通过间接免疫荧光测定的终点效价确定方法及其评估方法技术

本发明专利技术涉及通过间接免疫荧光测定确定在人血清中抗细胞核和细胞质抗原抗体的终点效价确定方法。本发明专利技术进一步涉及通过间接免疫荧光测定确定人血清中抗细胞核和细胞质抗原抗体的体外诊断试剂盒，以及在所述方法框架内评估和确定终点效价的计算机程序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】描述本专利技术涉及通过间接免疫荧光测定确定在人血清中抗细胞核和细胞质抗原的抗体的终点效价确定方法。本专利技术进一步涉及通过间接免疫荧光测定确定人血清中抗细胞核 和细胞质抗原抗体的体外诊断试剂盒，以及在所述方法框架内评估和确定终点效价的计算 机程序。
技术介绍
自身免疫疾病是由免疫系统对于机体自身组织过度反应所致疾病。免疫系统将机 体自身组织错误地检测为待攻击的外来物质。由此产生严重的炎症反应，可导致受累器官 的损害。T细胞负责检测外来物质。T细胞在胸腺中被训练以仅停靠在MHC分子上及耐受 机体自身物质。在自身免疫疾病中，这些细胞表现为与其性质相反。代替防御进入体内的 外来物质，它们攻击机体自身结构。生物体生命所必需的器官和组织被免疫系统识别为外 来物质。免疫系统命令其全部力量对抗这些结构，包括细胞和体液防御反应，导致自身抗体 产生。这些器官和组织因此随着时间的推移而丧失其功能。本专利技术因此涉及自身免疫疾病 的诊断和及随后的治疗。原则上，可以通过检测自身抗体谱(Profiler!)对自身免疫疾病进行血清学鉴定。 大多数这些抗体针对细胞核和细胞质抗原。抗核抗体(ANA)主要与风湿性疾病相关。本文档来自技高网...

【技术保护点】
通过间接免疫荧光测定确定人血清中抗细胞核和细胞质抗原的抗体的终点效价确定方法，所述方法包括如下步骤：ａ．患者血清内含有的自身抗体与固定于玻片上的ＨＥｐ－２细胞、白细胞、绿蝇短膜虫和组织切片的抗原反应并结合，ｂ．特异性荧光标记结合的自身抗原，ｃ．除了在评估系统中使用荧光强度光记录和评估荧光光学成像之外，还对结合在所述玻片上的荧光标记的自身抗体进行荧光显微镜分析，其特征在于：ｄ．在进行所述方法步骤之前，所述评估系统：ａ）用具有限定效价的至少两个对照血清校准以产生系列稀释液，ｂ）测量所述系统的荧光激发光，ｅ．相对于对照血清的效价设定记录的荧光光学图像的荧光强度，从而提供所研究的患者血清的终点效价。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】DE 2007-11-13 102007054792.9通过间接免疫荧光测定确定人血清中抗细胞核和细胞质抗原的抗体的终点效价确定方法，所述方法包括如下步骤a.患者血清内含有的自身抗体与固定于玻片上的HEp-2细胞、白细胞、绿蝇短膜虫和组织切片的抗原反应并结合，b.特异性荧光标记结合的自身抗原，c.除了在评估系统中使用荧光强度光记录和评估荧光光学成像之外，还对结合在所述玻片上的荧光标记的自身抗体进行荧光显微镜分析，其特征在于d.在进行所述方法步骤之前，所述评估系统a)用具有限定效价的至少两个对照血清校准以产生系列稀释液，b)测量所述系统的荧光激发光，e.相对于对照血清的效价设定记录的荧光光学图像的荧光强度，从而提供所研究的患者血清的终点效价。2.权利要求1的方法，其中所述特异性荧光标记使用荧光标记的抗人抗体进行。3.权利要求1或2的方法，其中加入防脱色试剂以稳定荧光信号。4.权利要求3的方法，其中所述防脱色试剂是2，3，5，6-四甲基-1，4-苯二胺。5.权利要求1-4任一项的方法，其中所研究的患者血清的终点效价得自最终曝光时 间、患者血清的初始效价以及相机的曝光时间，优选根据确定的校准函数确定，在最简单的 线性情况中，其可以根据如下等式计算血清效价佼＝输入效价/曝光时间*最终爆光时间6.在通过间接免疫荧光测定优选根据权利要求1-5的方法确定人血清中抗细胞核和 细胞质抗原的抗体中在自身抗体诊断中用于终...

【专利技术属性】
技术研发人员：R希门，
申请(专利权)人：MEDIPAN有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]