一种三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法技术

一种三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，包括以下步骤：ａ、１，４－加成反应：将紫杉醇和三尖杉宁碱的混合物溶于短链脂肪醇中，加入有机碱类催化剂，室温搅拌；ｂ、浓缩上述溶解液，柱层析分离，得三尖杉宁碱衍生物和紫杉醇；ｃ、将三尖杉宁碱衍生物溶解，加入酸化活性炭，加热回流；过滤，滤液浓缩后经重结晶得三尖杉宁碱。本发明专利技术的分离纯化方法所用原料价廉易得，反应及处理条件温和，产物收率及纯度高，大大方便了三尖杉宁碱是与紫杉醇的分离，便于实现产业化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种化学分离方法，具体是指两种药用成分的分离方法。技术背景紫杉醇是治疗各种转移肿瘤的有名的化疗药。它已被美国食品与药品管理部门 批准用于治疗卵巢癌和乳腺癌等癌症。紫杉醇是一种天然化合物，最早是在太平洋红豆杉中提取分离出来。目前主要 提取的原料有欧洲红豆杉、西藏红豆杉、云南红豆杉、中国东北红豆杉和中国南方红豆 杉。紫杉醇也可通过植物细胞悬浮培养以及霉菌中得到。在各种原料中，紫杉醇的浓度特别低，例如在短叶红豆杉皮中，其含量在 0.0004-0.08% (重量比)之间。从含量这么低的原料中，提取并且纯化提供临床用的化 合物是很困难的，要推向市场更是不现实。三尖杉宁碱是与紫杉醇共生的一种天然紫杉烷类化合物和紫杉醇在化学结构上 只有酰胺基侧链有所不同。其可以作为化学合成紫杉醇和多西紫杉醇的重要原料，并且 能作为新型紫杉烷类开发的前体。由于三尖杉宁碱和紫杉醇在结构和性质上极其相似，反复多次分离是必需的。分离紫杉醇的和三尖杉宁碱的非层析方法已有报道。例如将三尖杉宁碱的侧链 上双键进行化学改造。例如Kingston等(J.Nat.Prod.55 N0.2，259-2，洸1)报道， 在氧化锇(0s04)存在的条件下，催化氧化三尖杉宁碱侧链双键，得到二醇，然后用层析 和重结晶方法来与紫杉醇分离。这个方法的问题在于，它不能采用未经纯化的紫杉烷类 混合物，因氧化锇的氧化三尖杉宁碱侧链上双键的选择性太低。另外氧化锇有严重的毒 性，不适用于制药工业，当然这个方法能够大大降低萃取和纯化过程的价格。在美国专利(NOs.5334732和5336648 Murray等)中，介绍了用臭氧氧化三尖杉 宁碱侧链的方法。该方法用臭氧氧化粗提物，将会产生许多不希望发生的反应。臭氧分 解反应是很强的、而且无选择性，他能因紫杉醇和三尖杉宁碱中的许多官能团发生不希 望的氧化反应。例如同紫杉醇分子中的酮，醇，胺等反应，或者同紫杉醇及三尖杉宁碱 的紫杉烷环上的双键反应。此外，臭氧发生器设备也很昂贵。在中国专利(96193149.3潘德伊等)中介绍了用卤素加成在三尖杉宁碱侧链上， 再由正相硅胶柱分离的方法。该方法对反应的条件要求比较苛刻，需要在0-5°C左右，避 光。并且溴作为一种低沸点液体卤素并且毒性较大的情况下，对于生产条件有较高的要 求。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有三尖杉宁碱和紫杉醇分离方法的缺陷，提 供了一种简单、经济有效、分离纯度高的处理方法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案一种三尖杉宁碱和紫权利要求1.，其特征在于包括以下步骤a、1，4-加成反应将紫杉醇和三尖杉宁碱的混合物溶于短链脂肪醇中，加入有机 碱类催化剂，室温搅拌；b、浓缩上述溶解液，柱层析分离，得3”-烷氧基三尖杉宁碱衍生物和紫杉醇；C、将3” -烷氧基三尖杉宁碱衍生物溶解，加入酸化活性炭，加热回流；过滤，滤 液浓缩后经重结晶得三尖杉宁碱。2.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤a 中，短链脂肪醇包括甲醇、乙醇、异丙醇。3.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步 骤a中，有机碱类催化剂包括N-甲基吗啉，吡啶，1，8-二氮杂二环-双环(5，4， 0)-7-i^一烯。4.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤a 中，所述三尖杉宁碱与有机碱类催化剂的摩尔比是1 0.075 0.125。5.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤b 中，柱层析的流动相为乙酸乙酯与石油醚体积比从1 1逐步增至2 1。6.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤c 中，所述酸化活性炭指浓硝酸处理过的活性碳。7.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤c 中，所述溶解三尖杉宁碱衍生物的溶剂为甲苯。8.根据权利要求1所述的三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于所述步骤c 中，重结晶溶剂为乙醇和水混合液。全文摘要，包括以下步骤a、1，4-加成反应将紫杉醇和三尖杉宁碱的混合物溶于短链脂肪醇中，加入有机碱类催化剂，室温搅拌；b、浓缩上述溶解液，柱层析分离，得三尖杉宁碱衍生物和紫杉醇；c、将三尖杉宁碱衍生物溶解，加入酸化活性炭，加热回流；过滤，滤液浓缩后经重结晶得三尖杉宁碱。本专利技术的分离纯化方法所用原料价廉易得，反应及处理条件温和，产物收率及纯度高，大大方便了三尖杉宁碱是与紫杉醇的分离，便于实现产业化。文档编号C07D305/14GK102020619SQ20101025865公开日2011年4月20日 申请日期2010年8月20日 优先权日2010年8月20日专利技术者冉秀琼, 徐信保, 李隆, 秦月红, 葛月兰, 蔡强, 黄辉 申请人:江苏红豆杉药业有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三尖杉宁碱和紫杉醇的分离方法，其特征在于：包括以下步骤：ａ、１，４－加成反应：将紫杉醇和三尖杉宁碱的混合物溶于短链脂肪醇中，加入有机碱类催化剂，室温搅拌；ｂ、浓缩上述溶解液，柱层析分离，得３”－烷氧基三尖杉宁碱衍生物和紫杉醇；ｃ、将３”－烷氧基三尖杉宁碱衍生物溶解，加入酸化活性炭，加热回流；过滤，滤液浓缩后经重结晶得三尖杉宁碱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李隆，秦月红，冉秀琼，黄辉，徐信保，葛月兰，蔡强，
申请(专利权)人：江苏红豆杉药业有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]