一种核苷酸序列、基于序列编码的融合蛋白、制备的结核分枝杆菌疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域。本发明专利技术公开了一种新的核苷酸序列，并将其应用于结核分枝杆菌疫苗的制备。分析选择结核分枝杆菌ESAT6蛋白和Ag85B蛋白的优势抗原表位，将两者连接形成新的融合蛋白EA，采用人偏爱密码子将融合蛋白EA的氨基酸序列转换成核苷酸序列并合成。将合成后的融合蛋白EA基因分别克隆到真核表达载体及腺病毒载体，并将获取的重组真核表达载体及重组腺病毒作为疫苗免疫BALB/c小鼠，最后通过间接ELISA实验及淋巴细胞增殖实验检测其免疫效果。检测结果证实，本发明专利技术制备的结核分枝杆菌疫苗可激活小鼠免疫系统，所采用的EA基因优于ESAT6天然基因和Ag85B天然基因。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，更具体地是涉及一种新的核苷酸序列，该核苷酸所编码的蛋白包含结核分枝杆菌ESAT6蛋白和Ag85B蛋白的优势抗原表位,还涉及该核苷酸序列在制备结核分枝杆菌疫苗上的应用。
技术介绍
结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)是引起结核病的病原微生物， 广泛分布于世界各地。据估计，全球每年有800万新感染的结核患者，有200万人死亡。另外，据卫生部调查，我国目前有近半数人口(5.5亿)感染过结核菌，每年约有145万新发病例，并且每年因结核病死亡人数达13万，大大超过其它传染病死亡人数的总和。卡介苗做为目前临床上唯一使用的抗结核疫苗，迄今已使用了近100年。但在长期的使用中发现，卡介苗免疫保护作用差异很大(0% 80% )，预防成人结核病方面根本就没有效果。除此之外，卡介苗尚存在下述缺点卡介苗是全菌疫苗，可引起淋巴结肿大和化脓等异常反应；卡介苗接种干扰了纯蛋白衍生物(purified protein dervatives, PPD) 诊断结核感染的价值；卡介苗接种免疫缺陷病人可引起全身播散性致死感染以及卡介苗诱导的保护力随时间推本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余铭恩，胡成平，冯俊涛，吴琼杉，李晓照，
申请(专利权)人：杭州贤至生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：