同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法技术

本发明专利技术公开了一种同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)‑儿茶素含量的HPLC方法，可以简便、快速、准确地同时测定没食子酸和(+)‑儿茶素的含量。其中，没食子酸的检测限达到0.62ng，平均回收率达98.99％；(+)‑儿茶素的检测限达到12.20ng，平均回收率达101.09％。因此，本发明专利技术的方法可以更全面地监控地榆类制剂中的活性成分含量，更真实地反映药品的内在质量，为地榆类制剂的质量控制提供了有效保障。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药品的检测，具体涉及同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法。
技术介绍
地榆(拉丁学名：SanguisorbaofficinalisL.)是蔷薇科地榆属多年生草本植物，纺锤形粗壮跟，短柄小叶，紫红色花瓣，果实包藏萼筒内。别名“黄爪香”、“玉札”、“玉豉”或“酸赭”等。分布在亚洲北温带、广布于欧洲以及中国，生长于海拔30米至3000米的地区，常生于灌丛中、山坡草地、草原、草甸及疏林下，已由人工引种栽培。地榆也是中草药，性寒，味苦酸，无毒；归肝、肺、肾和大肠经。有凉血止血，清热解毒，培清养阴，消肿敛疮等功效。地榆升白片是目前较为常见的地榆类制剂，它由地榆单味药加工制成的片剂，具有升高白细胞数量的作用，临床上常作为化疗期间的辅助用药，也可用于治疗精神病药所致的白细胞减少症、干扰素治疗乙型肝炎所致的白细胞减少症。地榆升白片制剂标准收载于《国家中成药标准汇编》口腔肿瘤儿科分册，具体制法为：取地榆，粉碎成细粉，加入淀粉、蔗糖和糊精，混匀，制成颗粒，干燥，压片，包糖衣或薄膜衣，即得。由于没食子酸(gallicacid)是地榆药材的主要药材成分之一，该标准的含量测定项下测定了没食子酸的含量。然而，(+)-儿茶素((+)-catechin)同样是地榆药材中很重要的一个活性成分，其具有降低辐射对造血组织的损伤，促进造血功能恢复的作用。因此，实际中也有必要对地榆升白片中的(+)-儿茶素的含量同时进行监控，以更真实地反映药品的内在质量。然而，目前也没有对于地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的测定方法报道，更没有对于地榆升白片中没食子酸和(+)-儿茶素含量的测定方法报道。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法，它包括以下步骤：(1)制备没食子酸和(+)-儿茶素的对照品溶液：取没食子酸和(+)-儿茶素对照品，混合，用甲醇或乙醇分别配制成具有浓度梯度的对照品溶液；(2)制备供试品溶液：取地榆类制剂或其粉末，除去包衣，甲醇或乙醇提取，过滤，得供试品溶液；(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪进行检测；色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱；检测波长：280nm；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积浓度为0.03％～0.2％的水溶液，梯度洗脱；梯度洗脱程序如下：0～18min，流动相A的体积分数从5％线性变化到14％；18～50min，流动相A的体积分数从14％线性变化到21％；50～53min，流动相A的体积分数从21％线性变化到55％；53～55min，流动相A的体积分数从55％线性变化到5％；55～65min，流动相A的体积分数保持在5％；(4)绘制标准曲线，计算地榆类制剂中的没食子酸和(+)-儿茶素的含量。进一步地，所述色谱条件的柱温为25℃～35℃。更进一步地，所述柱温为30℃。进一步地，所述色谱条件的流速1.0mL/min。进一步地，所述色谱柱的规格为：内径4.6mm，长度250mm，填料粒径5μm。更进一步地，所述色谱柱为岛津InertsilODS-3。进一步地，步骤(1)中，所述甲醇的浓度是5％。进一步地，步骤(2)中，所述提取是回流提取。进一步地，步骤(2)中，所述甲醇的浓度是50％。进一步地，步骤(2)中，所述样品与甲醇的重量体积比为0.12g/mL。进一步地，步骤(3)中，所述流动相B为磷酸体积浓度为0.05％的水溶液。进一步地，步骤(3)中，所述色谱条件的进样量为20μL。进一步地，所述地榆类制剂是以地榆原粉为原料，加上药学上可接受的辅料制备得到的制剂。更进一步地，所述制剂是片剂。更进一步地，所述片剂是地榆升白片。本专利技术中，所述的“甲醇”、“乙醇”均包括它们任意浓度下的水溶液。本专利技术通过对色谱条件的优化，使没食子酸和(+)-儿茶素的色谱峰与杂质色谱峰分离良好，并且线性关系优异，精密度、稳定性和重复性试验的RSD均小于2％。其中，没食子酸的检测限达到0.62ng，平均回收率达98.99％；(+)-儿茶素的检测限达到12.20ng，平均回收率达101.09％。因此，本专利技术成功建立了地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC测定方法，可以简便、快速、准确地同时测定没食子酸和(+)-儿茶素的含量，可以更全面地监控地榆类制剂中的活性成分含量，更真实地反映药品的内在质量，为地榆类制剂的质量控制提供了有效保障。本专利技术检测方法使用的设备为高效液相色谱/HPLC，广泛配备于各制药企业，普遍易得，设备的购置和使用成本相对低，对待测物质的要求适中，不要求使用高纯度的待测物质。因此，本专利技术检测方法尤其适用于广大制药企业使用，而不需要再购置其他分析设备。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为没食子酸和(+)-儿茶素对照品色谱图，峰1是没食子酸的色谱峰，峰2是(+)-儿茶素的色谱峰。图2为采用高浓度甲醇配制对照品溶液时，没食子酸的峰。图3为采用5％浓度甲醇配制对照品溶液时，没食子酸的峰。图4为地榆升白片制剂的色谱图，峰1是没食子酸的色谱峰，峰2是(+)-儿茶素的色谱峰。图5为没食子酸的DAD光谱图。图6为(+)-儿茶素的DAD光谱图具体实施方式实施例1本专利技术的HPLC方法及方法学验证一、同时测定地榆升白片中没食子酸和(+)-儿茶素的含量1仪器、试剂与药品SSIseries1500高效液相色谱仪(美国SSI公司)，紫外检测器，CSChromPlus色谱工作站；色谱柱InertsilODS-3(250mm×4.6mm，5μm，GLScienceslnc.)；KQ-600DE型数控超声波清洗器(40KHz，600W)；十万分之一电子天平(瑞士奥豪斯DV-215-CD)；优普UPT系列超纯水器(成都优普电子产品有限公司)。地榆升白片(批号141215、141111、140811、141208，由成都地奥制药集团有限公司提供)；没食子酸对照品(批号：11083-201204，购于中国药品生物制品鉴定所)，(+)-本文档来自技高网...

