本发明专利技术涉及诊断前列腺癌的方法，所述方法包括用特定试剂测定膜联蛋白Ａ３（ＡＮＸＡ３）和／或针对ＡＮＸＡ３的自身抗体。本发明专利技术允许对良性、癌前和恶性病况加以区分。此外，所述方法具有预后相关性。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及诊断前列腺癌的方法，所述方法包括用特定试剂测定 膜联蛋白(annexin) A3 (ANXA3)和/或针对ANXA3的自身抗体。本发 明允许对良性、癌前和恶性病况加以区分。此外，所述方法具有预后 相关性。
技术介绍
在以前的区分性定量蛋白表达研究中显示，ANXA3与前列腺癌症 显著相关U)。但是，对于ANXA3在人前列腺中的作用和生物学却所 知甚少。目前显示，ANXA3是所谓的外来体(多种上皮细胞释放的小 嚢泡)的一部分(2)，这些外来体在对先天免疫系统的调控中的作用 也极少为人所知(3)，它们的抗肿瘤活性非常近来才被发现(4)。 近来的报道显示前列腺癌症患者中有针对所谓前列腺小体(其是来自 前列腺的外来体)的自身免疫性(5)。用于治疗或诊断前列腺癌症和泌尿生殖道的其它上皮癌症的蛋 白生物标记物被描述于US 2005 130 876、 W0 03 086 461、 WO 2005 078 124、 EP 05 Oil 042. 8和EP 05 026 092. 6中。这些文献的内容都通 过引用并入本文。US 60/812， 089和US 60/859， 489公开了 一种癌症诊断方法，其 中，用高度特异性的单克隆抗体针对膜联蛋白A3的存在和/或含量来 分析样品。这些文献的内容都通过引用并入本文。虽然ANXA3已知是前列腺癌症的标记物，但仍需要改进的方法用 于对良性、癌前和恶性病况加以区分性诊断。
技术实现思路
本研究的目的之一是调查ANXA3在良性前列腺上皮、高度前列腺 上皮内瘤(HGPIN)和前列腺癌症的上皮组分中的表达和定位，以及理解前列腺转化进程中的定位改变和区别。根据本专利技术，我们发现，良性前列腺组织中抗ANXA3染色强且在 尖部(apical)，而在癌症中其较弱并且处于更基底处。用超过1900 个病例进行的组织阵列研究显示，ANXA3表达在良性、癌前和恶性前 列腺组织冲的不同模式具有预后相关性并且提供了机制性的理解。在进展期癌症中，观察到ANXA3在非上皮散布Unterspresed) 细胞中的存在，其通过针对调控性T-细胞(Tregs)的复染色而局部 化(colocalize)。此外，可在癌症患者中检测到针对ANXA3的自身 抗体的存在。这些针对ANXA3的自身抗体可能是在癌症细胞的氧化应 激下被诱导出来的。这证明经由外来体的ANXA3释放构成了一种保 护性机制，在前列腺癌症患者中，癌症细胞通过诱导针对含ANXA3的 前列腺小体的自身免疫试图复原。因此，可通过ANXA3外来体和/或癌 症细胞来调节Tregs的信号化。此外，可通过ANXA3阳性T细胞来诱 导/调控针对前列腺小体/外来体的自身免疫抗体。综合考虑，强烈表明良性前列腺增生(BPH)期间ANXA3向前 列腺细胞外区室中的释放构成针对癌症的防御机制，癌組织通过诱导 针对ANXA3的自身免疫抗体以及通过涉及到调控性T-细胞(Tregs ) 的机制，最终使得这种释放停止。不同的ANXA3染色模式也首次提供 了在通过Gleason分数、pT-分期和PSA划分的中等风险组中预测PSA 无进展存活的可能性。在笫一个方面，本专利技术涉及诊断癌症(优选地，前列腺癌症)的 下述方法，其中针对膜联蛋白A3的细胞内分布来分析组织样品。在另一方面，本专利技术涉及诊断癌症(优选地，前列腺癌症)的下 述方法，其中，针对膜联蛋白A3的细胞内分布和/或含量以及针对对 膜联蛋白A3的自身免疫应答，对样品(例如组织样品或体液样品)加 以分析，其中，优选通过针对膜联蛋白A3的自身抗体的存在和/或通 过调控性T-细胞的存在，来表征自身免疫应答。本专利技术的另一方面涉及诊断癌症(优选地，前列腺癌症)的下述 方法，其中，针对针对膜联蛋白A3的自身抗体的存在和/或含量以及分析。