【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学领域,具体涉及焦磷酸测序法检测CDA基因多态性的试剂盒及方法。
技术介绍
吉西他滨是临床上用于治疗胰腺癌,肺癌,乳腺癌和膀胱癌等肿瘤的一种抗代谢药物。吉西他滨系胞嘧啶核苷衍生物,通过人平衡型核苷载体I (hENTl)进入细胞内。在胞浆内,吉西他滨被脱氧胞苷激酶(dCK)磷酸化为双氟脱氧胞苷一磷酸(dFdCMP),后者继续活化为双氟脱氧胞苷二磷酸(dFd⑶P)及双氟脱氧胞苷三磷酸(dFdCTP)活性产物。dFd⑶P抑制核苷酸还原酶(RR)的活性,使细胞内DNA合成与修复所必需的原料脱氧二磷酸核苷减少,从而进一步抑制DNA的合成;dFdCTP是一种DNA多聚酶抑制剂,抑制DNA链的延长,使DNA复制提前终止,它的浓度增加还将抑制dCMP脱氨酶,减少dFdCMP代谢,使药物活化增加,自我强化其细胞毒的作用。所以,吉西他滨是通过细胞内多靶位作用而抑制DNA合成的。胞苷脱氨酶(CDA)是吉西他滨主要代谢酶,使吉西他滨下发生不可逆的脱氨基反应,生成相对无活性的代谢产物双氟脱氧尿苷(dFdU)而排出细胞外;吉西他滨另一次要代谢途径是中间产物,dFdCM ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种焦磷酸测序法检测CDA基因多态性的试剂盒,其特征在于,包括如下引物 (1)扩增引物 上游引物5' -AGG GTG CAA CAT AGAAAA T-3/ ; 下游引物5' -TTG CCC TGAAAT CCT TGTACC-3'; 其中,下游引物的5'进行生物素标记; (2)测序引物5'-TGT GCT GAA CGGACC-3'。2.一种应用权利要求I所述的试剂盒检测CDA基因多态性的方法,包括如下步骤 (1)DNA提取; (2)...
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