实体肿瘤细胞放射敏感性检测方法技术

一种实体肿瘤细胞放射敏感性检测方法：取受检肿瘤样品组织，制备成单细胞悬液；取体外悬浮培养的淋巴瘤细胞作为外参对照；分别将受检肿瘤样品和作为外参对照的淋巴瘤细胞的单细胞悬液分为照射组和空白对照组，照射组的单细胞悬液均采用5Gy剂量X射线单次照射，空白对照组的单细胞悬液均不进行放射线照射；将各组单细胞悬液进行细胞裂解及漂洗；经裂解后的各组细胞进行电泳；对电泳后的各组细胞进行PI染色；在荧光显微镜下，对受检肿瘤样品的照射组和空白对照组细胞分别进行肿瘤/正常细胞分类采图，同时对外参对照细胞进行采图；对受检肿瘤样品细胞中的肿瘤细胞、正常细胞和外参对照细胞的图像进行数据处理，判断受检肿瘤样品细胞的放射敏感性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于检测实体肿瘤的细胞放射敏感性的方法。
技术介绍
实体肿瘤细胞的放射敏感性检测是研究预测实体肿瘤细胞放射反应性的基础,其前提条件是需先行建立灵敏、稳定、可操作性强的。为此，国外几个主要放射生物研究中心多年来相继开展了预测肿瘤放射敏感性的研究，并陆续推出了一些有潜在价值的检测方法，如SF2 (2Gy照射后的细胞存活分数)、Tpot (潜在倍增时间)、微核率、原代细胞克隆形成分析及细胞黏着分析等。由于这些实验方法操作复杂，稳定性、成功率较低，至今多停留在体外培养细胞水平无法真正用于实体肿瘤活检组织细胞放射敏感性检测。专利技术人经过多年的实践摸索，结合实际对“彗星(Comet)”分析法(Ostling于1984年首先推出的检测外周血及体外培养细胞DNA链断裂的实验方法)不断进行改良研究，终于研发和建立了可用于实体肿瘤活检组织样品细胞放射敏感性检测的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种可用于实体肿瘤组织样品的细胞放射敏感性检测的方法。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案:一种，其特征在于，步骤如下:( I)取受检肿瘤样品组织，制备成单细胞悬液；(2)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种实体肿瘤细胞放射敏感性检测方法，其特征在于，步骤如下：（1）取受检肿瘤样品组织，制备成单细胞悬液；（2）取体外悬浮培养的淋巴瘤细胞作为外参对照；分别将受检肿瘤样品和作为外参对照的淋巴瘤细胞的单细胞悬液分为照射组和空白对照组，照射组的单细胞悬液均采用5Gy剂量X射线单次照射，空白对照组的单细胞悬液均不进行放射线照射；（3）将各组单细胞悬液进行细胞裂解及漂洗；（4）经裂解后的各组细胞进行电泳；（5）对电泳后的各组细胞进行PI染色；（6）在荧光显微镜下，对受检肿瘤样品的照射组和空白对照组细胞分别进行肿瘤/正常细胞分类采图，同时对外参对照细胞进行采图；（7）对受检肿瘤样品细胞中的肿瘤细胞、正常细胞...

【技术特征摘要】
1.一种实体肿瘤细胞放射敏感性检测方法，其特征在于，步骤如下: (1)取受检肿瘤样品组织，制备成单细胞悬液； (2)取体外悬浮培养的淋巴瘤细胞作为外参对照；分别将受检肿瘤样品和作为外参对照的淋巴瘤细胞的单细胞悬液分为照射组和空白对照组，照射组的单细胞悬液均采用5Gy剂量X射线单次照射，空白对照组的单细胞悬液均不进行放射线照射； (3)将各组单细胞悬液进行细胞裂解及漂洗； (4)经裂解后的各组细胞进行电泳； (5)对电泳后的各组细胞进行PI染色； (6)在荧光显微镜下，对受检肿瘤样品的照射组和空白对照组细胞分别进行肿瘤/正常细胞分类采图，同时对外参对照细胞进行采图； (7)对受检肿瘤样品细胞中的肿瘤细胞、正常细胞和外参对照细胞的图像进行测量和数据处理,判断受检肿瘤样品细胞的放射敏感性。2.按权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(I)中所述单细胞悬液的制备方法采用机械研磨法或消化液消化法。3.按权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中所述细胞裂解及漂洗的操作为:将空白对照组和照射组的细胞悬液与1%低溶点琼脂糖混合后铺在预冷的载玻片上制成琼脂糖胶板；将胶板在裂解液中裂解50-60分钟，之后漂洗3次。4.按权利要求3所述的检测方法，其特征在于，取浓度为2-5X IO4个/mL的细胞悬液0.25mL与1%低溶点琼脂糖0.75mL混合。5.按权利要求3所述的检测方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：高黎，杨伟志，房超，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，北京大恒图像视觉有限公司，
类型：发明
国别省市：