【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
中病毒的分子生物学检测方法,具体涉及一种可以对羊口疮病毒进行早期快速诊断的羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒。
技术介绍
羊口疮(Orf),又称为羊传染性脓疱皮炎(contagious ecthyma),是由羊口疮病毒(Orf virus, 0RFV)引起的山羊和绵羊的一种急性接触性传染病,以口唇、舌、鼻、乳房等部位形成红斑、丘疹、脓疮、溃疡和结成疣状厚痂为特征。ORFV主要感染山羊和绵羊,也可感染人和其它动物,是一种人畜共患性疾病,世界动物卫生组织规定的法定报告传染病。羊口疮在许多养羊国家分布广泛,在我国北方、西北等养羊较多的地方也较常见,是羊的主要疫病之一。由于病毒的抵抗力强,羊群一旦被感染则不易清除,可持续危害羊群多年,给畜牧业造成较大的经济损失。在羊群中,羊口疮病毒主要感染羔羊和小羊,其病死率比成年羊要 高,国内外近年有不少相关的病例报道。而最近也有包括猫、驯鹿、骆驼、鬣羚等动物感染羊口疮病毒的报道,提示羊口疮病毒的宿主范围有所扩大。ORFV初次感染时皮肤损害经过大约6 8周逐渐恢复,留下结痂,而结痂就成为病毒存储场所,并可 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于包括SEQ ID N0:f2所示核苷酸序列的一对引物和SEQ ID NO: 3所示核苷酸序列的TaqMan探针,TaqMan探针的5’端标记有突光报告基因,3’端标记有淬灭突光基团。2.根据权利要求I所述羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于所述TaqMan探针的5’端标记的荧光报告基因为FAM,3’端标记的淬灭荧光基团为Tamara。3.根据权利要求I所述羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒中还包括PCR反应缓冲液、dNTP、DNA聚合酶、阳性质控品和阴性质控品。4.根据权利要求3所述羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒组成为 TaqMan探针引物混合液I管浓度为5 μ M的TaqMan探针、浓度为10 μ M的SEQ IDΝΟ:1所示引物和浓度为ΙΟμΜ的SEQ ID NO: 2所示引物按体积比为I: I: I组成的混合液; TaqMan Mix I管10XPCR反应缓冲液、25mM的dNTP和IOU的DNA聚合酶以及酶稀释液按体积比为25:4:5:1组成的混合液; 阳性质控品I管浓度为O. 5ng/ μ L的羊口疮病毒0RFV024基因片段样品; 阴性质控品I管0. OlM PBS ; 无菌水I管。5.根据权利要求3所述羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒实时荧光定量PCR反应体系为25 μ L,其中5 μ M的TaqMan探针I μ L,10 μ M的上、下游引物各lyL,样品 DNA I μ L,10XPCR 反应缓冲液 2. 5 μ L,25mM 的 dNTP O. 4 μ L...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜红延,罗树红,郝文波,李明,
申请(专利权)人:南方医科大学,
类型:发明
国别省市:
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