本发明专利技术公开了一种黄体生成激素化学发光定量检测试剂盒，该试剂盒包括黄体生成激素检测反应板，反应板包被有黄体生成激素抗体。黄体生成激素定量检测试剂盒，还包括：酶结合物，发光底物，校准品，质控品，浓缩洗涤液。本发明专利技术可以专一的定量检测出病人血清黄体生成激素的含量，用于辅助诊断卵巢囊肿、原发性卵巢衰竭、垂体或下丘脑功能紊乱、先天性睾丸发育不全等疾病。与传统的ELISA技术相比，本发明专利技术不仅保留了ELISA技术的高度特异性，检测结果的稳定性、可靠性和操作的简便性，同时采用的化学发光法能提高检测的灵敏度。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于体外临床检验和化学发光免疫法
，具体涉及一种用于黄体生 成激素(LH)化学发光定量检测试剂盒及相关制备方法和使用方式。
技术介绍
黄体生成激素(Luteinizing hormone,LH)是人体内由下丘脑释放的一种激素，在 黄体生成素释放激素(luteinizing hormone-releasing hormone，LH-RH，亦称促性腺激素 释放激素gonadotropin-releasing hormone, GnRH)调解下，由腺垂体合成，在男性体内亦 称间质细胞刺激素(interstitial cell stimulating hormone, ICSH)。LH 是一种分子量 约30kD的糖蛋白，由两条不同的肽链构成——α和β亚基，以非共价键相连。LH的α亚 基与促甲状腺激素(TSH)、促卵泡成熟激素(FSH)以及人绒毛膜促性腺激素(hCG)的α亚 基结构相似，这些激素间的差别取决于它们的β亚基，从而表现出免疫学上的不同特性。在男性体内，腺垂体分泌的LH可促进间质细胞合成与分泌睾酮；在女性体内，通 过下丘脑-垂体-性腺轴的作用，LH以动态的浓度参与成年女性排卵周期的调节。在排卵 前，孕酮(Progesterone)和雌二醇(E2)的水平开始降低，导致垂体开始分泌GnRH，从而促 进促性腺激素(FSH)的体内合成以及分泌。升高的FSH会促进卵泡开始发育，进入卵泡期。 在卵泡开始发育的最初阶段，E2分泌缓慢，但通常在12 13天后，会呈现快速增长的态势。 受其影响的垂体以及高水平的GnRF和FSH将促使LH释放。当LH浓度达到峰值的12 18 小时后，卵子将被排出，随之进入黄体期。成形的黄体能够分泌孕酮和雌激素，从而对LH进 行负反馈调节。在孕酮和雌二醇的负反馈调节下，下丘脑-垂体轴将会降低LH和FSH的分 泌水平。怀孕后，发育的胚胎会产生hCG，从而导致黄体继续分泌孕酮和雌二醇。若未受孕， 黄体将退化，从而引发孕酮、雌二醇含量下降以及月经的出现。受低水平激素的影响，下丘 脑将再次引发新的月经周期。患性腺功能减退症的病人体内会出现LH的升高。女性体内因原发性卵巢衰竭、卵 巢囊肿或绝经等问题造成的类固醇激素分泌降低，会使LH的分泌失去调解能力。在男性体 内，若出现睾丸发育不正常或无睾丸症，也会出现LH的失调情况，即先天性睾丸发育不全 以及原发性睾丸衰竭均会导致LH的病理性升高。LH的升高还可见于肾衰竭、肝硬化以及 甲亢等疾病。垂体前叶分泌功能的缺乏可导致LH水平的降低。在男性和女性体内，LH的 降低可导致不孕不育。若下丘脑&iRH分泌降低，也可导致LH分泌水平的降低。此种情况 下，LH的降低预示着垂体或下丘脑功能出现失调，但若要确定病因，还需要进一步的检查。 在对垂体、下丘脑功能紊乱以及性腺生成障碍的诊断中，LH的检测往往与FSH的检测联用。 此外，还可用于判断绝经期以及对内分泌腺治疗效果进行跟踪监控。化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)于 1977 年问世， 1985年第一代化学发光免疫试剂盒研制成功并投放市场。上世纪70年代中期Arakawe首 次报道用发光信号进行酶免疫分析，利用发光的化学反应分析超微量物质，特别是用于临 床免疫分析中检验超微量活性物质。目前，这一技术已从实验室的稀有技术过渡到临床医学的常规检测手段。化学发光免疫分析是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合， 用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其检测原理与放射免疫(RIA)和 酶免疫(EIA)相似，不同之处是以发光物质作为底物，并藉助其自身的发光强度直接进行 测定。