本专利技术的还一方面涉及对已被归类为具有发展性前列腺癌症中等风险的受试者进行程度划分的方法，其中，针对膜联蛋白A3的存在、定位和/或含量对来自所述受试者的样品加以分析。本专利技术的还一方面是用于诊断癌症(优选地，前列腺癌症)的测试试剂，其包含(i)用于测定膜联蛋白A3的试剂和(ii)用于测定针对膜联蛋白A3的自身抗体的试剂和/或用于测定调控性T-细胞的试剂。本专利技术的还一方面是用于诊断前列腺癌症的测试试剂，其包含用于测定针对膜联蛋白A3的自身抗体的试剂。可根据本专利技术诊断的癌症优选是泌尿生殖和/或胃肠道的癌症，例如前列腺、膀胱、肾、尿道、卵巢、子宫或结肠的癌症。特别地，癌症是上皮癌。在一种尤其优选的实施方式中，癌症是前列腺癌症。在一种优选的实施方式中，本专利技术包括对疾病阶段的区分性诊断和/或预后评价。例如，本专利技术允许对选自下述的疾病阶段进行区分性诊断(i) 良性病况，特别地，良性前列腺病况，例如，良性前列腺增生(BPH)、纤维化和慢性前列腺炎，(ii) 癌前病况，例如，多种阶段(PIN-l-3)的前列腺上皮内瘤，包括高度上皮内瘤(HGPIN) 1，和/或(iii) 恶性病况，例如，前列腺癌，特别是通过Gleason分数和pT-分期指示的处于进展期(progressed )状态的进展期(advanced )前列腺癌。更优选地，本专利技术允许一方面在良性和癌前病况之间进行区分性诊断，另一方面对恶性病况进行区分性诊断。在本专利技术的一种优选的实施方式中，在样品中测定ANXA3的存在、含量和/或分布，所述样品可以是体液或组织样品。更优选地，样品是组织样品，例如，来自前列腺组织的组织切片或活检样品。在另一实施方式中，可在样品中测定ANXA3的细胞内分布/定位，其中所述样品是组织样品，优选是组织切片或活检样品，例如来自前列腺组织的。优选地，在上皮细胞中测定ANXA3的细胞内定位，特别是在前列腺上皮细胞中测定。应当注意，可在单种组织样品或不同样品(例如，来自同一受试者的体液样品和组织样品)上测定存在、含量和细胞内定位。样品中高含量的ANXA3 (例如，对应于组织样品的强染色)基本上指示良性病况。中等/低含量的ANXA3 (例如，对应于组织样品的弱/中等染色)指示癌前病况或者早期/早-中期恶性病况。样品中不存在ANXA3指示恶性病况，基本上是处于进展期状态的恶性病况，例如，在中期或晚期。此外，样品中不存在ANXA3指示前列腺癌证的侵略性亚组，特别是具有手术(根治性前列腺切除术)后进展的高风险。ANXA3的尖部细胞内定位，特别是ANXA3在尖部定位的嚢泡(例如外来体和前列腺小体)中的存在，基本上指示良性或癌前病况。ANXA3的扩散性细胞内定位，特别是组合不存在尖部定位的嚢泡的情况时，指示恶性病况。针对ANXA3的自身免疫应答的存在，例如，针对ANXA3的自身抗体的存在，和/或强ANXA3-阳性(但是是细胞内的，非尖部的)调控T-细胞的存在，基本上指示恶性病况，特别是处于进展期状态的恶性病况。本专利技术包括对样品中多肽或细胞的测定。优选地，这种测定包括免疫学方法，其中，使用免疫测试试剂来测定组分的存在、含量和/或定位。用于测定样品中ANXA3的试剂优选是特异于ANXA3的抗体，例如，多克隆抗体或单克隆抗体。尤其优选的是高特异性单克隆抗体，如us60/812, 089和US 60/859, 489 (它们通过引用并入本文)所述。用于测定样品中A本文档来自技高网...
【技术保护点】
诊断癌症的方法，其中，针对膜联蛋白Ａ３的细胞内分布对样品加以分析。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：A施拉滕赫尔兹，
申请(专利权)人：普罗迪奥塞斯股份公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]
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