一种新型果胶纳米药物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新型果胶纳米药物的制备方法，它是由果胶（PET）羟基与载药的八臂聚乙二醇的羧基的酯化作用自组装形成的纳米粒子。八臂聚乙二醇负载药物，制备载药的纳米粒子，并在自组装过程中包裹10‑羟基喜树碱（HCPT）。本发明专利技术的果胶‑多臂聚乙二醇自组装制备纳米药物的载药量可调，八臂聚乙二醇可负载多种水溶性的或疏水型药物，靶向性，稳定性好，生物降解性好，毒性低，具有缓释功能的纳米药物。本发明专利技术属于生物制药和纳米技术领域，制备技术具备工艺简单，周期短的特点。

Preparation method of novel pectin nano medicine

The invention discloses a preparation method of a new kind of pectin nano medicine, which is a nano particle formed by esterification of pectin (PET) hydroxy groups and carboxyl groups of eight arm polyethylene glycol containing medicine. The eight arm peg supported drug, preparation of drug loaded nanoparticles, and the self-assembly process package 10 Hydroxycamptothecin (HCPT). Peg multi arm of the invention of pectin prepared by the self-assembly of nano drug loading can be adjusted, the eight arm peg can load more water-soluble or hydrophobic drug targeting, good stability, good biodegradability, low toxicity, nano drug with slow-release function. The invention belongs to the field of biological pharmacy and nanometer technology, and the preparation technique has the characteristics of simple process and short cycle.

