一种从动物血中提取、分离血红蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种从动物血中提取、分离血红蛋白的方法，其基本步骤为：ａ、取血：宰杀动物放血后，即刻按每升血加入５～２０克的食盐；ｂ、碱溶：４８小时内，每升血中加入０．５～２摩尔的碱、０．１～１．６摩尔的尿素，溶解８～４８小时；ｃ、盐析：将溶液过滤、在滤液中加入醋酸，使滤液ＰＨ值为６～７，盐析、降解３～６小时；ｄ、过滤，取沉淀物，洗涤；ｅ、干燥、粉碎即得血红蛋白。它具有不需对血液进行抗凝处理、不用专用设备、工艺简单、技术要求低，投入少，生产成本低，适于我国广大的中小型屠宰场和农村屠宰场（点）推广使用等优点。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种提取、分离蛋白质的方法，尤其涉及一种从血液中分离、提取血红蛋白的方法。血红蛋白是高等脊椎动物和人类血液中红细胞的主要成分，具有相同的化学结构、物质组成和生理功能，其氨基酸和卟啉铁的含量高，以其作为原料制作的营养食品和药品具有良好的补铁营养价值和防治贫血的独特功效。现有从动物血中提取、分离血红蛋白的方法，要求先对鲜血进行抗凝处理，制成抗凝血液或喷雾干燥血粉才能再进行提取分离，需用专用设备，工艺条件要求高、难度大，适用于科研单位和少数大型现代化屠宰场(厂)采用，大多数中、小型和农村的屠宰场(点)难以做到，无法推广、利用。本专利技术的目的就是提供一种血液不需抗凝处理、不用专用设备、工艺简单、易于推广的从动物血中提取、分离血红蛋白的新方法。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案为，其基本步骤为a、取血宰杀动物放血后，即刻按每升血加入5～20克的食盐；b、碱溶48小时内，每升血中加入0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素，溶解8～48小时；c、盐析将溶液过滤、在滤液中加入醋酸，使滤液PH值为6～7，盐析、降解3～6小时；d、过滤，取沉淀物，洗涤；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。上述b步碱溶中加入的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、二乙氨、二氯醋酸、有机胺、碳酸钠中至少一种。上述的，还可在每升水中加入0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素，再加入可溶解量的d步所得沉淀物，溶解8～48小时，然后进行c步盐析，d步过滤；全过程可进行一至三次，随后再进行e步的干燥、粉碎，制得血红蛋白精品。下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细地描述。实施例一，其基本步骤为a、取血宰杀动物放血后，即刻(数分钟内)按每升血加入5克的食盐；b、碱溶4小时内，每升血中加入0.5摩尔的氢氧化钠、1.6摩尔的尿素，溶解8小时；c、盐析将溶液过滤、在滤液中加入醋酸，使滤液PH值为7，盐析、降解6小时；d、过滤(为加快速度，可采用抽滤)，取沉淀物，洗涤(洗涤的目的是去除血清蛋白等少量水溶性成分)；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。如此制得的血红蛋白已能完全满足制作营养、保健食品的要求，但若要作为药品和其他科研用途，则需制取血红蛋白精品、本例可在每升水中加入0.5摩尔的氢氧化钠、1.6摩尔的尿素，再加入可溶解量的d步所得沉淀物，溶解8小时，然后进行c步盐析，d步过滤；全过程可进行一至三次，(该过程重复次数越多，血红蛋白纯度越高，但收得率越低。)随后再进行e步的干燥、粉碎，制得血红蛋白精品。可溶解量的d步所得沉淀物是指在符合要求浓度的碱液中，在要求的溶解时间内，沉淀物能被溶解的量。本例中符合要求浓度的碱液为每升水0.5摩尔的的氢氧化钠、1.6摩尔的尿素；一般则为每升水0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素。要求的溶解时间，本例为8小时，一般在实施时可为8～48小时。实施例二其基本步骤为a、取血宰杀动物放血后，即刻按每升血加入20克的食盐；b、碱溶48小时内，每升血中加入2摩尔的氢氧化钾、0.1摩尔的尿素，溶解48小时；c、盐析将溶液过滤，在滤液中加入醋酸使滤液PH值为6，盐析、降解3小时；d、过滤，取沉淀物，洗涤；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。