一种测定抗SmD1抗体IgG的方法及试剂装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供一种基于酶联免疫检测的原理来实现抗SmD1抗体IgG的免疫检测的方法及其试剂装置，是一种独立的、单人份的、一次性的用于酶联免疫检测抗SmD1抗体IgG的分析方法、试剂装置以及配套试剂。它可以将抗SmD1抗体IgG酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个分析装置上，通过这种方法可以更方便地根据检测项目的使用需要进行相关的免疫学检测，为临床应用提供了更好的依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术申请涉及一种测定抗SmDl抗体IgG的方法及试剂装置，属于生物检测技术 领域。
技术介绍
抗Sm抗体，以病人名字(Smith)命名。抗Sm抗体的靶抗原位于细胞核内一组由 核蛋白与RNA所构成的分子颗粒上。这组蛋白被称为小核糖核蛋白(snRNP)。由于这组小 分子的snRNP中尿嘧啶含量丰富，故snRNP又被称为hnRNP。其中^nRNP在细胞内通过形 成剪切体，参与信使RNA的成熟过程。UsnRNP中能被抗S m抗体识别的蛋白质组分被称为 Sm “共同核心”。抗Sm抗体是目前公认的SLE的血清标记抗体，但在系统性红斑狼疮(SLE)中的 阳性率仅为20% 40%。抗Sm抗体识别的蛋白多肽至少有9种，而蛋白多肽D是最主要 靶抗原。抗原SmD有三种亚型，SmDl、SmD2、SmD3，对SmDl结合力最强。把特异性结合蛋白 多肽SmDl的自身抗体称为抗SmDl抗体。SmDl为SLE高度特异性靶抗原，在SLE患者中抗 SmDl抗体阳性率可达70%，而非SLE的免疫病患者为8. 3%，研究中的健康对照组均为阴 性。SmDl抗体对SLE诊断不仅有高度特异性，而且其敏感性高于抗Sm抗体。抗Sm抗体阴 性SLE患者中可检测到SmDl抗体.而在SmDl抗体阴性SLE患者中未能检测到Sm抗体，因 而该抗体检测对SLE诊断优于Sm抗体检测。其检测方法包括如下几种一、免疫沉淀法免疫沉淀法主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是可溶性抗原与相应抗体 在有电解质存在的情况下，按适当比例所形成的可见沉淀物现象。此法是检测抗Sm抗体和 抗nRNP抗体的金标准(gold standard)，但这种方法技术要求高，要应用放射性同位素，故 没有被广泛采用。且本法只是单一的定性试验，不能定量分析，本底不易清除，对结果有很 大影响。二、免疫双扩散法免疫双扩散法特异性高，操作简单，无需特殊仪器或纯化的抗原，但它的敏感性相 对较低。三、间接免疫荧光法一般使用此方法进行初步抗体的筛查。但是其不足也是明显的(1)在分析结果时无法根据分子量的大小区分非特异性识别。(2)操作相对复杂，需要价格较昂贵的荧光显微镜，在很多基层医院难以推广，也 不太适用于标本量较多的实验室。(3)荧光测定中的本底较高，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。(4)结果判定需要有经验的专业人员，分析结果的客观性不足。四、免疫印迹法一般经过了间接免疫荧光法的筛查后，用免疫印迹法进行确认。其不足之处在于(1)只能进行定性和半定量分析，无法得出被检物质具体的量。(2)操作步骤繁琐，试验用时较长，在基层开展此项检测比较困难。(3)检测的灵敏度和特异性还有待提高。(4)同时，由于提取抗原整个过程复杂，耗时长，仪器设备要求高，且抗原难以长期 保存，也不利于临床推广应用。(5)试验结果不易判断。