一种花生分离蛋白提取方法技术

本发明专利技术公开了一种花生分离蛋白提取方法，它包含有以下步骤：将花生蛋白粉溶于碱液，恒温水浴振荡，离心，取上清液1；将沉淀以相同方法二次浸提，离心，得上清液2；将上清液1和2合并，酸沉，离心，取沉淀物醇洗2次，再水洗至中性，冷冻干燥，得花生分离蛋白。利用本方法提取花生分离蛋白质含量高，经济效益和社会效益显著。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及花生食品深加工
，尤其是。
技术介绍
我国是花生生产大国，花生年产量居世界首位。花生在古代被称为“长生果”，经常 食用可养血补血、补脾润肺、滋润肌肤，可预防高血压、动脉硬化和心血管等方面的疾病。花 生中的蛋白质含量达20% 30%，仅次于大豆，花生也是一种重要的油料蛋白资源。在植 物蛋白资源中，花生蛋白居第三位，占蛋白总量的11%，是较理想的食用蛋白资源。花生蛋 白是一种营养价值较高的植物蛋白，它含有人体所需的8种必需氨基酸，而且谷氨酸、天门 冬氨酸含量较高，与动物蛋白相近，且不含胆固醇，可消化性高，其消化系数达90%以上与 应用较广的大豆蛋白相比，花生蛋白不含胀气因子，抗营养因子含量较少。目前国际上花生 蛋白产品根据蛋白质的含量，主要分为花生蛋白粉(纯度<65%)、浓缩蛋白(纯度65% 70% )、分离蛋白(纯度85% 96% )，其中花生蛋白粉又分为全脂、半脱脂和脱脂花生蛋 白粉。花生分离蛋白制备方法主要包括碱提酸沉法、超滤膜法、超声波提取法及水酶法。我 国对花生蛋白产品的开发研究主要集中在花生蛋白粉、花生蛋白饮料、花生蛋白炼乳、花 生蛋白膜、花生多肽以及花生蛋白改性等方面。现有技术分离的花生蛋白纯度低，蛋白得 率低，生产时间长。因此，需寻求一种提取率高及分离蛋白纯度高的分离方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，以提高花生浓缩蛋白的得率。为达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案来实现将花生蛋白粉溶于pH值10的NaOH溶液，料液比1 10 1 12溶解充分，40 50°C水浴振荡，浸提90 150min，离心，取上清液1 ；将沉淀以相同方法二次浸提，离心，得 上清液2 ；将上清液1和2合并，盐酸沉淀，离心，取沉淀物醇洗2次，再水洗至中性，冷冻干 燥，得花生分离蛋白。优选地，本专利技术的分离方法为将花生蛋白粉溶于pH值10的NaOH溶液，料液比(重量体积比)1 12溶解充 分，50°C水浴振荡，浸提131min，离心，取上清液1 ；将沉淀以相同方法二次浸提，离心，得上 清液2 ；将上清液1和2合并，盐酸沉淀，离心，取沉淀物醇洗2次，再水洗至中性，冷冻干燥， 得花生分离蛋白。利用本方法分离的花生蛋白蛋白质提取率和含量高，经凯氏定氮法检测，花生分 离蛋白的纯度为90%以上，提取率达到65%以上，经济效益和社会效益显著。附图说明图1浸提温度对花生分离蛋白制备的影响图2碱液pH值对花生分离蛋白制备的影响图3浸提时间对花生分离蛋白制备的影响图4料液比对花生分离蛋白制备的影响图5双因素的响应面图a.浸提时间和温度对蛋白纯度的影响b.浸提时间和碱液pH对蛋白纯度的影响c.浸提时间和液料比对蛋白纯度的影响d.浸提温度和碱液pH对蛋白纯度的影响e.浸提温度和液料比对蛋白纯度的影响f.碱液pH和液料比对蛋白纯度的影响图6花生分离蛋白的制备工艺流程实验例1、材料与方法1. 1材料与试剂一级脱脂花生蛋白粉山东天申生物蛋白有限公司95%乙醇、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠、硼酸等均为分析纯。甲基红、溴甲酚绿指示剂。1. 2仪器与设备冷冻干燥机北京博医康实验仪器有限公司；SHA-B双功能水浴恒温振荡器金坛市 杰瑞尔电器有限公司；FE20实验室pH计梅特勒-托利多仪器有限公司；DZ-2自动电位滴 定装置；全自动凯氏定氮仪1. 3实验方法1. 3. 1单因素实验设计依次改变花生蛋白粉碱提酸沉淀的温度、碱液pH值、碱提时间和碱提固液比，以 花生蛋白纯度和蛋白得率作为评价指标进行研究和分析，并确定四因素三水平的最佳参数 进行响应面分析。1.3. 