本例中若需制取血红蛋白精品，可在每升水中加入2摩尔的氢氧化钾、0.1摩尔的尿素，再加入可溶解量的d步所得沉淀物，溶解48小时，然后进行c步盐析，d步过滤；全过程可进行一至三次，随后再进行e步的干燥、粉碎，制得血红蛋白精品。实施例三其基本步骤为a、取血宰杀动物放血后，即刻按每升血加入10克的食盐；b、碱溶12小时内，每升血中加入1摩尔的二乙氨、0.5摩尔的尿素，溶解12小时；c、盐析将溶液过滤，在滤液中加入醋酸使滤液PH值为6.5，盐析、降解4小时；d、过滤，取沉淀物，洗涤；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。本例中若需制取血红蛋白精品，则可在每升水中加入1摩尔的二乙氨、0.5摩尔的尿素，再加入可溶解量的d步所得沉淀物，溶解12小时，然后进行c步盐析，d步过滤；全过程可进行一至三次，随后再进行e步的干燥、粉碎制得血红蛋白精品。本专利技术在实施中，b步碱溶中加入的碱除可为实施例一、二、三的氢氧化钠、氢氧化钾、二乙氨外，还可是氢氧化钠、氢氧化钾、二乙氨、二氯醋酸、有机胺、碳酸钠中至少一种，只要其碱浓度总量满足要求即可。本专利技术的方法，可广泛用于从猪、牛、羊等各种动物血中分离、提取血红蛋白。本专利技术中，血红蛋白提取与分离的化学原理为加入食盐防止鲜血出现大的凝块，随后以尿素作增溶剂，使血中的碱溶性血红蛋白在碱液中溶解；再利用醋酸形成PH值6-7的缓冲液体系，使血红蛋白在其等电点(PH6-7)下盐析出，从而被分离提取。与现有技术相比，本专利技术具有以下明显优点一、血液不用进行抗凝处理、也无需专用设备，采用普通过滤等设备即可。工艺简单，技术要求低，投入少，生产成本低，适于我国广大的中小型屠宰场和农村屠宰场(点)推广使用，有利于我国量大而分散的动物血资源的充分有效利用，具有很好的社会效益。二、技术先进、合理，血红蛋白收得率高、为2-5％，最高可达10％；提取物纯度高，其血红蛋白含量大于95％；提取物可用于制作各种具有补铁和防治贫血功效的营养食品和药品，用途广泛，市场前景广阔、诱人。权利要求1.，其基本步骤为a、取血宰杀动物放血后，即刻按每升血加入5～20克的食盐；b、碱溶48小时内，每升血中加入0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素，溶解8～48小时；c、盐析将溶液过滤、在滤液中加入醋酸，使滤液PH值为6～7，盐析、降解3～6小时；d、过滤，取沉淀物，洗涤；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述b步碱溶中加入的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、二乙氨、二氯醋酸、有机胺、碳酸钠中至少一种。3.根据权利要求1所述的，其特征在于在每升水中加入0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素，再加入可溶解量的d步所得沉淀物，溶解8～48小时，然后进行c步盐析，d步过滤；全过程可进行一至三次，随后再进行e步的干燥、粉碎，制得血红蛋白精品。全文摘要本专利技术公开了,其基本步骤为:a、取血:宰杀动物放血后,即刻按每升血加入5～20克的食盐；b、碱溶:48小时内,每升血中加入0.5～2摩尔的碱、0.1～1.6摩尔的尿素,溶解8～48小时；c、盐析:将溶液过滤、在滤液中加入醋酸,使滤液PH值为6～7,盐析、降解3～6小时；d、过滤,取沉淀物,洗涤；e、干燥、粉碎即得血红蛋白。它具有不需对血液进行抗凝处理、不用专用设备、工艺简单、技术要求低,投入少,生产成本低,适于我国广大的中小型屠宰场和农村屠宰场(点)推广使用等优点。文档编号C07K1/00GK1422867SQ0112914公开日2003年6月11日 申请日期2001年12月5日 优先权日2001年12月5日专利技术者秦煜生 申请人:秦煜生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从动物血中提取、分离血红蛋白的方法，其基本步骤为：ａ、取血：宰杀动物放血后，即刻按每升血加入５～２０克的食盐；ｂ、碱溶：４８小时内，每升血中加入０．５～２摩尔的碱、０．１～１．６摩尔的尿素，溶解８～４８小时；ｃ、盐析：将溶液 过滤、在滤液中加入醋酸，使滤液ＰＨ值为６～７，盐析、降解３～６小时；ｄ、过滤，取沉淀物，洗涤；ｅ、干燥、粉碎即得血红蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：秦煜生，
申请(专利权)人：秦煜生，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]