抗猫SAA特异性单链抗体、质粒载体及方法技术

本发明专利技术公开了一种抗猫SAA特异性单链抗体、质粒载体及方法，本发明专利技术属于生物工程技术领域。本发明专利技术涉及一种重组蛋白，该重组蛋白包含猫血清淀粉样蛋白A(猫SAA)的两个优势抗原表位，为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量，采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明专利技术还涉及该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经淘选筛选得到对应猫SAA单链抗体scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体，同时也用该重组蛋白免疫兔子，纯化多克隆抗体。将纯化的多克隆抗体标记辣根过氧化物酶(HRP),ELISA正交实验确定最佳配对组合。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程。具体来说，本专利技术涉及一种新的重组蛋白，通过基因工程技术编码合成该重组蛋白的核苷酸序列，构建含有上述核苷酸序列的质粒载体，转化有上述质粒载体的大肠杆菌菌株，表达重组猫血清淀粉样蛋白a；使用上述重组蛋白制备猫血清淀粉样蛋白a单克隆抗体和多克隆抗体，并应用于猫感染性疾病早期炎症的诊断。

技术介绍

1、猫血清淀粉样蛋白(猫saa)是机体炎症的一个重要指标。是由肝细胞分泌到血清的一种急性反应蛋白，在机体受到损伤或者感染后，此指标会迅速表现为升高，当炎症消除后此指标会恢复到正常值。目前，猫血清淀粉样蛋白a已经被建议作为一种合适的标志物用以诊断猫炎症反应。

2、在炎症期间，猫血清淀粉样蛋白a能与血浆高密度脂蛋白(hdl)结合，调节高密度脂蛋白的代谢。此外，猫血清淀粉样蛋白a的降解产物能以淀粉样蛋白a原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。猫血清淀粉样蛋白a升高可发生在动脉粥样硬化、糖尿病肾病、急性心肌梗死、冠心病、慢性肾脏疾病等炎症性疾病中。

3、目前，市场上关于猫感染性疾病早期炎症的诊断本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.抗猫SAA特异性单链抗体scfv-5A11，包括轻链和重链，其特征在于：

2.一种编码如权利要求1所述的抗猫SAA特异性单链抗体scfv-5A11的基因，其特征在于：

3.一种质粒载体组合，其特征在于：该质粒载体组合含有如SEQ ID NO.3和SEQ IDNO.4所示的核苷酸序列。

4.一种如权利要求1所述的抗猫SAA特异性单链抗体scfv-5A11的制备方法，包括：

【技术特征摘要】

1.抗猫saa特异性单链抗体scfv-5a11，包括轻链和重链，其特征在于：

2.一种编码如权利要求1所述的抗猫saa特异性单链抗体scfv-5a11的基因，其特征在于：

3.一种质...

【专利技术属性】
技术研发人员：余铭恩，武妮妮，项美华，刘清泉，陈安琪，余卫，敖翔，
申请(专利权)人：杭州贤至生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：