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一种表达HSA-vMIP-Ⅱ融合蛋白的酵母表达体系及其构建方法技术

技术编号:6821535 阅读:332 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种表达HAS-vMIP-Ⅱ融合蛋白的表达体系,由质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ转化至巴斯德毕赤酵母得到。本发明专利技术还公开了该表达体系的构建方法,是从含有质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ的大肠杆菌中提取重组质粒,对重组质粒进行线性化,电转化法转化巴斯德毕赤酵母菌感受态细胞,经抗性筛选后,PCR鉴定得到阳性克隆,利用阳性克隆子进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析,Western-Blot鉴定。本发明专利技术使得vMIP-Ⅱ在不丧失功能的情况下,在血浆中的半衰期得到显著地延长。这样HSA-vMIP-Ⅱ融合蛋白会降低给药频率和剂量,发挥出与vMIP-Ⅱ相似的药效作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程领域,具体涉及一种能够高效表达HSA-vMIP- II融合蛋白的酵母表达体系及其构建方法。
技术介绍
卡波氏肉瘤(Kaposi’ s sarcoma,KS)是一种血管多发性肿瘤,常见于免疫缺陷病的患者。自从AIDS (Acquired Immune Deficiency Syndrome)流行以来,KS己成为非洲地区最常见的肿瘤之一。对KS或可能患有KS的高危人群进行活检,发现了卡波氏肉瘤病 # (Kaposi's sarcoma-associate herpsvirus, KSHV) WSSiIDNA,毒8 (HHV8),表明KSHV参与了 KS的病理发生过程。卡波氏肉瘤病毒是HIV感染者或移植病人用免疫抑制剂后常发生的Kaposi肉瘤的病原体。此病毒共有80余个基因,其K6和K4基因分别编码一个类似于人单核细胞炎性蛋白-Ia (MIP-Ia)的蛋白产物病毒巨噬细胞炎症蛋白I (viral macrophage inflammatory protein-I,vMIP-I)和病毒巨噬细胞炎症蛋白 II (vMIP- II),vMIp- I 由 289 bp的开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达HSA--vMIP-Ⅱ融合蛋白的表达体系,由质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ转化至巴斯德毕赤酵母得到。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙晗笑贾忠伟肖威莫雪梅李秀英张光王峰
申请(专利权)人:暨南大学
类型:发明
国别省市:81

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