用于检测血液中多西他赛浓度的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种诊断试剂盒，具体的说是一种用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，包括试剂R1，以及结合有抗人多西他赛抗体的纳米微球试剂R2，还包括多西他赛标准品。本发明专利技术同现有技术相比，具有和高效液相色谱法测定多西他赛浓度相似的技术参数比如精密度、准确度、最低检出限等，除此之外本发明专利技术相对于高效液相色谱法以及色谱-质谱联用具有可以广泛应用于具有全自动生化分析仪的各级医院，操作简便，成本较低，能够满足大量的血液样本中多西他赛浓度的监测，能够满足临床实时监测癌症患者血液中多西他赛浓度的需要。

【技术实现步骤摘要】
用于检测血液中多西他赛浓度的试剂盒本专利技术涉及一种诊断试剂盒，具体的说是一种用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒。多西他赛(Docetaxel，泰索帝)是一种新型抗肿瘤药物，属于紫杉类化合物，为白色或近似白色粉状物，其作用机制是加强微管蛋白聚合作用和抑制微观解聚作用，导致形成稳定的非功能性微管束，从而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。近年来多西他赛在各种肿瘤的临床治疗方面得到广泛应用。多西他赛分子结构如下权利要求1.一种用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，包括试剂R1，以及结合有抗人多西他赛抗体的纳米微球试剂R2，还包括多西他赛标准品； 试剂Rl，包括缓冲液20-200mmol/L，稳定剂2-20mmol/L，表面活性剂0. 2-2mmol/L，无机盐 10-500mmol/L,促进剂 l_5mmol/L,防腐剂 l_5mmol/L ； 试剂R2，包括结合有抗多西他赛抗体的纳米微球0. 1-10. Omg/ml，缓冲液20-200mmol/L,稳定剂2-20mmol/L,还包括防腐剂l_5mmol/L ； 多西他赛标准品，包括缓冲液20-200mmol/L，稳定剂5-20mmol/L，防腐剂2-5mmol/L，0-100umol/L的多西他赛,其余为去离子水。2.根据权利要求I所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于所述的试剂Rl中缓冲液为MES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液或者甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6. 0-8. 0 ； 稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA, EGTA、钥酸钠、钥酸铵、谷氨酸钠、或超氧化物歧化酶等中的一种或多种混合物； 无机盐为氯化钾、氯化钠等中的一种或多种混合物； 表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60或Triton X-100中的一种； 促进剂为聚乙二醇6000、聚乙二醇8000等中的一种或多种混合物； 防腐剂为叠氮化钠。3.根据权利要求I所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于所述的试剂R2中，纳米微球的直径为50-200nm，纳米微球与紫多西他赛抗体的结合方式为化学交联法。4.根据权利要求I所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于所述的试剂R2中，缓冲液为Mes缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、或甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6. 0-8. 0 ； 稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、钥酸钠、钥酸铵、谷氨酸钠、超氧化物歧化酶、氯化钾、氯化钠中的一种或多种混合物； 防腐剂为叠氮化钠。5.根据权利要求I所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于所述的多西他赛标准品中，缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、Mes缓冲液或甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6. 0-8. 0 ； 稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA, EGTA、钥酸钠、钥酸铵、谷氨酸钠、超氧化物歧化酶、氯化钾、氯化钠中的一种或多种混合物； 防腐剂为叠氮钠。6.根据权利要求3所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于所述纳米微球与紫多西他赛抗体的结合方式为化学交联法，包括乳胶粒子的活化以及多西他赛抗体和纳米微球的结合，具体工艺步骤如下 纳米微球的活化 A)取40-100ug多西他赛抗体加入2400ulPH7. 40的缓冲液，混匀备用； B)取IO-IOOmg直径为50-200nm乳胶粒子，离心4°C20000rpm 20min，弃去滤液； C)加入2000ul浓度为10mM，PH值为7.40磷酸缓冲液，并用超声清洗剂溶解纳米微球，离心清洗三次； D)加入PH值为7.40的缓冲液，超声，使纳米微球活化浓度为2.5mg/ml ;加入10mg-50mg的N-轻基琥拍酰亚胺和6. 0mg-30. Omg I-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐； E)室温振荡lh-3h； F)4°C，20000rpm, 20min,弃去滤液； G)加入PH值为7.40的缓冲液，超声 处理，用于结合； 多西他赛抗体和纳米微球的结合 A)加入多西他赛抗体，使纳米微球结合浓度为2.5mg/ml ； B)室温振荡2-16h； C)4°C高速离心30-90min，弃去上清液； D)用3000ul，PH值为7.40的缓冲液，超声处理，稳定剂2-20mmol/L，保存溶液至2-8。。。全文摘要本专利技术涉及一种诊断试剂盒，具体的说是一种用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，包括试剂R1，以及结合有抗人多西他赛抗体的纳米微球试剂R2，还包括多西他赛标准品。本专利技术同现有技术相比，具有和高效液相色谱法测定多西他赛浓度相似的技术参数比如精密度、准确度、最低检出限等，除此之外本专利技术相对于高效液相色谱法以及色谱-质谱联用具有可以广泛应用于具有全自动生化分析仪的各级医院，操作简便，成本较低，能够满足大量的血液样本中多西他赛浓度的监测，能够满足临床实时监测癌症患者血液中多西他赛浓度的需要。文档编号G01N33/577GK102621325SQ201210099620公开日2012年8月1日 申请日期2012年4月6日 优先权日2012年4月6日专利技术者李子樵, 郭易萍 申请人:上海蓝怡科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李子樵，郭易萍，
申请(专利权)人：上海蓝怡科技有限公司，
类型：发明
国别省市：