一种猫杯状病毒（FCV）重组蛋白单克隆抗体及制备方法技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域。本发明专利技术涉及一种重组蛋白，该重组蛋白包含猫杯状病毒(FCV)(Feline calicivirus,FCV)蛋白的两个优势抗原表位，为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量，采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明专利技术还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经淘选筛选得到对应猫杯状病毒(FCV)蛋白单链抗体scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体，纯化单克隆抗体并分别标记铕离子(Eu

【技术实现步骤摘要】
一种猫杯状病毒(FCV)重组蛋白单克隆抗体及制备方法


[0001]本专利技术属于生物工程
具体来说，本专利技术涉及一种新的重组蛋白，涉及使用上述重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，筛选得到特异性单链抗体scfv序列，还涉及将得到的scfv序列构建成真核表达载体表达猫杯状病毒(FCV)蛋白单克隆抗体，并应用于猫的上呼吸道感染的早期诊断。

技术介绍

[0002]猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)属于杯状病毒科的成员之一，是猫的一种重要病原。近年来，有高致病性的FCV毒株(VSD
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FCV)在一些国家相继爆发，该毒株可引起感染猫全身性多系统病变，死亡率较高。猫杯状病毒(FCV)感染的主要症状是发热(40℃左右)、口腔溃疡(舌或者上下颚)、鼻腔炎症、结膜炎、间质性肺炎、多发性关节炎等。病猫精神欠佳、打喷嚏，口腔及鼻腔分泌物增多，流涎，眼鼻分泌物开始为浆液性、4～5天后为脓性，角膜发炎、可导致失明。口腔溃疡是为最显著的特征，以舌和硬腭、腭中裂周围明显，出现大面积的溃疡和肉芽增生，病猫进食困难，容易造成营养不良、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.猫杯状病毒(FCV)蛋白特异性单链抗体scfv
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3C5，包括轻链和重链，其特征在于：所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.猫杯状病毒(FCV)蛋白特异性单链抗体scfv
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5E2，包括轻链和重链，其特征在于：所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。3.一种编码权利要求1所述的猫杯状病毒(FCV)蛋白特异性单链抗体scfv
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3C5的基因，其特征在于：编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。4.一种编码权利要求2所述的抗猫杯状病毒(FCV)蛋白特异性单链抗体scFv
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5E2的基因，其特征在于：编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.7...

【专利技术属性】
技术研发人员：余昌静，洪淑凡，武妮妮，楼莹，余铭恩，敖翔，
申请(专利权)人：杭州贤至生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：