油酰胺水解酶的抑制剂制造技术

油酰胺水解酶抑制剂，所述的抑制剂包含首基和共价键连接于所述首基的烃尾基，其中所述的首基包括亲电子羰基和选自由下列结构式代表的基团： ＊＊＊ 和其中所述的烃尾基选自由下列结构式代表的基团： ＊＊＊。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术范围本专利技术涉及油酰胺(oleamide)水解酶抑制剂以及涉及关于油酰胺诱导睡眠的兴奋剂。更确切的说，本专利技术涉及能够显示关于油酰胺水解酶抑制活性和/或关于油酰胺诱导睡眠的兴奋活性的过渡态模拟和机理为基础的(transition-state-mimetic and mechanism-based)的油酰胺衍生物。本专利技术的背景油酰胺(1，顺-9-十八烯酰胺(octadenamide))是天然存在于脑组织中的一种成份，在睡眠缺乏和睡眠恢复的状态下分别显示出它的累积和消失(Cavat et al.,Science 1995,268,1506-1509；Lerner et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A 1994,91,9505-9508；Cravatt et al.,J.Am.Chem.Soc.1996,118,580-590)。在特殊结构的方式上，当以毫微摩尔量静脉注射时，1在动物体上已显示可诱导生理性睡眠(Caravat et al.,Science1995,268,1506-1509)。用存在于细胞膜上的酶(油酰胺水解酶)水解1可迅速将油酰胺降解成油酸(顺-9-十八烯酸)。在努力分离用于控制内源性1浓度的调节剂中，发现整合膜蛋白(油酰胺水解酶)可催化油酰胺水解降解，得到油酸(顺-9-十八烯酸)和氨(图3)，未显示出嗜睡的活性(Cravat et al.,Science 1995,268,1506-1509)。已发现苯基甲磺酰氟、4,4’-二硫代二吡啶二硫化物(强二硫化物形成剂)和HgCl2(IC50=700nM,Ki,app=37nM)可抑制油酰胺水解酶，而1mM EDTA却不能抑制。这表明硫醇密切参与催化过程，所述的酶可以是半胱氨酸酰胺酶或可能是具有半胱氨酸残基活性位点的丝氨酸酰氨酶。已介绍了变异的密切连接或不可逆的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂。这些包括不可逆的抑制剂如卤代甲基酮(Kettner et al.,Biochemistry 1978,17,4778-4784；Kettner et al.,Thromb.Res.1979,14,969-973；C.Giordano,et al.,Eur,J.Med.Chem.1992,27,865-873；Rauber et al.,Biochem,J.1986,239,633-640；Angliker et al.,Biotherm.J.1987,241,871-875),Michael受体(Hanzlik et al.,J.Med.Chen.1984,27,711-712)环氧化物(C.Parkes,et al.,Biochem.J.1985,230,509-516),O-酰基羰胺(Bromme et al.,Biochem.J.1989,263,861-866)和重氮甲基酮(Green et al.,J.Biol.Chem.1981,256,1923-1928)以及可逆过渡态模拟抑制剂如酮(Mehdi,S.Bioorg,Chem.1993,21,249-259)，醛(Westerik etal.,J.Biol.Chem.1972,247,8195-8197)，环丙烯酮(cyclopropenones)(Ando et al.,J.Am Chem.Soc.1993,115,1174-1175)和缺电子羰基化合物如三氟甲基酮(Wolfenden et al.,Annu.Rev.Biophys.Bioeng.1976,5,271；Gelb et al.,Biochemistry 1985,24,1813-1817；Imperiali；et al.,Biochemistry 1986,25,3760-376；Koutek et al.,J.Biol.Chem.1994,269,22937-22940),α-酮酸衍生物(Li,z,et al.,J.Med.Chem.1993,36,3472-3480；Harbeson et al.,J.Med.Chem.1994,37,2918-2929；Peet et al.,J.Med.Chem,1990,33,394-407；Angelastro et al.,J.Med.Chem.1990,33,11-13)和三羰基化合物(Wasserman et al.,J.Org,Chem.1993,58,4785-4787)。另一方面，已报道了仅仅一种可能的特异性的油酰胺水解酶抑制剂([S]=0.26Km时，IC50=3μm)(Maurelli；et al.,FEBS Lett.1995,377,82-86)且到目前为止是唯一公开的研究有关脂肪酸酰胺酶的抑制剂的报告(Koutek et al.,J.Biol.Chem.1994,269,22937-22940)。