本发明专利技术涉及与人胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）结合的抗体，其中所述抗体能够调制树突细胞的分化状态并且延长移植物的存活。此外，本发明专利技术还提供包含所述抗体的药物组合物和用其治疗疾病的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及结合人胞间粘附分子1 (ICAM-I)的抗体，其中所述抗体能够调制树突细胞的分化和功能并且延长移植物的存活。此外，本专利技术还提供包含所述抗体的药物组合物和用其治疗疾病的方法。
技术介绍
ICAM-I是90kDa的I型细胞表面糖蛋白，由从N末端到C末端排序并称为结构域 1至5的5个胞外免疫球蛋白超家族结构域、一个跨膜域和一个胞内域组成(Cell. 1990， 61 :243-54)。ICAM-I介导白细胞/白细胞相互作用，例如T细胞和抗原呈递细胞之间的相互作用。它还在炎症过程中介导白细胞渗入组织(Transplantation. 1999，67 729-736)。体外研究表明干扰ICAM-I/白细胞功能抗原(LFA-I)相互作用的抗体能够抑制T细胞粘附于上皮细胞并且这些抗体还可显著降低混杂的淋巴细胞反应中的T细胞活化(Proc Natl Acad Sci USA. 1988，85 :3095-309)。在使用抗人 ICAM-1 小鼠单克隆抗体R6-5-D6(恩莫单抗)对猴的研究中，与对照相比肾脏同种异体移植物的存活延长并且T细胞在移植体中的渗润下降(J Immunol. 1990，144 :4604-4612)。还已证明恩莫单抗对抑制类风湿性关节炎患者的疾病活动有益(Arthritis Rheum. 1994,37 :992-999 ;J Rheumatol. 1996,23 :1338-1344)。但是，在随机多中心研究中，肾脏移植后的恩莫单抗诱导治疗不能降低急性排斥反应率或移植物功能延迟发作的风险(Transplantation. 1999， 67 :729-736)。此外，急性缺血性中风患者的临床试验显示用恩莫单抗的抗ICAM-I疗法并不是有效的疗法，并且与安慰剂相比实际上显著恶化中风后果并引起更不良的作用，主要是感染和发烧(Neurology. 2001，57 :1428-1434)。恩莫单抗通过阻断T细胞和中性白细胞粘附于血管上皮细胞来起作用，并且已经提出干扰中性白细胞迁移可能增加感染易感性(J Immunol. 1999，162 :2352-2357)。树突细胞(DC)是高度特化的抗原呈递细胞，它们能整合多种免疫应答 (Nature. 1998,382 :245-252)，并且树突细胞包括一族多样化的参与启动免疫和免疫耐受的专门的抗原呈递细胞。迄今为止，不成熟的DC被认为会引起T细胞无反应性，而通过活化刺激物例如脂多糖(LPS)转变为成熟DC的DC被认为会诱发初期T细胞应答(primary T cell response) (Blood. 2006,108 :1435-1440)。此外，具有独特的细胞因子产生特点的半成熟DC可能具有致耐受性功能(Blood. 2006，108 :1435-1440)。ICAM-I在树突细胞中高水平表达。但是迄今为止，树突细胞中的ICAM-I被认为仅作为在T细胞-DC相互作用中进行LFA-I结合的简单粘附分子。
技术实现思路
本专利技术的一个目标涉及结合人胞间粘附分子-I(ICAM-I)的抗体，其中所述抗体能够调制树突细胞的分化和功能并且延长移植物的存活。此外，本专利技术提供包含所述抗体的药物组合物和用其治疗疾病的方法。更具体地，本专利技术涉及抑制对移植的细胞或器官的排斥或抑制由移植的造血细胞引起的移植物抗宿主病的抗人ICAM-I抗体。本专利技术还涉及能够结合人ICAM-I的结构域1 但是不能阻断ICAM-I和其配体LFA-I之间的相互作用的抗体。本专利技术还涉及生产所述材料的方法，该方法提供生产所述抗体或其片段的细胞。 本专利技术还包括通过所述方法得到的杂交瘤细胞以及由所述杂交瘤细胞产生的抗体。本专利技术还包括用于抑制对移植的细胞或器官的排斥的药物组合物。所述药物组合物包含选自以下的免疫抑制剂能够结合ICAM-I但是不抑制ICAM-I和LFA-I之间的相互作用的抗体；和抗体片段，所述片段能够结合ICAM-I但是不抑制ICAM-I和LFA-I之间的相互作用。此外，本专利技术还涉及使用免疫抑制剂来抑制对移植的细胞或器官的排斥或抑制由移植的造血细胞引起的移植物抗宿主病的方法，所述免疫抑制剂选自抗体和抗体片段。所述抗体或抗体片段优选地选自单克隆和多克隆抗体，更优选是人或动物(即非人)抗体。