人溶菌酶散剂、制法及应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，人溶菌酶散剂（撒布剂或撤粉）含有人溶菌酶纯度９５％～９９％，１５００Ｕ～３０万Ｕ／ｍｌ／ｇ。另外还提供其制法及应用。本发明专利技术对基因重组人溶菌酶药物开拓了一个新应用剂型，散剂亦可称为撒布剂或撒粉，与现有治疗痱子的药物相比，采有人溶菌酶为原料不过敏、不产生耐药菌、安全无毒副作用，并且做成散剂药物溶解速度快、吸收快、起效快等特点，并且散剂（撒布剂或撒粉）与喷雾剂、乳剂、乳膏剂、软膏剂相比，散剂（撒布剂或撒粉）在制备治疗痱子、间檫疹的药物中的滑石粉和高岭土能够将汗液吸释干，使皮肤干燥，有利于患处恢复。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，特别是人溶菌酶药物。
技术介绍
抗生素创造了许多医学奇迹，使许多疾病消失无踪，如肺炎、脑膜炎、产褥热、败血症、结核等。21世纪的今天，耐药菌的发展令人触目惊心。如耐青霉素的肺炎链球菌，过去对青霉素、红霉素、磺胺等药品都很敏感，现在几乎“刀枪不入”。从细菌的耐药发展史可以看出，在某种新的抗生素出现以后，就有一批耐药菌株出现。开发一种新的抗生素一般需要10年左右时间，而一代耐药菌的产生只要2年的时间，抗生素的研制速度远远赶不上耐药菌的发展速度。目前急需开发一种针对不同耐药菌株均有效的“超级抗生素”用于临床治疗。痱子也称为栗粒疹、汗疹，是由于在温热环境中汗液分泌多，不易蒸发，汗液使表皮角质层浸渍，致使汗液导管口闭塞，导管内汗液潴留，压力增高而导管破裂，汗液渗入周围组织，引起刺激和炎症，汗口处发生小疱和丘疹。此外，皮肤表面温暖湿潤可促进表皮葡萄球菌繁殖，葡萄球菌可堵塞汗孔或沿汗管感染，形成痱子皮肤病，痱子严重细菌感染形成间檫疹。根据汗腺导管堵塞部位的深浅及疱液内容，临床分为以下几种1、晶形栗粒疹2、红色栗粒疹3、脓疱性栗粒疹4、深部栗粒疹。此病在温暖潮湿地区及夏季多见，多急性发病，好发于手背、颈、躯干、乳房下、腋下及皮肤皱褶处，肥胖、产妇及婴幼儿受害最大。目前治疗痱子、间檫疹多是用上述抗菌素，病症消除慢，容易反复发作。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服上述不足，提供一种重组人溶菌酶散剂，剂型合理，特别是针对皮肤病，效果特别佳。另外还提供散剂的制法及其应用范围。本专利技术为实现上述目的所采用的技术方案是人溶菌酶散剂，含有人溶菌酶活性1500U～300万U/ml/g。所述人溶菌酶为基因工程表达的重组人溶菌酶或者基因工程表达人溶菌酶的氨基端带有(谷氨酸-丙氨酸)2或(谷氨酸-丙氨酸)3修饰的人溶菌酶或者基因工程表达或化学合成突变体重组人溶菌酶。本专利技术人溶菌酶散剂含有下述重量份比原料，纯度95％～99％人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，滑石粉4～780。较好的配方为下述三种配方一由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，香料10～30，薄荷脑10～100，硼酸粉10～50，樟脑1～10，冰片5～30，滑石粉64～780。制备方法是(1)用适量酒精把香料和冰片溶解备用，(2)将薄荷脑、樟脑、硼酸研细，研匀，过100～120目筛备用，将(1)和(2)与滑石粉等各种粉料混合混匀，最后将人溶菌酶加入充分混匀，在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成，即得成品散剂。配方二由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，滑石粉74～780，硼酸粉4～40，桉叶油2～20，香料5～30，薄荷脑10～100，冰片5～30。制备方法是(1)用适量酒精把香料、桉叶油和冰片溶解备用，(2)将薄荷脑、硼酸研细，研匀，过100～120目筛备用，将(1)和(2)与滑石粉等各种粉料混合，充分混匀，最后将人溶菌酶加入充分混匀，在符合GMP要求的制药工厂按制药规程完成制成散剂。配方三由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶制得1500U～30万U/ml/g，麝香草脑6～60，樟脑1～10，吡咯烷酮羧铝10～100，薄荷脑10～100，滑石粉52～550，高岭土15～150，香料3～30，冰片3～30。制备方法是(1)用适量酒精把香料和冰片溶解备用，(2)将薄荷脑、麝香草脑、樟脑、吡咯烷酮羧铝研溶过100～120目筛备用，(3)将滑石粉、高岭土粉碎研匀(滑石粉、高岭土宜于150℃干热灭菌1h后在进行配方)过100～120目筛备用，将(1)、(2)和(3)等各种粉料混合，充分混匀，最后将人溶菌酶加入充分混匀，在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成，即得成品散剂。所述人溶菌酶散剂在治疗痱子、间檫疹的皮肤病中的应用。所述人溶菌酶散剂在治疗由汗液导管口闭塞、导管内汗液潴留、葡萄球菌堵塞汗孔或沿汗管感染引起的炎症形成痱子、间檫疹皮肤病中的应用。本专利技术对基因重组人溶菌酶药物开拓了一个新应用剂型，散剂亦可称为撒布剂或撒粉，与现有治疗痱子的药物相比，采有人溶菌酶为原料具有显著的优点人溶菌酶是一种小分子蛋白质，存在于机体的泪液、痰、鼻涕、白细胞和血清中，对多种革兰氏阳性菌和少数革兰氏阴性菌有杀菌作用，基因重组人溶菌酶(Human Lysozyme)主要切断肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1、4糖苷键之间的联结，破坏肽聚糖支架，引起细菌裂解。基因重组人溶菌酶不过敏、不产生耐药菌、安全无毒副作用，有很好的药用前景。基因重组人溶菌酶来源丰富，制备工艺简单，并且做成散剂(撒布剂或撒粉)，散剂在药物应用领域有药物粒子细，比表面积大，直接作用于患处，药物溶解速度快、吸收快、起效快等特点，并且散剂(撒布剂或撒粉)与喷雾剂、乳剂、乳膏剂、软膏剂相比，散剂(撒布剂或撒粉)在制备治疗痱子、间檫疹的药物中的滑石粉和高岭土能够将汗液吸释干，使皮肤干燥，有利于患处恢复。综上本专利技术不仅使用方便，治疗效果显著、不过敏、不产生耐药菌、安全无副作用。为了更好地理解本专利技术的实质和效果，下面将用基因重组人溶菌酶的药效试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。基因重组人溶菌酶以配制200毫升培养基为基准，用H3PO44-8毫升、MgSO41-5克，K2SO42-6克，KOH1-3克，CaSO42H2O1-3.5克，加蒸馏水至200毫升，高压灭菌后接种甘油管种子，摇床转数为每分钟250转，培养温度为20-35℃，在恒温床上培养36-48小时。进行种子罐培养后进行生产罐培养。将发酵表达完成的培养液进行提取纯化，对提取纯化的蛋白浓缩液冰冻干燥，测定蛋白量、纯度和重组人溶菌酶活性(30000U/mg)保存备用。一、对动物的模型实验A、基因重组人溶菌酶(HLZ)体外抗菌作用评价受试药品及试剂；1、基因重组人溶菌酶浓缩液(Human Lysozyme HLZ)活性单位30000单位/mL，由大连奇龙生物技术研究所提供，2、对照溶菌酶(contral Lysozyme，CLZ)白色粉未，活性单位50000单位/mg，美国SIGMA公司产品，批号L6876。3、克拉霉素效价948μ/mg，中国药品生物制品检定所标准品，批号4、罗红霉素效价878μ/mg，中国药品生物制品检定所标准品，批号5、注射用阿莫西林哈尔滨制药厂产品，批号030504。6、琼脂糖(B10WEST AGAROSE)7、三羟甲基氨基甲烷(Tris)成都化学试验厂，批号030211试验菌株所用菌株均为2003.2～2004.3月于四川、北京地区收集的临床分离致病菌。经本室用API方法重新鉴定后用于试验。质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923大肠埃希菌ATCC25922铜绿假单孢菌ATCC27853培养基1、Tris-HCl缓冲液0.1M Tris 100ml，0.1M HCl 70ml，HighWater 800ml，测PH值，用HCl溶液调至PH7.2，加High Water至1000ml。2、Tris-HCl脂琼养基在Tris-Cl缓冲液中加入脂琼糖116℃无菌后使本文档来自技高网...

