一种由苏云金杆菌发酵液制备活性毒素的方法技术

本发明专利技术公开了一种由苏云金杆菌发酵液制备活性毒素的方法。该方法首先将苏云金杆菌发酵液离心去除上清液，沉淀物用水悬浮后加碱处理，或直接用稀碱液调配成悬浮液，直接获取含有活性毒素的悬浮液，然后经过离心、超滤、等电点沉淀、洗涤、冷冻干燥等操作，制备活性毒素干粉末。本发明专利技术的方法简便，成本低，与普通方法相比缩短了提取周期短，且提取量大。同时克服了伴胞晶体与芽胞分离操作中对发酵液固形物含量的限制，可以对大量胞晶混合物进行碱溶，提取量明显提高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种由苏云金杆菌发酵液制备活性毒素的方法，其特征在于按照下列步骤操作：　　（１）将苏云金芽胞杆菌发酵液装入离心管，高速离心去除上清液，得到胞晶混合物沉淀物；　　（２）将步骤１所得的胞晶混合物沉淀物，用去离子水调配成固形物含量的重量与体积比为５％－１５％的悬浮液，在搅拌下水浴升温，在３０－６０℃条件下滴加１ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液，维持溶解体系的ｐＨ在１０－１２之间，碱解４－５　ｈ，得到伴胞晶体的碱溶解液；　或者：　　将步骤１所得的胞晶混合物沉淀物，直接用０．０１－０．０５　ｍｏｌ／Ｌ碳酸钠溶液调配成悬浮液，固形物含量的重量与体积比在５％－１５％之间，在搅拌下升温，在３０－６０℃条件下碱解４－５　ｈ；碱解期间用０．５ｍｏｌ／Ｌ　Ｎａ↓［２］ＣＯ↓［３］溶液调节悬浮液ｐＨ在１０－１２之间；　　（３）将步骤２所得的伴胞晶体的碱溶解液离心去沉淀，收集上清液；　　（４）将步骤３所得的上清液用截留分子量≤６０ｋＤａ的离心过滤装置过滤，滤除小分子物质；　　（５）收集步骤４中被截留的活性毒素，采用等电点法对活性毒素进行沉淀；　　（６）步骤５所得的活性毒素沉淀用去离子水洗涤，离心脱水后冷冻干燥，得浅棕色粉末。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周学永，董庆洁，董建萍，马锦明，
申请(专利权)人：天津理工大学，
类型：发明
国别省市：12