附图说明当与附图一起考虑时，通过参考下面的具体实施方式会更好地理解从而容易明了对本专利技术和随之产生的本专利技术的多个优点的完整理解，附图中图1显示使用单色流式细胞术的MD-2和R6-5-D6单克隆抗体对人ICAM-I转染的 HEK293T细胞表面的反应性的照片。图2显示MD-2和R6-5-D6抗体对hlm2345和hl2m345ICAM_l突变体转染的 HEK293T细胞的反应性的照片。图3显示在MD-2或R6-5-D6抗体存在下混杂的淋巴细胞反应后胸苷摄取的结果。图4显示与MD-2或R6-5-D6抗体预孵育后，R6-5-D6抗体对人ICAM-I阳性DU145 细胞的反应性的照片。图5显示树突细胞表面上各种分子的表达水平和在所示抗体的处理后树突细胞培养基中的细胞因子浓度。图6显示人化小鼠外周血中⑶45+人白细胞和⑶3+人T细胞产生的动力学。图7显示由链脲菌素诱导糖尿病并且随后移植大鼠胰岛的人化小鼠的外周血葡萄糖水平。图8显示对从用所示抗体处理的每只小鼠取出的胰岛移植肾脏的苏木精-曙红染色(H&E)和对胰岛素的免疫组织化学染色的照片。具体实施例方式本专利技术就以下实施例进行更详细的进一步解释。但是不应将这些实施例理解为以任何方式限制本专利技术的范围。本专利技术涉及能够抑制免疫应答的小鼠抗人ICAM-I单克隆抗体MD-2和MD-2片段。 更具体地，本专利技术涉及抑制对移植的细胞或器官的排斥或者抑制由移植的造血细胞引起的移植物抗宿主病的抗人ICAM-I抗体。本专利技术还提供能够结合人ICAM-I结构域1但不能阻断ICAM-I及其配体LFA-I之间的相互作用的抗体。本专利技术还包括能够产生所述抗体的杂交瘤细胞。本专利技术还涉及生产所述材料的方法，该方法提供生产抗体及其片段的细胞。所述生产抗体或其片段的方法包括以下步骤(a)用人ICAM-I蛋白或蛋白片段或表达人ICAM-I 的细胞来免疫动物，(b)从所免疫的动物提取脾细胞，(c)将所述动物的脾细胞与骨髓瘤细胞系融合，以及(d)筛选所述杂交瘤细胞并选出所需的杂交瘤细胞，所述所需的杂交瘤细胞能够调制树突细胞的分化和功能，并且能抑制对移植器官的排斥，但不能抑制ICAM-I和 LFA-I之间的相互作用。所述材料可以通过体外培养或向动物注射生产所述材料的细胞而得到。所述材料可从经腹膜内注射生产所述材料的细胞的动物的腹水中得到。所述材料可以通过离子交换色谱或亲和柱层析从培养基上清液中纯化。本专利技术还包括通过所述方法得到的杂交瘤细胞以及由所述杂交瘤细胞产生的抗体。本专利技术还包括到用于抑制对移植的细胞或器官的排斥的药物组合物。所述药物组合物包含选自以下的免疫抑制剂能够结合ICAM-I但是不能抑制ICAM-I和LFA-I之间的相互作用的抗体；和抗体片段，所述片段能够结合ICAM-I但是不能抑制ICAM-I和LFA之间的相互作用。给予本专利技术抗体或其片段可使用给予药物组合物的任意可接受方式来进行。此本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种抗体，其与由以ＫＣＬＲＦ－ＢＰ－００１９８的登录号保藏的杂交瘤产生的抗体竞争结合人胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的结构域１。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US61/087,2652008年8月8日1.一种抗体，其与由以KCLRF-BP-00198的登录号保藏的杂交瘤产生的抗体竞争结合人胞间粘附分子-1 (ICAM-I)的结构域1。2.一种抗体，其结合人ICAM-I的结构域1，但不抑制人ICAM-I与人白细胞功能抗原-I(LFA-I)的结合。3.权利要求1的抗体，其中所述抗体是分离的形式。4.权利要求1的抗体，其中所述抗体是嵌合抗体或人化抗体。5.权利要求1的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体。6.权利要求1的抗体，其中所述抗体通过结合ICAM-I调制树突细胞的分化。7.权利要求1的抗体，其中所述抗体是MD-2(登录号为KCRF-BP-OO198)。8.权利要求1的抗体，其中所述抗体是MD-2(登录号为KCRF-BP-00198)的嵌合形式或人化形式。9.一种包含重链和轻链的结合人ICAM-I的抗体，所述重链包含来自由以 KCLRF-BP-00198的登录号保藏的杂交瘤产生的抗体的重链的3个⑶R，并且所述轻链包含来自由以KCLRF-BP-00198的登录号保藏的杂交瘤产生的抗体的轻链的3个⑶R。10.一种药物组合物，包含权利要求1的抗体。11.权利要求10的...
【专利技术属性】
技术研发人员：朴圣会，
申请(专利权)人：狄诺纳有限公司，
类型：发明
国别省市：KR
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