本发明专利技术公开了一种从绿茶中分离纯化表儿茶素没食子酸酯单体的方法，本方法以云南大叶种绿茶为原料，用乙酸乙酯直接提取，粗提物分别经过两种不同的吸附树脂柱色谱吸附洗脱，收集富含表儿茶素没食子酸酯（ECG）解吸馏分，高效外循环浓缩回收乙醇后再用反渗透膜低温浓缩，95%乙醇低温冷藏结晶，最终冷冻干燥得到98%表儿茶素没食子酸酯（ECG）单体。本发明专利技术方法简便，制备周期短，成本低，符合环保和安全的要求，适宜规模型工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从绿茶原料中分离纯化表儿茶素没食子酸酯(ECG)单体的方法， 属于食品
技术介绍
儿茶素类物质具有明显的抗衰老、防癌抗突变、去脂减肥、降低血糖、血脂和胆固醇、预防心血管疾病等药理功能，已广泛应用于食品加工、医药保健和日用化工等领域。 2006年10月，美国食品和药物管理局(FDA)批准茶多酚作为新的处方药，用于局部(外部) 治疗由人类乳头瘤病毒引起的生殖器疣，这是FDA根据1962年药品修正案条例首个批准上市的植物(草本)SM。过去的二十年中，由于有关茶多酚/儿茶素的保健与药理功能研究的突破，不仅扩大了绿茶在国际市场上的份额，而且极大地推进了茶叶提取物产业的发展， 为茶叶功能成分的研究与开发奠定了良好的产业与市场基础，目前，我国已经形成年产约 5000吨茶多酚/儿茶素的产业规模。儿茶素粗品传统的提取分离工艺主要包括离子沉淀法、有机溶剂萃取法和吸附柱色谱法。儿茶素药理保健功能研究与产业应用中最令人注目的是表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)和表儿茶素没食子酸酯 (ECG)，因而成为儿茶素单体分离、纯化与临床应用研究的焦点。但是由于茶叶的成分复杂， 从茶叶中制取高纯度的儿茶素单体具有相当难度。其技术难点是精细分离，同时还应防止有效物及茶叶赋有的天然风味不被破坏和损失，加工过程尽量采用低温。目前国内外比较成功的应用于EGCG单体分离制备的工艺主要包括高速逆流色谱萃取、模拟移动床色谱分离等技术^9]。国内外研究成果表明，ECG在抗氧化、清除脂质自由基、抑制人体病毒侵染方面作用显著；具有极强的抑菌活性，可望开发成为一种天然的类抗生素物质；也可明显改善创伤伤口愈合和瘢痕形成效果；同时，ECG还对星形胶质细胞损伤有明显的神经保护作用。张莹等用自制的制备型逆流色谱仪，以石油醚-乙酸乙酯-水(0. 2 1 2，ν/ν)为溶剂系统从儿茶素中分离纯化得到ECG单体，纯度达到98%；黄永东等使用B型三带模拟移动床技术，以C18键合硅胶为固定相，乙醇与水(20:80，ν/ν)为流动相，采用Varicol工艺能得到纯度为91. 33%的ECG，回收率为91. 41%，但上述两种方法分别存在Cw键合硅胶价格昂贵，有机溶剂用量大，分离平台(逆流色谱仪，移动床)装载量小等缺点，不适宜规模放大。迄今，国内外尚未有EGC单体产业化制备方面的报道。参考文献如下王婧，高玉堂.茶多酚抗癌的流行病学研究.肿瘤，2011，31(6): 553-556刘学铭，梁世中.茶多酚的保健和药理作用及应用前景.食品与发酵工业，1998，24(5) :47-51, 71Yokozawa Tx, Dong Ex, Nakagawa Tx, el al. In vitro and in vivo studies on the radical scavenging activity of tea . J Agric Food Chem, 1998，46(6):2143-2150黄芳华.从美国首个被批准植物药探讨中药药代动力学研究与评价策略. 中国中药杂志，2010，35(7) :932-935黄思勇，金显平，康振兴，干国平.茶叶下脚料中茶多酚的提取纯化工艺研究.湖北中医药大学学报，2011，13(4): 30-32张盛，刘仲华，黄建安，刘爱玲，施兆鹏.吸附树脂法制备高纯儿茶素的研究 .茶叶科学，2002，22 (2) =125-130胡莉娟.绿茶中茶多酚的提取工艺研究.云南农业大学学报，2011， 26(3) :426-429Zhang Ying, Shi Zhao-peng, Nie Hong-yong, et al. Preparative Isolation and Purification of Catechins from Green Tea Extract by Preparative Counter-current Chromatography . Journal of Hunan Agricultural University (Natural Science), 2003, 29(5): 408-411， 417黄永东，江和源，江用文，等.传统SMB、Varicol和Partial-discard工艺分离纯化ECG和EGCG的比较研究,茶叶科学，2011，31 (3) =201-210Guo Q, Zhao BL, Li MF, et al. Studies on protective mechanisms of four components of green tea polyphenols against lipid peroxidation in synaptosomes biochim, Biophys Acta, 1996, 13 (3):210-222.Yoko Yanagawa, Yoshimasa Yamamoto, Yukihiko Hara, Tadakatsu Shimamura. A Combination Effect of Epigallocatechin Gallate, a Major Compound of Green Tea Catechins, with Antibiotics on Helicobacter pylori Growth In Vitro . Current Microbiology, 2003， 47:244-249.Renata T. Abib, Andre' Quincozes-Santos, Patricia Nardin, et al. Epicatechin gallate increases glutamate uptake and SlOOB secretion in C6 cell lineage , Mol Cell Biochem, 2008， 310:153-158.Kapoor M, Howard R, Hall I et al. Effects of epicatechin gallate on wound healing and scar formation in a full thickness incisional wound healing model in rats , Am J Pathol, 2004， 165:299-307。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供从绿茶中分离纯化表儿茶素没食子酸酯单体的方法，该方法方法简便，没用毒性强的有机溶剂，制备周期短，成本低，符合环保和安全的要求，表儿茶素没食子酸酯单体的提取率及产品纯度高，适宜规模型工业化生产。本专利技术提供的技术方案是一种从绿茶中分离纯化表儿茶素没食子酸酯单体的方法，包括如下步骤(1)提取绿茶原料中总儿茶素称取绿茶原料，加入Γ7BV乙酸乙酯后加热，间歇搅拌，回收乙酸乙酯，浓缩提取液，然后喷雾干燥，得到总儿茶素制品；(2)分离酯型儿茶素与非酯型儿茶素加入纯水溶解总儿茶素制品配置成浓度为3% (w/v)的上柱料液，用吸附树脂柱分离纯化，解吸溶剂为乙醇，收集乙醇解吸馏分，用高效外循环浓缩回收乙醇，将浓缩的解吸馏分离心、喷雾干燥，得到本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张盛，刘仲华，李适，李银花，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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