【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种肿瘤转移抑制蛋白GDI2的发酵生产方法，尤其是涉及一种利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白GDI2的方法。
技术介绍
Rho-⑶P 解离抑制因子 2 (Rho-⑶P dissociation inhibitor 2，GDI2)，最早由 Leffers等人发现，由201个氨基酸构成，是I^ho⑶P解离抑制因子0 ho⑶I)家族的成员之一。近年来大量的研究证明RhoGDI2蛋白在人体中担负着阻止癌细胞在整个机体内扩散的任务，该蛋白能够非常有效的抑制肿瘤细胞的侵袭及转移，且内皮素I(ET-I)和神经介素 U(NmU)可能为其作用靶点。⑶12在人体内经caspase-Ι酶切后21kDa的⑶12短肽通过失巢凋亡机制(Anoikis)能够大幅度增加癌细胞的凋亡，从而抑制了细胞的转移。作为一种具有良好应用前景的的抗癌药物蛋白，提高⑶12蛋白的工业化水平对于生产企业至关重要。目前，在利用大肠杆菌表达重组蛋白方面，重组蛋白胞内积累量取决于发酵最终细胞浓度及细胞总蛋白比例。因此，实现工程菌高密度培养，对提高目标产物有着很大的意义。但是在重组大肠杆菌的高密度培养过程...
【技术保护点】
１．利用大肠杆菌累积生产肿瘤转移抑制蛋白ＧＤＩ２的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：将大肠杆菌工程菌经一级种子培养基培养及二级种子培养基培养后，按接种量３ｗｔ％将二级种子培养液接种到发酵罐中进行发酵培养，发酵罐中的培养基采用优化过的ＬＢ培养基，控制发酵温度为３７℃、ｐＨ为７．０，待发酵液中溶氧出现明显上升时开始流加生长阶段补料培养基，菌浓ＯＤ达到１１６时开始流加诱导阶段补料培养基，调节诱导阶段补料培养基流加速率降低比生长速率，最后经异丙基－β－Ｄ－硫代吡喃半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导，获得肿瘤转移抑制蛋白ＧＤＩ２。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙爱友，魏东芝，王学东，徐瑞，董玉国，张星，王丽华，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31
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