一种肿瘤抗原CA125的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物技术检测领域，具体涉及一种肿瘤抗原CA125的制备方法及其应用，制备方法包括：(1)细胞培养：复苏OVCAR

【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤抗原CA125的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物技术检测领域，具体涉及一种肿瘤抗原CA125的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]肿瘤抗原(tumor antigen)泛指在肿瘤发生、发展过程中新出现或过度表达的抗原物质。肿瘤抗原CA125是卵巢癌的临床诊断标志物，主要应用于以下临床场景：卵巢癌的早期筛查、区分良性和恶性以及检测卵巢癌的治疗反应。CA125分子量高达300
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500kDa，具有非常复杂的构象表位。
[0003]现阶段，肿瘤抗原CA125可通过生物工程的方法体外表达重组抗原的方法实现制备，但由于重组抗原一般是天然抗原的其中一部分结构，并且糖基化修饰也会有区别，因此不能完全的代表完整的抗原本身。完整的肿瘤抗原CA125也有学术文献报道的通过细胞培养方法表达抗原，然后通过特异性抗体亲合出纯化的方法得到抗原，该方法需要用到过氯酸以及特异性的抗体和特异性抗体的柱偶联，过程复杂，普适性存在欠缺。

技术实现思路

[0004]针对现有肿瘤抗原CA125制备过程复杂、普适性低本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤抗原CA125的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)细胞培养：复苏OVCAR
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3细胞到RPMI
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1640培养基中，加20％FBS，5％CO2培养，1：3传代，细胞继续生长；(2)抗原表达：细胞生长到足量阶段后换液，使用RPMI
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1640培养基加1％FBS生长，进行抗原表达；(3)抗原纯化：收集细胞培养的上清，离心后去除残留的细胞得到清澈的上清溶液，使用截留分子量50kDa的浓缩管在3000rpm转速下离心浓缩所述上清溶液，运用蛋白快速纯化仪分子筛纯化的方法，使用Superdex200 16/60分子筛纯化柱进行纯化并收集组分。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)细胞表达为复苏106数量的OVCAR
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3细胞到细胞培养瓶T25中培养，每周换液1～2次。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)的...

【专利技术属性】
技术研发人员：穆海东，汪宁梅，李敏，
申请(专利权)人：上海裕隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：