本发明专利技术提供一种大肠杆菌中发现的多肽EDL933和其他肠道出血性大肠杆菌酶切C1-酯酶抑制剂结合。还公开了采用多肽结肠炎或溶血性尿毒综合征的诊断和治疗方法，检测潜在的治疗方法。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供一种大肠杆菌中发现的多肽EDL933和其他肠道出血性大肠杆菌酶切C1-酯酶抑制剂结合。还公开了采用多肽结肠炎或溶血性尿毒综合征的诊断和治疗方法，检测潜在的治疗方法。【专利说明】大肠杆菌酯酶抑制剂结合蛋白
本专利技术涉及医药领域，特别涉及一种大肠杆菌酯酶抑制剂结合蛋白和使用方法。
技术介绍
肠出血性大肠杆菌(EHEC)血清型0157:H7大肠杆菌是人的肠道细菌病原体引起腹泻病，出血性肠炎，溶血性尿毒症综合征(HUS)。在美国，每年估计有20000人患有腹泻病，大肠杆菌0157:H7感染，这通常是签约通过摄入受污染的食物，尤其是煮熟的肉类。约6%的感染者发展溶血尿毒综合症，这可能会导致肾功能衰竭而死亡。年幼的孩子和老人是特别容易发展HUS。 在一般情况下，通常通过给予适当的抗生素治疗细菌感染。然而，大肠杆菌0157:H7感染通常具有非常快速的进展，因此非常难以治疗。常的时候，疾病诊断，受感染的个人病重，由细菌分泌的毒性蛋白可能已受损黏膜细胞进入血液流。抗生素治疗的患者感染了大肠杆菌0157:H7通常是没有成功，现在认为是禁忌的。 大肠杆菌0157:H7细菌非常精通于建立一个感染；尽可能少的10个活菌的摄入是足够的，建立感染。高度感染性的大肠杆菌0157:H7的破坏性后遗症伴有感染这种细菌，再加上广泛的公众关注，出血性肠炎暴发，已经产生了大量的医疗专业人士之间的利益和广大市民显影装置，用于疾病的早期诊断和治疗。期望有关生物体的致病性会被发现的有价值的信息，这可能有助于开发预防感染的方法，或预防或治疗的溶血性尿毒综合征的大肠杆菌0157:H7 EDL933W (ATCC 43895)的全基因组测序个人感染的有机体。大肠杆菌0157:H7的DNA序列与大肠杆菌K12，常用于研究非致病株相比。大肠杆菌0157:H7的基因组中超过大肠杆菌K-12由超过一万个碱基对，并拥有高达1000个基因K-12上找不到。这些额外的基因序列分布在整个超过250网站岛屿，含O到60的基因(I)与每个岛上。 需要更好地理解在大肠杆菌0157:H7和个人感染大肠杆菌0157:H7的溶血性尿毒综合征的预防或治疗方法的发病机制涉及的因素。这在本领域中还需要的是负责肠道疾病的因素，是常见的致病性大肠杆菌的理解。
技术实现思路
本专利技术提供了分离的多肽包括以下氨基酸序列的氨基酸残基230-630的SEQ IDNO:2。 在另一个方面，本专利技术提供了分离的多肽含有的氨基酸序列具有至少70%的氨基酸序列同源性的氨基酸残基24-886的SEQ ID NO:2的多肽，其包含对应的序列与氨基酸相同434-444 SEQ ID NO:2，有能力结合并切割Cl酯酶抑制剂。 在另一个实施例中，本专利技术提供了一种分离的多肽，氨基酸序列，其中包括至少17个连续氨基酸残基的SEQ ID N0:2。 在又一个方面中，本专利技术提供一个基因构建物的多核苷酸编码的多肽含有的氨基酸序列的氨基酸残基24-886的SEQ ID NO:2或与之互补的序列，所述的多核苷酸可操作地连接到表达控制序列。另外，本专利技术是一个电池，其特征在于，包括遗传构建绘制。 在另一个实施例中，本专利技术包括特异性结合发现的抗原决定簇的多肽含有的氨基酸序列包含SEQ ID NO:2，优选Cl酯酶抑制剂结合结构域的多肽的表位的抗体，该抗体。 在另一个方面，本专利技术提供了一种方法，结肠炎或溶血性尿毒症综合征的预防或治疗受试者中的感染肠出血性病原体表达抑制蛋白，它包括基本上同源的氨基酸序列与SEQ ID NO:2，能够抑制蛋白减少Cl酯酶抑制活性的方法包括给受试者施用抗体，该抗体特异性结合的多肽，具有与SEQ ID NO:2的氨基酸序列，或能够结合二价阳离子的螯合剂，抗体的抗原决定簇的发现或螯合剂的量施用有效地减小Cl酯酶抑制剂通过抑制蛋白的蛋白水解失活。 