【技术保护点】
同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)‑儿茶素含量的HPLC方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)制备没食子酸和(+)‑儿茶素的对照品溶液：取没食子酸和(+)‑儿茶素对照品，混合，用甲醇或乙醇分别配制成具有浓度梯度的对照品溶液；(2)制备供试品溶液：取地榆类制剂或其粉末，除去包衣，甲醇或乙醇提取，过滤，得供试品溶液；(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪进行检测；色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱；检测波长：280nm；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积浓度为0.03％～0.2％的水溶液，梯度洗脱；梯度洗脱程序如下：0～18min，流动相A的体积分数从5％线性变化到14％；18～50min，流动相A的体积分数从14％线性变化到21％；50～53min，流动相A的体积分数从21％线性变化到55％；53～55min，流动相A的体积分数从55％线性变化到5％；55～65min，流动相A的体积分数保持在5％；(4)绘制标准曲线，计算地榆类制剂中的没食子酸和(+)‑儿茶素的含量。

【技术特征摘要】
1.同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法，其特征在于：它包
括以下步骤：
(1)制备没食子酸和(+)-儿茶素的对照品溶液：取没食子酸和(+)-儿茶素对照品，混
合，用甲醇或乙醇分别配制成具有浓度梯度的对照品溶液；
(2)制备供试品溶液：取地榆类制剂或其粉末，除去包衣，甲醇或乙醇提取，过滤，得供
试品溶液；
(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪进行检测；
色谱条件如下：
色谱柱：C18色谱柱；
检测波长：280nm；
流动相：流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积浓度为0.03％～0.2％的水溶液，梯度洗
脱；
梯度洗脱程序如下：
0～18min，流动相A的体积分数从5％线性变化到14％；18～50min，流动相A的体积分数
从14％线性变化到21％；50～53min，流动相A的体积分数从21％线性变化到55％；53～
55min，流动相A的体积分数从55％线性变化到5％；55～65min，流动相A的体积分数保持在
5％；
(4)绘制标准曲线，计算地榆类制剂中的没食子酸和(+)-儿茶素的含量。
2.根据权利要求1所述的HPLC方法，其特征在于：所述色谱条...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓赟，胡佳，王泽宇，广兵，康敏，李鸿翔，
申请(专利权)人：成都地奥制药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51