，从而阻断由该结合诱导的增殖机制。临床前期研究显示使用偶联至载体蛋白的自身EGF免疫并施用有用的佐剂，使移植了Ehrlich腹水瘤(EAT)细胞的小鼠生存增加(González G等(1996)，Vaccine Research 5(4)233-243；González G等(1997)，Vaccine Research 6(2)91-100)。对含有人类重组EGF的疫苗的I期临床试验结果已有报告，证实了疫苗接种的免疫原性和安全性(González G等(1998)，Annalsof Oncology 91-5)。
技术实现思路
本专利技术意在使用联合免疫治疗，针对具有酪氨酸激酶活性的受体(RTK)以及它们的配体，目的是增强以独立方式应用现有技术中所述的仅针对该受体/配体系统中一种成分的不同免疫治疗形式时所观察到的效果。在包括两种活性成分的治疗方法中证明了该增强作用，其联合阻断配体和受体两者。特别地，本专利技术涉及一种用于治疗肿瘤的免疫治疗组合，它作用于那些生长依赖受体RTK系统的肿瘤细胞，所述组合包括同时或者序贯施用A+B；或A+C；或A+D；或B+C；或B+D；或C+D，其中A、B、C和D是A.-一种抗受体RTK的抗体；B.-一种抗受体RTK的配体的抗体；C.-一种包含受体RTK的疫苗，其诱导抗所述受体RTK的抗体；D.-一种包含受体RTK的配体的疫苗，其诱导抗所述配体的抗体；在本专利技术的优选实施方案中，抗受体RTK的单克隆抗体是一种抗表皮生长因子的受体R-EGF的抗体，更为具体地说，它是抗EGF-R的人源化抗体hR3，保藏于英国ECACC，保藏号951110101。在本专利技术的另一个实施方案中，抗受体RTK的配体的抗体可以是抗EGF或抗TGFα的抗体。本专利技术还涉及一种免疫治疗组合，使用包含EGF-R、EGF、TGFα、或这些分子与脑膜炎奈瑟氏球菌的P64K蛋白的结合物的疫苗。因此，在本专利技术的另一方面，它涉及一种用于控制其生长依赖于受体RTK系统的细胞的生长和/或增殖的方法，包括用本专利技术的治疗组合进行治疗，可以同时或序贯应用，并且可以以任何次序给予所述组合的成分。本专利技术基于对RTK受体及其配体的阻断，涉及抑制肿瘤细胞生长以消除这些细胞的免疫治疗组合及治疗方法。同时或序贯使用针对生长因子(即EGF、TGFα)及其受体(即EGF-R)的主动免疫治疗(治疗性疫苗)和被动免疫治疗(Mab)的组合，实现该阻断。生长因子或其受体的阻断使细胞增殖被抑制。在本专利技术中我们显示了对配体和/或受体的同时阻断增强对细胞增殖的抑制作用。这一治疗概念对于治疗在根本上是由细胞增殖速度增加而引起的恶性肿瘤非常重要。本专利技术描述了通过主动和被动免疫治疗组合而阻断RTK受体和/或其受体的免疫治疗组合。所述方法可以用于处于不同临床阶段的患有过量表达EGF-R的上皮来源肿瘤的患者。主动和被动免疫治疗的组合可以是同时或序贯的，独立于用于晚期疾病患者的治疗方法，或作为辅助治疗。对于晚期疾病，所建议的治疗组合是应用识别RTK受体的Mab和/或识别该受体配体的Mab的被动免疫治疗，与特别选择的肿瘤特异性治疗相结合，作为一线治疗，继之以使用针对受体配体和/或受体的疫苗的主动免疫治疗，以保持疗效。在辅助本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗肿瘤的免疫治疗组合，它作用于其生长依赖于受体ＲＴＫ系统的细胞，所述组合包括同时或者序贯给予Ａ＋Ｂ；或Ａ＋Ｃ；或Ａ＋Ｄ；或Ｂ＋Ｃ；或Ｂ＋Ｄ；或Ｃ＋Ｄ，其中Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ是：Ａ．－一种抗受体ＲＴＫ的抗体；Ｂ．－一种抗受体 ＲＴＫ的配体的抗体；　Ｃ．－一种包含受体ＲＴＫ的疫苗，其诱导抗所述受体ＲＴＫ的抗体；Ｄ．－一种包含受体ＲＴＫ的配体的疫苗，其诱导抗所述配体的抗体；ａ．－一种抗ＲＴＫ受体的抗体。ｂ．－一种疫苗，其中的活性成分是ＲＴＫ受 体，并且其诱导抗该受体的抗体。

【技术特征摘要】
CU 2000-12-8 287/001.用于治疗肿瘤的免疫治疗组合，它作用于其生长依赖于受体RTK系统的细胞，所述组合包括同时或者序贯给予A+B；或A+C；或A+D；或B+C；或B+D；或C+D，其中A、B、C和D是A.-一种抗受体RTK的抗体；B.-一种抗受体RTK的配体的抗体；C.-一种包含受体RTK的疫苗，其诱导抗所述受体RTK的抗体；D.-一种包含受体RTK的配体的疫苗，其诱导抗所述配体的抗体；a.-一种抗RTK受体的抗体。b.-一种疫苗，其中的活性成分是RTK受体，并且其诱导抗该受体的抗体。2.根据权利要求1的免疫治疗组合，其中抗受体RTK的抗体是抗EGF受体的抗体。3.根据权利要求2的免疫治疗组合，其中抗EGF受体的抗体是人源化抗体。4.根据权利要求3的免疫治疗组合，其中抗EGF受体的人源化抗体是IOR-R3，保藏于英国ECACC，保藏号951110101。5.根据权利要求1的免疫治疗组合，其中抗受体RTK的配体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：R佩雷斯罗德里格斯，GM冈萨雷斯马里内罗，T克罗姆贝特拉莫斯，I博索利尔迪尔加多，
申请(专利权)人：分子免疫中心，
类型：发明
国别省市：CU[古巴]