本发明专利技术公开了一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：I型胶原酶25-35份、I型蛋白激酶45-55份、分散酶1-4份、透明质酸酶15-25份、泊洛沙姆10-30份、缓冲液202.56-320.35份、浓度为15-85mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-20份。本发明专利技术细胞膜损伤小、细胞悬液分散度好，且操作方便、效果稳定。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞分离领域，具体涉及一种实体肿瘤组织消化液。
技术介绍
在对实体肿瘤组织的细胞生物学特性进行分析研究(如细胞放射敏感性检测等)时，需先将样品组织块制备成分散的单细胞悬液。只有当样品组织中的各种细胞成分处在单细胞状态下，才能有效地对其进行各种细胞效应的检测分析，而细胞悬液质量的好坏与消化液配方和消化方法密切相关。现有技术中的各消化液对肿瘤组织的消化效果尚有待改进。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种实体肿瘤组织消化液，能有效、快速地将实体肿瘤样品分散为单细胞。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为:—种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成:I型胶原酶25-35份、I型蛋白激酶45_55份、分散酶1-4份、透明质酸酶15_25份、泊洛沙姆10-30份、缓冲液202.56-320.35份、浓度为15-85mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-20份。优选地，所述缓冲液包含5-15mmo I/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.4_0.6mmol/L二氨基乙烷四乙酸，5-15mmol/L氯化钠、0.015yg.yl^-0.0SSyg.μΓ1甲基磺酸乙酯。优选地，由以下重量份的组分制备而成: I型胶原酶25-30份、I型蛋白激酶45-50份、分散酶I _3份、透明质酸酶15_20份、泊洛沙姆10-25份、缓冲液202.56-300份、浓度为15-80mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-15份。优选地，由以下重量份的组分制备而成: I型胶原酶30份、I型蛋白激酶50份、分散酶2.5份、透明质酸酶20份、泊洛沙姆20份、缓冲液261.455份、浓度为50mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液15份。本专利技术具有以下有益效果:细胞膜损伤小、细胞悬液分散度好，且操作方便、效果稳定。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。以下实施例中的表面羧基化的超顺磁性纳米粒子制备方法如下:将8-10份的FeC13.6H20溶于140-150份mL去离子水，搅拌加热至70_80°C ;将5-6份的FeCl2.4H20溶于1mL去离子水，过滤;将两种溶液混合后剧烈搅拌，快速加入18ml浓氨水，之后逐滴加入4.66g油酸，继续在70°C的温度下快速搅拌I小时；制得的溶液用酒精沉淀、洗涤2-3次，再用去离子水洗涤至中性，然后加入160-180ml的浓度为10-15mg/mL KMn04溶液，超声波清洗仪超声振荡8h，最后将制得的溶液用去离子水洗涤2-3次，冷冻干燥后得表面羧基化的超顺磁性纳米粒子。实施例1—种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成:I型胶原酶25份、I型蛋白激酶45份、分散酶I份、透明质酸酶15份、泊洛沙姆10份、缓冲液202.56份、浓度为151^/1^的超顺磁性纳米粒子溶液10份。所述缓冲液包含5臟01/1三轻甲基氨基甲烧-盐酸，0.4mmol/L二氨基乙烧四乙酸，5mmol/L氯化钠、0.015yg.μΓ1甲基磺酸乙酯。实施例2 一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成:I型胶原酶35份、I型蛋白激酶55份、分散酶4份、透明质酸酶25份、泊洛沙姆30份、缓冲液320.35份、浓度为851^/1^的超顺磁性纳米粒子溶液20份。所述缓冲液包含1511111101/1三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.6mmol/L二氨基乙烷四乙酸，15mmol/L氯化钠、0.055yg.μΓ1甲基磺酸乙酯。实施例3—种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成:I型胶原酶30份、I型蛋白激酶50份、分散酶2.5份、透明质酸酶20份、泊洛沙姆20份、缓冲液261.455份、浓度为50mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液15份。所述缓冲液包含10mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.5mmol/L二氨基乙烷四乙酸，1mmoI/L氯化钠、0.035μgll-1甲基磺酸乙酯以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。【主权项】1.一种实体肿瘤组织消化液，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成: I型胶原酶25-35份、I型蛋白激酶45-55份、分散酶1-4份、透明质酸酶15_25份、泊洛沙姆10-30份、缓冲液202.56-320.35份、浓度为15-85mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-20份。2.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤组织消化液，其特征在于，所述缓冲液包含5-15mmo I /L三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.4-0.6mmo I /L 二氨基乙烷四乙酸，5-15mmo I /L氯化钠、0.015yg.Ur1-O-OSSyg.μΓ1 甲基磺酸乙酯。3.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤组织消化液，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成: I型胶原酶25-30份、I型蛋白激酶45-50份、分散酶1-3份、透明质酸酶15_20份、泊洛沙姆10-25份、缓冲液202.56-300份、浓度为15-80mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-15份。4.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤组织消化液，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成: I型胶原酶30份、I型蛋白激酶50份、分散酶2.5份、透明质酸酶20份、泊洛沙姆20份、缓冲液261.455份、浓度为50mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液15份。【专利摘要】本专利技术公开了一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：I型胶原酶25-35份、I型蛋白激酶45-55份、分散酶1-4份、透明质酸酶15-25份、泊洛沙姆10-30份、缓冲液202.56-320.35份、浓度为15-85mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10-20份。本专利技术细胞膜损伤小、细胞悬液分散度好，且操作方便、效果稳定。【IPC分类】C12N5/09【公开号】CN105543173【申请号】CN201610077129【专利技术人】杨留中, 寇卫政, 李秋萍, 杨庆辉, 蔡卫梅 【申请人】新乡医学院第一附属医院【公开日】2016年5月4日【申请日】2016年1月30日本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种实体肿瘤组织消化液，其特征在于，由以下重量份的组分制备而成：I型胶原酶25‑35份、I型蛋白激酶45‑55份、分散酶1‑4份、透明质酸酶15‑25份、泊洛沙姆10‑30份、缓冲液202.56‑320.35份、浓度为15‑85mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10‑20份。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨留中，寇卫政，李秋萍，杨庆辉，蔡卫梅，
申请(专利权)人：新乡医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：河南;41
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