【技术实现步骤摘要】
一种新型果胶纳米药物的制备方法
本专利技术属于生物制药和纳米
，涉及药物递送系统，具体涉及一种新型果胶纳米药物的制备方法。
技术介绍
果胶（Pectin）是存在于植物细胞壁中的多糖类大分子物质，它与聚乙二醇同为食品级高分子营养物质，疏水药物用高分子八臂聚乙二醇和果胶纳米载体共同包载，递送到靶细胞，可以达到缓慢释放药物的目的，自组装过程包裹另一种药物，达到互相促进的作用，可以实现两种药物的协同作用，从而增加疗效。双氢青蒿素（DHA）是一种非生物碱倍半萜内脂，存在与从植物黄花蒿茎叶中，其作用方式是通过其内过氧化物（双氧）桥，经血红蛋白分解后产生的游离铁所介导，产生不稳定的有机自由基及/或其他亲电子的中介物，与体内蛋白质形成共价加合物，具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、抗突变、保肝、调节机体免疫等多种生物活性。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种新型果胶纳米药物的制备方法，果胶与载药多臂聚乙二醇在水介质中可自组装形成纳米粒子，解决DHA的水溶相差，生物利用度低等问题，使用果胶和八臂聚乙二醇为药物载体，靶向性好，载药量高，避免药物的不完全释放和突释情况对患者带来的毒副作用。一种新型果胶纳米药物的制备方法的技术方案如下：一种新型果胶纳米药物的制备方法，其特征在于，载有双氢青蒿素（DHA)的八臂聚乙二醇（8ARM-PEG-COOH）与果胶（PET）通过酯键相连。所述的一种新型果胶纳米药物的制备方法，其纳米粒子中DHA的载药量为1%-40%，纳米粒子半径10-200nm。本专利技术所述的一种新型果胶纳米药物的制备方法，包括以下步骤：（1）用20ml四氢呋喃溶解1.0g的八臂聚乙二醇，加入1.0g激活剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC），0.12g催化剂4-二甲氨基吡啶（DMAP），搅拌，再加入0.1～10mol双氢青蒿素反应40～48h，反应物混合物旋蒸，透析过夜，透析液冷冻干燥，得到粉末A；（2）取0.2g步骤（1）中的粉末A溶于DMSO，加入0.2gEDC和0.02gDMAP，反应30min，然后加入一定量的果胶，反应30～50h，得到反应混合液；（3）将步骤（2）中得到的反应混合液加入乙醚，得到絮状沉淀，离心洗涤多次，真空干燥，得到果胶-载药八臂聚乙二醇粉末B；（4）取20mg步骤（3）中粉末B和5mg10-羟基喜树碱溶于5ml二甲基亚砜，溶解5min，然后逐滴滴入去离子水中，所得溶液透析过夜，冷冻干燥，得到所述果胶-多臂聚乙二醇纳米粒子。优选地，步骤（1）步骤（2）所述的八臂聚乙二醇与双氢青蒿素的摩尔比为1:0.5～1:10；优选地，步骤（2）所述的果胶与载药八臂聚乙二醇的摩尔比为0.1:0.01～0.1:1；优选地，步骤（2）所述的果胶-多臂聚乙二醇自组装纳米粒子粒径10-200nm；优选地，步骤（2）所述的果胶-多臂聚乙二醇自组装纳米粒子的质量百分比0.01%-90%；优选地，（1）-（4）所述的一种新型果胶纳米药物的制备方法，具有缓释功能、癌靶向性及稳定的粒径大小。本专利技术以果胶与八臂聚乙二醇为药物载体，DHA与亲水线性聚合物八臂聚乙二醇键接，所得的果胶-载药八臂聚乙二醇的聚合物自组装制备纳米粒子，结构比较稳定，制作工艺简单，实现药物的水溶性和缓释功能，以及对癌细胞的靶向性，并具有较高载药量，纳米药物的粒径为10-200nm。相对现有技术，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术的一种新型果胶纳米药物具有癌靶向性，生物相容性好，毒副作用低，具有缓释功能，果胶-载药八臂聚乙二醇的聚合物在自组装的同时还包裹HCPT，增大了载药量，联合DHA和HCPT靶向作用于肿瘤部位，以达到诱导肿瘤凋亡的目的。本专利技术的药物合成及自组装成纳米药物过程操作简单，只需在水介质中形成纳米粒子，纳米粒子稳定。附图说明图1为合成高分子化合物PET-8ARM-PEG-DHA的核磁图图2为纳米粒子的透射电镜形貌图。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术作进一步说明。实施例1、一种新型果胶纳米药物的制备方法：（1）PET的乙酰化取一定量的PET（酯化度50%～75%），缓慢加入冰醋酸、乙酸酐和硫酸，冰浴下反应一段时间，然后升温至50℃，搅拌至溶液澄清，混合物旋蒸，乙醇洗至中性，冷冻干燥，得到乙酰化果胶粉末A。（2）8ARM-PEG-DHA的合成用20ml四氢呋喃溶解1.0g的八臂聚乙二醇，加入1.0g激活剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC），0.12g催化剂4-二甲氨基吡啶（DMAP），搅拌，再加入2mol双氢青蒿素反应40～48h，反应物混合物旋蒸，透析过夜，透析液冷冻干燥，得到粉末B；（3）PET-8ARM-PEG-DHA的合成取0.2g步骤（2）中的粉末B溶于DMSO，加入0.2gEDC和0.02gDMAP，反应30min，然后加入0.1g果胶，反应30～50h，得到反应混合液；（4）PET-8ARM-PEG-DHA的纯化将步骤（3）中得到的反应混合液加入乙醚，得到絮状沉淀，离心洗涤多次，真空干燥，得到果胶-载药八臂聚乙二醇粉末C；（5）PET-8ARM-PEG-DHA和HCPT的自组装取30mg步骤（4）中粉末B和8mg10-羟基喜树碱溶于5ml二甲基亚砜，搅拌溶解5min，然后逐滴滴入去离子水中，纳米粒子溶液在PBS溶液中透析12h，每3h换一次透析液，所得溶液透析过夜，冷冻干燥，得到所述果胶-八臂聚乙二醇纳米粒子，粒径大小为10～80nm。实施例2、一种新型果胶纳米药物的制备方法：在本实例中，通过与实施例1相同的合成方法及步骤，八臂聚乙二醇与双氢青蒿素的摩尔比为1:4，所述的果胶与载药八臂聚乙二醇的摩尔比为1:4测得粒径大小为20～100nm。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型果胶纳米药物的制备方法，其特征在于，载有双氢青蒿素（DHA)的八臂聚乙二醇（8ARM‑PEG‑COOH）与果胶（PET）通过酯键相连。

【技术特征摘要】
1.一种新型果胶纳米药物的制备方法，其特征在于，载有双氢青蒿素（DHA)的八臂聚乙二醇（8ARM-PEG-COOH）与果胶（PET）通过酯键相连。2.如权利要求1所述的一种新型果胶纳米药物的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）用四氢呋喃溶解一定量的八臂聚乙二醇，加入激活剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC），催化剂4-二甲氨基吡啶（DMAP），搅拌，再加入一定摩尔质量的双氢青蒿素反应40～48h，反应物混合物旋蒸，透析过夜，透析液冷冻干燥，得到粉末A；（2）取一定量的步骤（1）中的粉末A溶于DMSO，加入EDC和DMAP，反应30min，然后加入一定量的果胶，反应35～50h，得到反应混合液；（3）将步骤（2）中得到的反应混合液...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷建都，刘彦雪，刘静，何静，王璐莹，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11