五、酶联免疫吸附法ELISA具有敏感性高、操作时间短等优势，但与其他生物检测或免疫检测比较，这 种ELISA检测方法、技术、工具或产品仍有较多的不足而使其应用受限，这些不足主要包括 以下几个方面(1)使用12X8型、8X 12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原抑或抗体包被用 品和反应容器，在使用时只能分成12批次、8批次或整板一次使用；(2)定量测定所用的试剂可多达11种，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并 且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类 多，加注试剂的操作也极为繁琐，如果不使用全自动酶免分析仪的话，则全部操作都要用手 工来进行，而全自动酶免分析仪的价格十分昂贵，投入较大；(3)每一检测或每次检测无试剂信息的条形码，只能通过查看试剂盒外包装盒的 标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中 不受控，具有很大的随意性；(4)检测试剂在检测过程中为开放方式，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影 响检测结果；(5)在未采用全自动酶免分析仪进行检测时的检测过程为手工操作，试剂或样品 的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的不准确度和不 精密度高；(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数X96人份，如果需要检 测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10X96人份，如果只有一份样品需要检测10个 不同的项目，也需要配置10X96人份的试剂。
技术实现思路
为了解决抗SmDl抗体IgG分析检测现有方法中存在的不足之处，本专利技术申请提供 一种新的检测方法和试剂装置及配套试剂。该方法基于酶联免疫检测技术，寻求一种更加 简单、准确、有效的一套方法及试剂来进行定量检测以满足临床诊断的需要。本方法基于酶联免疫检测的原理来实现抗SmDl抗体IgG的免疫检测，是一种独立 的、单人份的、一次性的用于酶联免疫检测抗SmDl抗体IgG的分析方法、试剂装置以及配套 试剂，它可以将抗SmDl抗体IgG酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个分析装置上， 通过这种方法可以更方便地根据检测项目的使用需要进行相关的免疫学检测，为临床应用 提供了更好的依据。本专利技术申请提供一种测定抗SmDl抗体IgG的方法，是通过酶联免疫检测的分析试剂装置和配套试剂组成的试剂盒来实现的，这种分析试剂装置包括设有8个孔位的基体和 位于基体一端的手柄，它通过专用特定分析仪器对试剂装置各孔之间的各种特定试剂溶液 进行加注和吸弃，使样品与试剂发生反应，然后测量发生反应后溶液色泽的数值，最终通过 对测量的数值进行处理而获得检测结果。所述的测定抗SmDl抗体IgG的方法，是将待测样品中的待测抗SmDl抗体IgG与 高度纯化的SmDl抗原进行反应而形成第一免疫络合物，该第一免疫络合物与酶标记的第 二抗体进行反应形成第二免疫络合物，将反应形成的第二络合物与显色底物进行显色对比 分析，从而获得待测抗SmDl抗体IgG的含量。所述的测定抗SmDl抗体IgG的方法，其中，所述的第二抗体为辣根过氧化物酶标 记的抗人IgG抗体。本专利技术申请还提供一种测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，设有8个孔位的基体、 位于基体一端的手柄，以及用于酶联免疫法检测抗SmDl抗体IgG的分析试剂装置以及相应 数量的配套试剂校准品、质控物和缓冲洗涤液的组份。所述的测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其中，所述基体一端的手柄上粘贴有检 测试剂条形码的标帖，所述条形码的数值包含每项检测所对应的检测项目代码、检测试剂 生产批号、试剂有效期、定性校正值/定量测定标准曲线参数、酶联免疫反应类型、试剂及 分析装置的序列号的信息。所述的测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置中，所述孔位包括一个反应孔、一个样品 孔、一个稀释孔和五个试剂孔，其中，1)样品孔盛容待测溶液；2)稀释孔用于样品的稀释；3)反应孔为平底并具有很高的光源/光路通透性，当盛装无色/空白试剂溶液时 对可见光/紫外光/荧光的吸光度值趋近于零，孔内包被有检测抗SmDl抗体IgG所需的高 度纯化的SmDl抗原，该孔用于盛容检测样品和检测试剂，并与这些样品和试剂发生酶联免 疫反应，是酶联免疫反应和色泽显示及检测的容器；4)每一个试剂孔盛装有酶联免疫法检测抗SmDl抗体IgG所需的一种试剂，加注试 剂后用密封薄膜将微孔的开放口缘进行封闭。