所需的是抑制油酰胺水解的高效油酰胺水解酶抑制剂和油酰胺诱导睡眠的兴奋剂。本专利技术简述本专利技术的一个方面是涉及油酰胺水解酶抑制剂。该抑制剂被设计成在油酰胺水解酶中与活性位点半胱氨酸残基相互作用。该抑制剂作用迅速，具有选择性并效力强(Ki=13μM-1nM)。该抑制剂用于抑制油酰胺(一种睡眠诱导因子)的水解。该抑制剂也可作为进一步鉴定油酰胺生物作用的工具。该抑制剂为包含首基和烃尾基的构型。首基以共价连接烃尾上并包括亲电子的羰基。优选首基选自由下列结构式代表的基团 优选的烃尾基选自由下列结构式代表的基团 优选的抑制剂包含如下 本专利技术的另一方面涉及抑制与油酰胺水解有关的油酰胺水解酶的方法。该方法应用油酰胺水解酶与抑制剂接触或结合的作用。该抑制剂包含有首基和以其共价键连接的烃尾基的构型。首基包括亲电子的羰基。优选首基选自由下列结构式代表的基团 优选的烃尾基选自由下列结构式代表的基团 上述方法中应用的优选抑制剂包括上述列举的抑制剂和下面的其它的抑制剂 本专利技术的另一方面涉及在对油酰胺敏感动物中诱导睡眠的方法。更确切的说，本专利技术该方面涉及对油酰胺敏感动物给予有效剂量的油酰胺水解酶兴奋剂。优选的兴奋剂由下列结构式代表 图表简介附图说明图1表示22个油酰胺水解酶抑制剂具有的抑制常数(Ki,app(μM)；对油酰胺而言，Km=5±2μM。图2表示向CD3OD或丙酮-d6中的亲电子羰基定量加入CD3OD或D2O并建立的1H NMR和13C NMR数据。数据显示了水合程度和抑制剂羰基的相对亲电子性。预计趋势如下11＞12＞8＞6≥4。这些趋势有代表性的11和12在CD3OD中全部转化成它们的半缩醛而其余的抑制剂表现出降低的半缩醛，形成与其预期的亲电子性的一致性11(100％)、12(100％)、8(75％)、6(48％)和4(47％)。图3表示经油酰胺水解酶使油酰胺水解降解得到油酸(顺-9-十八烯酸)和氨。图4表示化合物6(Molar)抑制油酰胺水解酶催化剂油酰胺1降解(1/速率(min/μM)活性的dixon图。图5表示化合物11(Molar)抑制油酰胺水解酶(速率(μM/min/100μL))的能力。图6表示由化合物12竞争油酰胺水解酶抑制性(1/v(min/μM))的Lineweaver-Burke图。图7表示油酰胺水解酶分解化合物1对pH相对速率曲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1．油酰胺水解酶抑制剂，所述的抑制剂包含首基和共价键连接于所述首基的烃尾基，其中所述的首基包括亲电子羰基和选自由下列结构式代表的基团和其中所述的烃尾基选自由下列结构式代表的基团2．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂3．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂4．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂5．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂6．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂7．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂8．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂9．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂10．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂11．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂12．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂12．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂13．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂14．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂15．由下面结构式代表的如权利要求1所述的油酰胺水解酶的抑制剂16．通过与抑制剂接触抑制油酰胺水解酶的方法，所述的抑制剂包含首基和以共价键连接于所述的首基的烃尾基，其中所述的首基包括亲电子羰基和选自由下列结构式代表的基团和其中所述的烃尾基选自由下列结构式代表的基团17．如权利要求16所述的抑制油酰胺水解酶的方法，其中所述抑制剂由下面结构式代表18．如权利要求16所述的抑制油酰胺水解酶的方法，其中所述抑制剂由下面结构式代表19．如权利要求16所述的抑制油酰胺水解酶的...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·A·勒尔纳，C·H·王，D·L·波格尔，S·H·亨克森，
申请(专利权)人：斯克里普斯研究学院，
类型：发明
国别省市：