一种喜树碱衍生物的乳剂及其制备方法技术

一种喜树碱衍生物的乳剂，其特征是：包括１０－甲基－９硝基喜树碱、注射用油、乳化剂、助乳化剂、增溶剂、等渗剂甘油和维生素Ｅ抗氧剂，按重量计，含有０．０１％～０．１％１０－甲基－９硝基喜树碱、５％～２０％注射用油、１～４％乳化剂、１～４％助乳化剂、０％～６０％增溶剂、２～３％等渗剂甘油，其余为注射用水，各组分的百分含量之和为１００％。

【技术实现步骤摘要】
一种喜树碱衍生物的乳剂及其制备方法一种喜树碱衍生物的乳剂及其制备方法
专利技术属药物制剂领域，涉及一种新型抗癌化合物(10-甲基-9硝基喜树碱, 英文简称为MONCPT)的乳剂及其制备方法。 技术背景世界上每年有600多万人死于恶性肿瘤，我国每年约有170万人死于 癌症，且发病率呈逐年上升趋势。世界各国每年都投入相当的人力和物力进 行抗肿瘤药物的研究。随着对肿瘤机制研究的不断深入，新的抗肿瘤药物作用 靶标亦不断出现，其中对于DNA拓扑异构酶I (TOPI)抑制剂的研究发展异 常迅速。DNA拓扑异构酶I位于细胞核基质内，是一种含765个氨基酸，分子 量为100KD的单体酶蛋白，定位于20号染色体。TOPI通过切断双链DNA中 的一股，并以打开缺口/重新封口的机理在不断改变DNA—级结构的情况下松 弛DNA超螺旋结构，从而在DNA的复制，转录、重组甚至修复中发挥着重 要作用，是细胞实现其正常生理功能不可缺少的一种酶。TOPI在细胞周期中 无明显变化，但在S期细胞中活性增高，且在某些肿瘤细胞中含量高于正常组 织，因此以其为作用靶标可选择抑制增殖期的DNA复制，集中杀死肿瘤细胞， 具有较好的选择性。以拓扑异构酶I为靶点发展新型抗肿瘤药物一直是国际上 抗肿瘤药物研究的热点之一，其中进入临床应用的拓扑异构酶I抑制剂主要是 喜树碱类化合物。喜树碱类药物自1994年上市第一个品种以来，由于其疗效 确切，作用靶独特，已成为临床上使用最多的五大类抗肿瘤药物之一。喜树碱 是由Wall等在1966年首次从中国特有的喜树中分离到的生物碱，因其独特的 化学结构和显著的抗肿瘤活性，引起全世界相关人员的的重^(U七十年代，喜 树碱以其开环结构水溶性钠盐的形式进入临床研究，结果出现严重的骨髓抑 制、呕吐、腹泻和严重出血等副作用，而且开环形式活性大大降低，使临床研 究难以继续。1985年，John Hopkins大学的Hsiang等的研究结果表明，喜树 碱是DNA拓扑异构酶I的特异性抑制剂，而拓扑异构酶I是细胞的一种核酶， 与DNA的复制、转录、修复以及重组有关，其在细胞周期的任何阶段都有表 达，且己知肿瘤细胞中拓扑异构酶I的含量比正常细胞中的含量高，因而这类 抗肿瘤化合物具有一定的选择性。这一重大发现使喜树碱重新成为抗肿瘤药物研究的热点。伊立替康(Irinotecan， CPT-ll， l)于1994年在美国上市，用于治 疗结直肠癌。1996年拓扑替康(Topotecan， 2)又获准上市，用于卵巢癌的治疗。 羟基喜树碱在我国上市，主治结肠癌、胃癌、肝癌和胰腺癌等消化系统肿瘤。 MONCPT作为一个新型的喜树碱衍生物，其在裸鼠体内进行的抗人前列 腺癌和非小细胞肺癌活性研究中，显示出了强大的在体抗肿瘤活性，而且其小 鼠肌内注射的LD50为650 mg/kg，治疗指数大于50，免疫抑制作用较弱，与 临床现有的喜树碱类衍生物比较具有明显的优势。因此，CPT924作为抗肿瘤 新药具有良好的开发具有良好的前景。但是前期研究表明该药不稳定，遇光易 降解，而且在水中的溶解度极差，前期动物体内实验均以其油混悬剂肌肉注射 给药，因此，如何将其制成适合临床用药的剂型，对于肿瘤的临床防治，以及 今后喜树碱类药物的研究开发，都具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供10-甲基-9硝基喜树碱(MONCPT)乳剂的组成，包 括10-甲基-9硝基喜树碱、注射用油、乳化剂、助乳化剂、增溶剂、等渗剂甘 油、抗氧剂为维生素E，按重量计，含有0.01%~0.1%10-甲基-9硝基喜树碱、 5%~20%注射用油、1~4%乳化剂、1 4%助乳化剂、0%~60%增溶剂、2~3%等 渗剂甘油、维生素E抗氧剂，其余为注射用水，各组分的百分含量之和为100%。所述乳化剂选用磷脂、普朗尼克、吐温、水溶性维生素E (TPGS)、聚乙 二醇660-12-羟基硬脂酸酯(SolutolHS 15)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor ELP)中的一种或几种混合物。注射用油选用大豆油、中链油(MCT)、辛酸癸酸三甘酯(Migyk)1812) 中的一种或几种混合物。