所述的测本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种测定抗ＳｍＤ１抗体ＩｇＧ的方法，其特征在于：所述方法是通过酶联免疫检测的分析试剂装置和配套试剂组成的试剂盒来实现的，这种分析试剂装置包括设有８个孔位的基体和位于基体一端的手柄，它通过专用特定分析仪器对试剂装置各孔之间的各种特定试剂溶液进行加注和吸弃，使样品与试剂发生反应，然后测量发生反应后溶液色泽的数值，最终通过对测量的数值进行处理而获得检测结果。

【技术特征摘要】
1.一种测定抗SmDl抗体IgG的方法，其特征在于所述方法是通过酶联免疫检测的分 析试剂装置和配套试剂组成的试剂盒来实现的，这种分析试剂装置包括设有8个孔位的基 体和位于基体一端的手柄，它通过专用特定分析仪器对试剂装置各孔之间的各种特定试剂 溶液进行加注和吸弃，使样品与试剂发生反应，然后测量发生反应后溶液色泽的数值，最终 通过对测量的数值进行处理而获得检测结果。2.根据权利要求1所述的测定抗SmDl抗体IgG的方法，其特征在于所述的方法是将 待测样品中的待测抗SmDl抗体IgG与高度纯化的SmDl抗原进行反应而形成第一免疫络合 物，该第一免疫络合物与酶标记的第二抗体进行反应形成第二免疫络合物，将反应形成的 第二络合物与显色底物进行显色对比分析，从而获得待测抗SmDl抗体IgG的含量。3.根据权利要求2所述的测定抗SmDl抗体IgG的方法，其特征在于所述的第二抗体 为辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体。4.一种用于测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其特征在于所述的试剂装置设有8个 孔位的基体、位于基体一端的手柄，以及用于酶联免疫法检测抗SmDl抗体IgG的分析试剂 装置以及相应数量的配套试剂校准品、质控物和缓冲洗涤液的组份。5.根据权利要求4所述的用于测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其特征在于所述基 体一端的手柄上粘贴有检测试剂条形码的标帖，所述条形码的数值包含每项检测所对应的 检测项目代码、检测试剂生产批号、试剂有效期、定性校正值/定量测定标准曲线参数、酶 联免疫反应类型、试剂及分析装置的序列号的信息。6.根据权利要求4所述的用于测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其特征在于所述孔 位包括一个反应孔、一个样品孔、一个稀释孔和五个试剂孔，其中，1)样品孔盛容待测溶液；2)稀释孔用于样品的稀释；3)反应孔为平底并具有很高的光源/光路通透性，当盛装无色/空白试剂溶液时对可 见光/紫外光/荧光的吸光度值趋近于零，孔内包被有检测抗SmDl抗体IgG所需的高度纯 化的SmDl抗原，该孔用于盛容检测样品和检测试剂，并与这些样品和试剂发生酶联免疫反 应，是酶联免疫反应和色泽显示及检测的容器；4)每一个试剂孔盛装有酶联免疫法检测抗SmDl抗体IgG所需的一种试剂，加注试剂后 用薄膜将微孔的开放口缘进行封闭。7.根据权利要求6所述的用于测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其特征在于所述试 剂孔内所盛装酶联免疫检测所需的试剂包括检测抗SmDl抗体IgG之酶联免疫反应所需的 免疫反应抑制剂/中和剂/阻断剂/吸附剂、酶结合物溶液、显色底物溶液、显色终止液、反 应增强剂/促进剂、样品稀释溶液。8.根据权利要求6所述的用于测定抗SmDl抗体IgG的试剂装置，其特征在于所述样 品孔、反应孔、稀释孔和试剂孔剖面形状包括平型、V型或U型，抑或是平型、V型和U型之间 的任意组合。9.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：何林，潘荞，肖灿，伍坚，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：94