2蛋白纯度和蛋白得率的测定蛋白纯度凯氏定氮法蛋白提取率(％)=所得花生分离蛋白中总蛋白质量/花生蛋白粉中总蛋白质 量 X 100%1.3.3原料组分含量的测定蛋白含量的测定GB/T5009，5-2003 ；脂肪含量的测定GB/T5009，6-2003水分含量的测定GB/T5009，3-2003 ；灰分含量的测定GB/T5009，4-20032结果与分析2. 1花生蛋白粉的主要成分表1花生蛋白粉的主要成分粗蛋白(％)脂肪水分灰分47.720.701.285.062. 2单因素实验结果与分析2. 2. 1浸提温度对花生分离蛋白制备的影响用碱液浸提花生蛋白粉的过程中控制体系的pH值为9、浸提时间为90min、固液比 为1 10，设置不同的温度，但是温度不宜过高，以免使蛋白变性，研究浸提温度对花生分 离蛋白制备的影响(图1)。从图中可知，随着温度的升高，蛋白纯度逐渐提高，40°c以上蛋 白纯度趋于不变；蛋白提取率随温度升高，先升高再降低，40°C时蛋白提取率最高。综合考 虑两评价指标确定温度为40、45、50°C继续做响应面分析以确定最佳的浸提温度。2. 2. 2碱液pH值对花生分离蛋白制备的影响碱液浸提花生蛋白粉过程中控制体系的温度为40°C、固液比是1 10、浸提时间 是90min，设置不同pH值的碱液。实验前测得实验用花生蛋白粉溶于水显酸性，蛋白粉溶于 !1值< 10. 5的碱液时，显弱碱性或中性，不会使蛋白变性。碱液pH值对花生分离蛋白制备 的影响结果见图2所示。花生蛋白主要成分是花生球蛋白和伴花生球蛋白，还有10%左右 的清蛋白。全部的球蛋白和清蛋白都可溶于稀碱溶液中，蛋白质溶解度随PH升高而增大， 蛋白质溶出增多。从图中可知，随着碱液PH值增加，蛋白纯度及提取率都呈增加的趋势，其 中pH值=10时蛋白提取率最高，而蛋白含量在pH = 9时趋于稳定。综合考虑两评价指标 的最佳PH值点，选取pH为9、9. 5、10继续做响应面分析以确定最佳的碱液pH值。2. 2. 3浸提时间对花生分离蛋白制备的影响碱液浸提花生蛋白粉过程中控制体系的温度为40°C、固液比是1 10、碱液pH值 =9. 5设置不同的浸提时间，研究浸提时间对花生分离蛋白制备的影响，结果见图3。如图 所示，蛋白纯度随着时间的增加而增加，90min以后增加幅度减缓，而蛋白提取率随时间增 加先提高再下降。这个过程可能是浸提时间延长，蛋白的溶出增加，当一定时间后，蛋白的 溶出达到饱和，则溶出率趋于平衡，若再进一步延长浸提时间，可能因为微生物生长等因素 使蛋白质变性从而使提取率降低。综合评价两指标的最佳浸提时间段，选取90min、120min、 150min继续做响应面分析以确定最佳的浸提时间。2. 2. 4料液比对花生分离蛋白制备的影响碱液浸提花生蛋白粉过程中控制体系的温度为40°C、浸提时间为90min、碱液pH 值=9. 5，设置不同的固液比，研究固液比对花生分离蛋白制备的影响，结果见图4。如图所 示，蛋白纯度随固液比的增加变化不大，而蛋白提取率则随固液比增加而提高。因为单位碱 液只能溶解一定量的蛋白，该单因素实验选用的碱液量不能使花生蛋白充分溶解或者花生 蛋白刚刚完全溶解，所以，在不同的固液比条件下，蛋白纯度趋于平衡。而随碱液量增加，蛋 白的溶解量增加，从而使得蛋白的提取率增加。从图中可以看出，在固液比1 11左右即 为蛋白溶解充分的点，所以选取固液比=1 IOU IlU 12继续做响应面分析以确定 最佳的料液比。2. 3花生分离蛋白提取工艺的优化根据采用Box-Behnk本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花生分离蛋白的制备方法，包括以下步骤：将花生蛋白粉溶于ｐＨ值１０的ＮａＯＨ溶液，料液比１∶１０～１∶１２溶解充分，４０～５０℃水浴振荡，浸提９０～１５０ｍｉｎ，离心，取上清液１；将沉淀以相同方法二次浸提，离心，得上清液２；将上清液１和２合并，盐酸沉淀，离心，取沉淀物醇洗２次，再水洗至中性，冷冻干燥，得花生分离蛋白。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨庆利，高俊安，张会翠，于丽娜，朱凤，张初署，孙杰，毕杰，
申请(专利权)人：山东省花生研究所，
类型：发明
国别省市：95