大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR引物、探针及检测方法技术

本发明专利技术公开了大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR引物、探针及检测方法，本发明专利技术设计了适用于大洋臀纹粉蚧实时荧光PCR快速检测的引物和寡核苷酸探针，克服了现有形态学鉴定方法检测周期长、需要制作玻片标本和需要丰富经验的缺点，也克服了现有的分子检测方法操作复杂或检测灵敏度不高、特异性不强、重复性不好等缺点；由于本发明专利技术检测快速、特异性强，特别适用于口岸检疫等时效性要求较强的场合使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR引物、探针及检测方法。
技术介绍
大蒋臀级輪喻Planococcus minor (Maskell)是“中华人民共和国进出境植物检疫性有害生物名录”中的有害生物，同时也是欧洲、美洲等许多国家或地区十分关注的检疫性有害生物。该虫在亚洲、非洲、美洲的许多国家或地区广泛分布，已记录寄主植物多达60 余个科共250余种，为害多种水果、林木和观赏植物。主要寄主植物有榴莲、甘橘、葡萄、芒果、香蕉、人心果、西瓜、甜瓜、咖啡、可可、大豆、玉米、马铃薯、观赏花卉植物等。大洋臀纹粉蚧极易随上述寄主植物传入我国，对我国的农业生产构成潜在威胁，因此，需要在口岸检疫部门严格加强检疫工作，防止该虫传入我国。在蚧虫鉴定中，只有成熟、完整的雌成虫才能进行准确的形态鉴定，若口岸截获到若虫，必须花费较长时间将其饲养为成虫；若截获到不完整的死虫，根本无法鉴定其种类。 蚧虫鉴定前，需先将其制作成玻片标本。玻片标本制作的技术性较强，制作人员需经专门培训，才能制作出合格的标本。蚧虫鉴定十分困难，需要经验丰富的蚧虫专家才能准确鉴定其种类。本专利技术弥补了蚧虫形态学本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于检测大洋臀纹粉蚧的实时荧光ＰＣＲ引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如ＳＥＱ　ＮＯ．１和ＳＥＱ　ＮＯ．２所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ NO. 1和SEQ NO. 2所示。2.一种用于检测大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR的MGB探针，其特征在于，所述MGB探针是一段两端分别用不同的染料标记的寡核苷酸，在5’端标记一个报告荧光基团，3’端标记一个淬灭基团和一个MGB基团，所述寡核苷酸的序列如SEQ NO. 3所示。3.根据权利要求2所述的用于检测大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR的MGB探针，其特征在于，所述报告荧光基团为荧光染料FAM，所述淬灭基团为非荧光淬灭基团。4.一种检测大洋臀纹粉蚧的实时荧光PCR方法，其特征在于，包括以下步骤1)先对大洋臀纹粉蚧及其近似种转录间隔区进行序列测定及比较分析，分别找出大洋臀纹粉蚧不同于其它近似种的独有的碱基位点，然后设计用于大洋臀纹粉蚧实时荧光PCR 检测的上游引物、下游引物和MGB探针；2...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦懿，徐浪，余道坚，陈志粦，康林，
申请(专利权)人：深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：94