化学发光标记免疫分析是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常 用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物一acridinium ester (AE)，是有效的发光标记 物，其通过起动发光试剂(NaOH-H2O2)作用而发光，强烈的直接发光在一秒钟内完成，为快 速的闪烁发光。还有以三联吡啶钌(Ru(byp)32+)标记物为发光底物，用另一反应物三丙胺 (TPA)来激发光反应，在电极表面反复进行氧化还原反应从而产生高效稳定连续发光的电 化学发光免疫分析。这些免疫分析方法都需要高精度复杂的自动测量仪器，目前在国内还 难以实现。化学发光酶免疫分析是以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体)进行免 疫反应，免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物，在信号试剂作用下发光，用发光信号测 定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)，它们 有各自的发光底物。HRP常用的底物为鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰胼，luminol)或其衍生 物如异鲁米诺(4-氨基邻苯二甲酰胼)等，鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，在过氧 化物酶及活性氧的存在下，生成激发态中间体，当其回到基态时发光，其波长为425nm。发光 强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。如果不使用增强剂，鲁米诺体系的发光基本上为闪 光型且信号弱，通过加入某些特殊的增强剂可增强发光的信号并可大大延长发光的持续时 间。化学发光免疫分析既具有放射免疫的高灵敏度(检测限度可达10_15 10_18mol/ L)，又具有酶联免疫的操作简便、快速的特点，易于标准化操作，且测试中不使用有害的试 剂。试剂保持期长，应用于生物学、医学研究和临床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析 法中最有前途的方法之一。但是，国外的自动化学发光酶免疫分析仪及与之相匹配的试剂 盒多采用封闭体系配合使用，价格昂贵，操作复杂，在国内不易推广。
技术实现思路
本专利技术将化学发光技术与免疫分析技术相结合，提供了一种能够定量检测LH的试齐U盒。本专利技术技术方案如下一种黄体生成激素化学发光定量检测试剂盒，包括反应板，酶结合物，发光底物， 校准品，质控品，浓缩洗涤液，所述的反应板包被有黄体生成激素抗体。所述的校准品以黄体生成激素纯品配制，浓度优选为0、5、15、50、100、200mIU/ml。所述的质控品以黄体生成激素纯品配制，由质控品I和质控品II两部分组成，质 控品I的浓度为3-45mIU/ml，质控品II的浓度为55_195mIU/ml。所述的质控品I的浓度优选为4. 9mIU/ml，质控品II的浓度优选为57. 9mIU/ml。所述的酶结合物为HRP标记的黄体生成激素抗体，所述的反应板材质是不透明的 聚苯乙烯或聚乙烯，所述的发光底物为鲁米诺、异鲁米诺或其衍生物，所述的浓缩洗涤液是 pH7. 0-pH8. 0的中性缓冲液。 本专利技术提供的试剂盒具有开放性系统，可以应用于多种不同公司的化学发光检测 仪器，无需昂贵的专用配套仪器，并具有简便，快速，稳定的检测能力，易于在国内市场推具体实施例方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本 专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照 常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆实验室手册(New York =Cold Spring Harbor LaboratoryPress, 1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种黄体生成激素化学发光定量检测试剂盒，其特征在于，包括反应板，酶结合物，发光底物，校准品，质控品，浓缩洗涤液，所述的反应板包被有黄体生成激素抗体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：穆海东，汪宁梅，穆宇豪，王通，
申请(专利权)人：上海裕隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31
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