【技术保护点】
人溶菌酶散剂，其特征是：含有人溶菌酶活性１５００Ｕ～３００万Ｕ／ｍｌ／ｇ。

【技术特征摘要】
1.人溶菌酶散剂，其特征是含有人溶菌酶活性1500U～300万U/ml/g。2.根据权利要求1所述的人溶菌酶散剂，其特征是人溶菌酶为基因工程表达的重组人溶菌酶或者基因工程表达人溶菌酶的氨基端带有(谷氨酸-丙氨酸)2或(谷氨酸-丙氨酸)3修饰的人溶菌酶或者基因工程表达或化学合成突变体重组人溶菌酶。3.根据权利要求1所述的人溶菌酶散剂，其特征是含有下述重量份比原料，纯度95％～99％人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，滑石粉4～780。4.根据权利要求3所述的人溶菌酶散剂，其特征是由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，香料10～30，薄荷脑10～100，硼酸粉10～50，樟脑1～10，冰片5～30，滑石粉64～780。5.根据权利要求3所述的人溶菌酶散剂，其特征是由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶1500U～30万U/ml/g，滑石粉74～780，硼酸粉4～40，桉叶油2～20，香料5～30，薄荷脑10～100，冰片5～30。6.根据权利要求3所述的人溶菌酶散剂，其特征是由下述各原料按所述重量份比配制而成纯度95％～99％的基因重组人溶菌酶制得1500U～30万U/ml/g，麝...

【专利技术属性】
技术研发人员：张华，
申请(专利权)人：张华，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]