重组人血管内皮生长因子165与免疫球蛋白Fc片段融合蛋白(VEGF165-Fc)的实验技术制造技术

技术编号:7113218 阅读:400 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种将人重组人血管内皮生长因子165与人免疫球蛋白IgG1的Fc段融合基因(VEGF165-Fc)转入哺乳动物细胞以大规模生产其蛋白产物的技术。本发明专利技术旨在建立用哺乳动物细胞大规模生产具有生物学活性的VEGF165-Fc蛋白的方法。在工业生产中满足生产成本降低、简化工艺流程、提高产品产量和质量的总体要求。采用本方法,可以通过普通的大规模细胞培养获得大量高纯度高生物活性的VEGF165-Fc蛋白。本项技术应用于VEGF165-Fc蛋白的大规模生产,能够明显降低成本、简化工艺流程,提高产品产量和质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种将人重组人血管内皮生长因子165与人免疫球蛋白IgGl的Fc段融合基因(VEGF165-FC)转入哺乳动物细胞以大规模生产其蛋白产物的技术。
技术介绍
1. VEGF的生物学作用与应用前景血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowth factor,VEGF),也称血管渗透因子(vascular permeability factor, VPF),是由 Ferrara N 等人于 1989 年在牛垂体滤泡星状细胞培养液中纯化得到的一种糖蛋白。VEGF由单一基因编码,经过可变剪切可形成至少5种不同的同源二聚体糖蛋白产物,它们分别是VEGF121,VEGF145, VEGF165,EGF189 和VEGF206。VEGF是内皮细胞的特异性丝裂原,通过结合其受体(主要是VEGFR2)激活胞内酪氨酸激酶,启动下游信号通路,进而促使新脉管生长、功能调节及肿瘤的侵润和转移等过程中发挥重要的作用。VEGF是内皮细胞分化和新生脉管萌芽的关键性刺激因子,是针对内皮细胞特异性最高,促血管生长作用最强的有丝分裂原。VEGF与内皮细胞上的两种受体KDR和Flt-I高本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用哺乳动物细胞大规模生产具有生物学活性V165-Fc的蛋白的方法,其特征在于该方法通过如下步骤用哺乳动物细胞大规模生产具有生物学活性的V165-Fc蛋白:制备转染用质粒和PEI、质粒转染293T细胞和表达、蛋白纯化及等四个步骤。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:柴笑梅朱月珍杨宣武周慧芳卢守英江永海
申请(专利权)人:江苏普罗赛生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:32

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