MONCPT乳剂中的助乳化剂选用乙醇或其他短链醇。MONCPT乳剂中的增溶剂选用聚乙二醇(PEG)或甘油縮甲醛。 本专利技术的另一个目的是提供10-甲基-9硝基喜树碱(MONCPT)乳剂的制 备方法，通过以下步骤实现将乳化剂和助表面活性剂溶于注射用油，加热至40 8(TC，加入增溶剂和 药物并使之溶解，加入等渗剂和注射用水，通过高速均质或超声制成初乳，进 一步通过高压乳匀或微射流制成乳剂。也可以通过以下步骤实现取表面活性剂、助表面活性剂和注射用油溶于适量有机溶剂(氯仿，甲醇 等)中，加入药物使溶解，40'C旋转蒸发，挥去有机溶剂后，加入水相(含注射用水、等渗调节剂、增溶剂、抗氧剂)，超声制成初乳，进一步通过高压乳 匀或微射流制成乳剂。本专利技术的有益之处是本专利技术提供的乳剂的组成及其制备方法，不需将药 物开环制成内酯的形式，而直接以其原型药物的形式制成乳剂并用以静脉给 药，解决了该类药物难溶于水的问题，同时制备的乳剂具有缓释和提高药物稳 定性的作用，其体内抑瘤和体外细胞毒实验均显示出了良好的抗癌作用。本专利技术中的乳剂所含MONCPT量较MONCPT水溶液提高约200倍，在 对小鼠S180肉瘤的治疗作用中，MONCPT乳剂的药效较其注射液提高约四倍, 而在体外对A549细胞的抑制实验中，MONCPT乳剂的IC50较其注射液降低 约30倍。本工艺制备的乳剂外观为乳白色或有蓝色乳光的均一体系，粒径均 匀，药物含量较高。同时与其它制备方法相比，采用微射流工艺制备乳剂，药 物的损失较少，乳剂具有较好的稳定性能。附图说明图l为MONCPT在不同pH条件下的水解动力学研究。图2为MONCPT在注射液、蒸馏水溶液和乳剂中的释放度考察。图3为药物对A549癌细胞的抑制作用。具体实施例本专利技术结合附图和实施例作进一步的说明。 实施例1取卵磷脂0.27g、 CremophorEL0,5g和乙醇0.4g溶于1.6g大豆油中，加入 8.6g聚乙二醇400、 9g甘油縮甲醛和15mgMONCPT，加热至70。C使充分溶 解，再加入0.66g甘油和12g水，高速均质乳化成初乳，进一步通过微射流技 术制成微乳。1粒径通过马尔文粒度测定仪测得乳剂粒径有80M在50 85nm范围内。2 pH:通过pH测定仪测得乳剂pH为5.7。MONCPT在不同溶剂中的溶解度测定取MONCPT 10mg于10ml容量瓶中，不同种类的溶剂定容至刻度，25°C 恒温震荡72h后，取出，离心(转速为10000转/分钟，离心10分钟)，取上清液，分析药物含量。结果参见表l。表1M0NCPT在不同溶剂中的溶解度(单位ug/mL)溶剂种类蒸馏水缓冲液(pH-7.4)正辛醇甲醇辛酸癸酸甘油酯大豆油溶解度2.612.9519.4669.4713.7117.47实施例2取大豆磷脂0.6g、吐温-80 0.6g，普洛沙姆188 0.6g溶于8g大豆油和4g 中链油中，加入6mgMONCPT，加热至70。C使充分溶解，再加入3g甘油和 45g水，高速均质乳化成初乳，进一步通过微射流技术制成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种喜树碱衍生物的乳剂，其特征是：包括１０－甲基－９硝基喜树碱、注射用油、乳化剂、助乳化剂、增溶剂、等渗剂甘油和维生素Ｅ抗氧剂，按重量计，含有０．０１％～０．１％１０－甲基－９硝基喜树碱、５％～２０％注射用油、１～４％乳化剂、１～４％助乳化剂、０％～６０％增溶剂、２～３％等渗剂甘油，其余为注射用水，各组分的百分含量之和为１００％。

【技术特征摘要】
1.一种喜树碱衍生物的乳剂，其特征是包括10-甲基-9硝基喜树碱、注射用油、乳化剂、助乳化剂、增溶剂、等渗剂甘油和维生素E抗氧剂，按重量计，含有0.01％～0.1％10-甲基-9硝基喜树碱、5％～20％注射用油、1～4％乳化剂、1～4％助乳化剂、0％～60％增溶剂、2～3％等渗剂甘油，其余为注射用水，各组分的百分含量之和为100％。2. 根据权利要求1所述的一种喜树碱衍生物的乳剂，其特征是所述乳化剂选用磷脂，普朗尼克，吐温，水溶性维生素E，聚乙二醇660-12-羟基硬脂 酸酯，聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种或几种混合物。3. 根据权利要求1所述的一种喜树碱衍生物的乳剂，其特征是所述注 射用油选用大豆油、中链油、辛酸癸酸三甘酯中的一种或几种混合物。4. 根据权利要求1所述的一种喜树碱衍生物的乳剂，...

【专利技术属性】
技术研发人员：高建青，杨波，韩旻，何俏军，杨小春，赵青青，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86