人溶菌酶药物、制法及应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，人溶菌酶药物，剂型为吸入气（粉、液）雾剂，含有活性１５００－３００万Ｕ／ｍｌ人溶菌酶。本发明专利技术对人溶菌酶药物开发研究了新的剂型，与其他剂型药物相比具有更突出的特点：吸入气雾剂的使用不受环境影响，设备技术简单，使用方便快捷。肺部给药通常被认为具有释药速度快，作用迅速等特点。压缩雾化吸入机的气体雾化颗粒直径在１～５微米是固定的，雾化颗粒直径１～３微米之间的点７０％，所以７０％的药物能够达到下呼吸道和肺部，能够达到理想的临床治疗效果。本发明专利技术剂型的合理选用，拓宽了人溶菌酶的应用领域，增强了用治疗效果，安全无毒副作用；制备工艺简单，以气雾的形式直接吸入给药，使用更方便、疗效显著。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，特别是人溶菌酶新剂型药物，另外还涉及制药领域，及药物的应用。
技术介绍
抗生素创造了许多医学奇迹，使许多疾病消失无踪，如肺炎、脑膜炎、产褥热、败血症、结核等。21世纪的今天，耐药菌的发展令人触目惊心。所谓耐药菌就是细菌对药物产生抗性，是细菌多次与药物接触后，对药物的敏感性减小甚至消失，致使药物对细菌的敏感性降低甚至无效。其中耐药菌包括金黄色葡萄球菌MRSA、表皮葡萄球菌MRSE、肺炎链球菌、溶血性链球菌、肠球菌属、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、丙酸杆菌、不动杆菌、枸橼酸杆菌、沙雷氏菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单孢菌、白色念珠菌等。主要是对下列药品产生耐药性克拉霉素、罗红霉素、阿莫西林、万古霉素、德可霉素、广谱青霉素、甲氧西啉类、头孢类、青霉素钠、青霉素钾、磺胺类。具体的耐药标准是(抑菌圈直径mm)从细菌地耐药发展史可以看出，在某种新的抗生素出现以后，就有一批耐药菌株出现。开发一种新的抗生素一般需要10年左右的时间，而一代耐药菌的产生只要2年的时间，抗生素的研制速度远远赶不上耐药菌的发展速度。目前急需开发一种针对不同耐药菌株均有效的“超级抗生素”用于临床治疗。重组人溶菌酶是一种有效的抗菌剂，全称为1，4-β-N-溶菌酶或者称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶。它能切断细菌细胞壁的肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键的联结，破坏肽聚糖支架，细菌在内部渗透压的作用下细胞胀裂开，引起细菌裂解。入和动物细胞无细胞壁结构亦无肽聚糖，故溶菌酶对人体细胞无毒性作用。重组人溶菌酶除可以直接裂解细菌外，还有抗病毒、抗肿瘤、抗炎和免疫调节作用。中国专利03110824.5已记载基因重组入溶菌酶制药对抗耐药菌有明显疗效，对抗病毒有明显疗效，但其剂型一般为现有的普通剂型，但是剂型对于药物的吸收、作用效果的影响也是很重要的因素，如何选取并实现针对某些疾病最佳的剂型，对于用药途径和药物的吸收可以进一步提高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述不足问题，提供一种人溶菌酶药物，剂型合理，吸收快、作用效果显著，使用方便是。另外还提供其制法，简单易操作，最后还提供其在医药方面的应用，在疾病预防及治疗方面的应用。本专利技术为实现上述目的所采用的技术方案是人溶菌酶药物，剂型为吸入气(粉、液)雾剂。所述药物含有活性1500-300万U/ml人溶菌酶。所述药物由下述各重量份组分组成，活性15000u～30万U/ml重组人溶菌酶溶液，司盘85 0.28g，油酸乙酸0.28g，134A 10g，磷酸盐缓冲液10～20mM(pH6.5～7.5)80％、5～25％丙二醇。所述人溶菌酶为基因工程表达的重组人溶菌酶、基因工程表达人溶菌酶的氨基端带有(谷氨酸-丙氨酸)2或(谷氨酸-丙氨酸)3修饰的重组人溶菌酶或基因工程表达或化学合成突变体重组人溶菌酶。制备工艺如下所述将重组人溶菌酶纯度95％～99％活性30000U/mg冻干粉制成15000u～300000u/粒气雾胶囊剂，胶囊吸入气(粉)雾泵，在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成。将制备好的纯度95％～99％活性30000U/mL/mg基因重组人溶菌酶配制成15000u～300000u/mL/支吸入气(液)雾剂，在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成。吸入气(粉、液)雾剂应在避菌环境下配置，各种用具、容器等须用适应的方法清洁、灭菌，在整个操作过程中应注意防止微生物的污染。