丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及一种疾病病原体基因检测技术，尤其涉及一种检测样本中HCV?1b、2a、3a、3b和6a亚型病毒核酸存在的方法及试剂盒。本发明专利技术的技术方案为提供一种丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，该试剂盒包括：RNA提取液，PCR反应液，RT-PCR酶系，阳性质控品，阴性质控品，所述PCR反应液包括：1条逆转录引物：SEQ?ID?NO.1，2条丙型肝炎病毒特异性扩增引物：SEQ?ID?NO.2和SEQ?ID?NO.3，检测探针5条：SEQ?ID?NO.4到SEQ?ID?NO.8。本发明专利技术的有益效果为本发明专利技术试剂盒可以检测HCV?1b、2a、3a、3b和6a亚型单独感染和混合感染。，检测通量较高，灵敏度、特异性高，可以区分常见亚型，检测结果可借助分析软件自动判断；成本低，操作简单，检测时间短。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种疾病病原体基因检测技术，尤其涉及一种采用实时荧光RT-PCR检测样本中HCV lb、2a、3a、3b和6a亚型病毒核酸存在的方法及试剂盒。
技术介绍
丙型肝炎病毒Ofepatitis Cvirus, HCV)是引起输血后非甲非乙型肝炎(NANBH)的主要病原体,全球性传染,给人类健康带来极大的危害。HCV传播途径包括输血及器官移植传播、静脉药瘾传播、医源性传播及性接触传播等。据世界卫生组织(WHO)估计，全世界HCV感染率平均约为3%，即约I. 7-2. O亿HCV感染者，而且每年仍有300万 400万新发病例。HCV感染率在不同国家和地区有很大差异。鉴于传染源和传播途径的持续存在，力口之近期内还不可能提供安全有效的疫苗，估计到2015年，慢性HCV感染的总人数将会增加4倍。我国HCV感染率也相当高，1992-1995年全国病毒性肝炎血清流行病学调查结果显示我国抗-HCV的阳性率平均为3. 2%，略高于全球平均水平，由于人口基数大，即使按照当时的总人口计算，HCV感染的绝对人数也已超过3000万。丙型肝炎自然病程的发展是一个非常复杂的生物学过程，受病毒和宿主等多种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，包括RNA提取液，PCR反应液，RT-PCR酶系，阳性质控品，阴性质控品，所述PCR反应液包括 引物 L-pri-Cl :5，-ACTGCCTGATAGGGTGCTTGCGAG-3，；引物 L-pri-C2 :5’ -AATTGCCAGGACGACCGGGTCCTT-3’ ；引物 L-pri-C3 :5’ -GAAAGCGTCTAGCCATGGCGTTAGT-3’ ； 探针 L-pro-Cl :5，-CCCGCTCAATGCCTGGAGATTTGGGC-3，； 探针 L-pro-C2 :5，-GGAATTGCCGGGAAGACTGGGTCCTTTC-3，； 探针 L-pro-C3 :5，-ACCGGAATCGCTGGGGTGACCGGGTCC-3，； 探针 L-pro-C4 :5，-AACCCGCTCAATGCCCGGAAATTTGG-3，； 探针 L-pro-C5 :5，-CCCGCTCAATGCCTGGAGATTTGGGCGT-3，； 所述探针5’端用荧光染料标记，3’端用淬灭荧光染料标记。2.根据权利要求I所述的丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述荧光探针5’端标记FAM或HEX，3’端标记TAMARA或BHQl。3.根据权利要求I所述的丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述RT-PCR酶系包括M-MLV逆转录酶、RNase抑制剂、Taq DNA聚合酶。4.根据权利要求I所述的丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述 PCR 反应液...

【专利技术属性】
技术研发人员：李旭新，
申请(专利权)人：泰普生物科学中国有限公司，
类型：发明
国别省市：