本专利技术的另一个方面，提供了一种方法，包括基本上同源的氨基酸序列与SEQ IDN0:2中，能够抑制蛋白的表达抑制蛋白与肠出血性病原体感染的危险因素结肠炎或预防受试者中的溶血性尿毒症综合征减少Cl酯酶抑制活性的方法包括的主题灭活的多肽，包括至少一个抗原决定簇的用量能有效地诱导免疫应答中的SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的多肽施用。 在另一个方面，本专利技术提供了一种预防或治疗结肠炎和/或表达抑制蛋白，它包括基本上同源的氨基酸序列与SEQ ID NO:2的蛋白质抑制剂的肠出血性病原体感染的受试者中的溶血性尿毒症综合征能够减少Cl酯酶抑制活性的方法，包括的步骤的检体Cl酯酶抑制剂施用有效地减少的量的至少一种选自下组的蛋白水解级联组成的经典补体级联反应，内源性凝血途径的激活，和激肽形成系统。 本专利技术提供的方法的测试分子的能力，以减少Cl酯酶抑制剂通过抑制蛋白含有的氨基酸序列基本上同源的氨基酸残基24至886的SEQ ID NO:2中，能够抑制蛋白的蛋白水解，proteolyzing Cl酯酶抑制剂,其特征在于,包括在适当的条件下,一段时间的时间足以使抑制蛋白-Cl酯酶抑制剂相互作用结合抑制蛋白，试验分子，和Cl酯酶抑制剂和比较电平的Cl酯酶抑制剂或Cl酯酶抑制剂活性缺乏测试分子控制。 【具体实施方式】 菌株的血清型0157:H7 EDL933W携带92 kb的质粒p0157。正如在下面的实施例中，所述的菌株含有质粒的原因两个培养的人CD4.sup的聚合。+ T细胞系，Jurkat和M0LT-4，但不是B细胞淋巴瘤系(Raji细胞)，巨噬细胞样细胞线(U937细胞和HL-60)。聚集的细胞在血清存在下发生，而不是在无血清。缺乏质粒的菌株不会引起聚合。我们采用转座子诱变，以确定a基因在异氢尿酸，以前未知的功能，其与所观察到的聚集效应。的编码序列和推导的氨基酸序列的蛋白质，它编码SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2分别所示的。的蛋白质，指定“STCE”，包含一个推测的裂解N-末端的信号序列，被分泌到培养基中，并是一种蛋白酶酶切Cl酯酶抑制剂，蛋白酶抑制剂，控制激活Cl，第一个组成部分补体级联反应。 如在本
的技术人员将理解的，组成的蛋白质的氨基酸序列，具有轻微的取代，缺失或添加的SEQ ID N0:2。将适合在本专利技术的实践中。保守性氨基酸取代不太可能扰动的蛋白质的二级结构，并干扰其活性。SEQ ID NO:2中包括的N-末端的信号序列，虽然表示，不太可能被发现的一个孤立的多肽。STCE蛋白表达的可能经历翻译后修饰的N-末端的信号肽的裂解的结果。这是可能的，的STCE分离从培养介质，其中STCE阳性菌株生长由氨基酸残基24-886的SEQ ID NO:2。在下面的实施例中所示，它显示STCE基因和启动子的5’区域是减比的3’区域的基因的高度保守的。 它是专门设想的分离的多肽，具有小于全长序列的氨基酸残基24-886 SEQ IDNOL:2将在本专利技术的实践中有用。STCE多肽的N-末端或C-末端区域处被截断，但有一个完整的金属蛋白酶结合结构域相对应的氨基酸残基434-444，SEQ ID NO:2可保留结合的能力和/或解理的Cl酯酶抑制剂。绑定和蛋白水解活性的多肽可以使用这里所阐本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大肠杆菌分离的多肽，其包含SEQ ID NO：2的氨基酸残基230‑630的氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其特征在于，所述多肽包括一个的STCE特定免疫原或具有和切割C1酯酶抑制剂结合的能力。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李峰，
申请(专利权)人：上海满益科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
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