(在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成)制备工艺流程如下容器与阀门系统的处理和装配→药物的配制和分装→填充抛射剂→质量检查→成品(在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成)。一、容器的处理在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成洗净、灭菌、烘干气雾剂罐备用。采用气雾剂泵，用三氯甲烷熏蒸灭菌备用。二、药物的配制和分装取重组人溶菌酶纯度95％以上、活性15000u～300万U/ml重组人溶菌酶溶液，司盘85 0.28g，油酸乙酸0.28g，134A 10g，磷酸盐缓冲液10～20mM(pH6.5～7.5)80％、5～25％丙二醇、在常温下混合均质，(在符合GMP要求的制药工厂，按制药规程完成)配制成15000u～300万U/ml重组人溶菌酶吸入气(粉、液)雾剂成品。按分散体系配置后，分别经过质量检查，定量分装在已准备好的容器内，安装阀门，扎紧封帽。三、抛射剂的填充抛射剂的充填方法分为压罐法，将已分装药物的容器装上阀门，扎紧封帽，先抽去容器内的空气，以免影响容器内的压力，然后通过压力灌装机将定量的抛射剂压灌入内。进入成品检定。本专利技术所述人溶菌酶药物在预防或治疗由病毒、细菌、耐药菌、化学气体氯气引起的疾病中的应用。所述人溶菌酶药物在预防或治疗由病毒、细菌、耐药菌、化学气体氯气引起的肺炎、气管炎、咽喉炎或扁桃体炎中的应用。所述人溶菌酶药物在治疗由病毒(RNA、DNA病毒)或非典型肺炎(SAES)引起的气管炎、肺炎及肺脓肿中的应用。本专利技术对人溶菌酶药物开发研究了新的剂型，与其他剂型药物相比具有更突出的持点1、肺部具有较大的吸收表面积和较薄的吸收层。肺部的肺泡表面积之和药为100m2，而且肺泡上皮很薄，布满毛细血管，这不仅可以使小分子气体快速交换，而且可以吸收很多大分子药物。2、肺部的代谢酶活性较低，没有各种消化酶的存在和干扰，使得多肽和蛋白质类药物可以稳定存在，药物吸收后不先经过肝脏，降低首过效应。3、肺部环境比较稳定，药物停留时间较长，吸收很慢的药物也可以有很好的生物利用度。4、吸入气雾剂的使用不受环境影响，设备技术简单，使用方便快捷。肺部给药通常被认为具有释药速度快，作用迅速等特点。压缩雾化吸入机的气体雾化颗粒直径在1～5微米是固定的，雾化颗粒直径1～3微米之间的点70％，所以70％的药物能够达到下呼吸道和肺部，能够达到理想的临床治疗效果。本专利技术剂型的合理选用，拓宽了人溶菌酶的应用领域，增强了用治疗效果，安全无毒副作用；制备工艺简单，以气雾的形式直接吸入给药，使用更方便、疗效显著。为了更好地理解本专利技术的实质，下面将用重组人溶菌酶吸入气(粉、液)雾剂的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。基因重组人溶菌酶以配制200毫升培养基为基准，用H3PO44-8毫升、MgSO41-5克，K2SO42-6克，KOH1-3克，CaSO42H2O1-3.5克，加蒸馏水至200毫升，高压灭菌后接种甘油管种子，摇床转数为每分钟250转，培养温度为20-35℃，在恒温床上培养36-48小时。进行种子罐培养后进行生产罐培养。将发酵表达完成的培养液进行提取纯化，对提取纯化的蛋白浓缩液冰冻干燥，测定蛋白量、纯度和溶菌酶活性保存。将合格的基因重组人溶菌酶制成粉或溶液制得吸入气(粉、液)雾剂1500U～30000U/ml备用。一对小鼠的模型试验A、雾化吸入基因重组人溶菌酶(Human Lysozyme，HLZ)对金黄色葡萄球菌MRSA BAA-42感染小鼠所致支气管肺炎的治疗作用药物和对照药受试药基因重组人溶菌酶(Human Lysozyme，HLZ)活性单位30000u/mg，批号020110，由大连奇龙生物技术研究所提供，实验前用PBS配成所需浓度。对照药克拉霉素效价948U/mg，中国药品生物制品检定所标准品。实验菌株2本文档来自技高网...

【技术保护点】
人溶菌酶药物，其特征是：剂型为吸入气（粉、液）雾剂。

【技术特征摘要】
CN 2004-6-10 20041002073801、人溶菌酶药物，其特征是剂型为吸入气(粉、液)雾剂。2、根据权利要求1所述的人溶菌药物酶，其特征是含有活性1500-300万U/ml人溶菌酶。3、根据权利要求1所述的人溶菌酶药物，其特征是由下述各重量份组分组成，活性15000u～30万U/ml重组人溶菌酶溶液，司盘85 0.28g，油酸乙酸0.28g，134A 10g，磷酸盐缓冲液10～20mM(pH6.5～7.5)80％、5～25％丙二醇。4、根据权利要求1所述的人溶菌酶药物，其特征是人溶菌酶为基因工程表达的重组人溶菌酶、基因工程表达人溶菌酶的氨基端带有(谷氨酸-丙氨酸)2或(谷氨酸-丙氨酸)3修饰的重组人溶菌酶或基因工程表达或化学合成突变体重组人溶菌酶。5、根据权利要求1-4任一所述人溶菌酶药物在预防或治疗由病毒、...

【专利技术属性】
技术研发人员：安米，
申请(专利权)人：安米，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]